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- EMDB-1809: Yeast 80S ribosome stalled by a stem-loop containing mRNA in comp... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-1809
タイトルYeast 80S ribosome stalled by a stem-loop containing mRNA in complex with Dom34p and N-terminally truncated Hbs1p.
マップデータThis is a 3D reconstruction of a yeast 80S ribosome stalled by stable stem-loop- containing mRNA in complex with proteins Dom34p and N-terminally-truncated Hbs1p (Hbs1-delta1-152).
試料
  • 試料: sSem-loop stalled yeast 80S ribosome/Dom34-delta(1-152)Hbs1 complex
  • 複合体: Saccharomyces cerevisiae 80S ribosome
  • タンパク質・ペプチド: Hbs1p
  • タンパク質・ペプチド: Dom34p
キーワードRibosome / stalling / mRNA / P-site tRNA / no-go mRNA decay
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 27.0 Å
データ登録者Becker T / Armache JP / Anger AM / Jarasch A / Villa E / Sieber H / AbdelMotaal B / Berninghausen O / Mielke T / Beckmann R
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / : 2011
タイトル: Structure of the no-go mRNA decay complex Dom34-Hbs1 bound to a stalled 80S ribosome.
著者: Thomas Becker / Jean-Paul Armache / Alexander Jarasch / Andreas M Anger / Elizabeth Villa / Heidemarie Sieber / Basma Abdel Motaal / Thorsten Mielke / Otto Berninghausen / Roland Beckmann /
要旨: No-go decay (NGD) is a mRNA quality-control mechanism in eukaryotic cells that leads to degradation of mRNAs stalled during translational elongation. The key factors triggering NGD are Dom34 and Hbs1. ...No-go decay (NGD) is a mRNA quality-control mechanism in eukaryotic cells that leads to degradation of mRNAs stalled during translational elongation. The key factors triggering NGD are Dom34 and Hbs1. We used cryo-EM to visualize NGD intermediates resulting from binding of the Dom34-Hbs1 complex to stalled ribosomes. At subnanometer resolution, all domains of Dom34 and Hbs1 were identified, allowing the docking of crystal structures and homology models. Moreover, the close structural similarity of Dom34 and Hbs1 to eukaryotic release factors (eRFs) enabled us to propose a model for the ribosome-bound eRF1-eRF3 complex. Collectively, our data provide structural insights into how stalled mRNA is recognized on the ribosome and how the eRF complex can simultaneously recognize stop codons and catalyze peptide release.
履歴
登録2010年10月23日-
ヘッダ(付随情報) 公開2011年5月27日-
マップ公開2011年5月27日-
更新2011年9月9日-
現状2011年9月9日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.22
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(高さに従い着色)
  • 表面レベル: 0.22
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_1809.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 9.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈This is a 3D reconstruction of a yeast 80S ribosome stalled by stable stem-loop- containing mRNA in complex with proteins Dom34p and N-terminally-truncated Hbs1p (Hbs1-delta1-152).
ボクセルのサイズX=Y=Z: 3.62 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.095 / ムービー #1: 0.22
最小 - 最大-0.318632 - 1.41011
平均 (標準偏差)0.0360597 (±0.20508)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderYXZ
Origin-69-69-68
サイズ138138138
Spacing138138138
セルA=B=C: 499.56 Å
α=β=γ: 90 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z3.623.623.62
M x/y/z138138138
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z499.560499.560499.560
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-69-69-68
NX/NY/NZ138138138
MAP C/R/S213
start NC/NR/NS-69-69-68
NC/NR/NS138138138
D min/max/mean-0.3191.4100.036

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : sSem-loop stalled yeast 80S ribosome/Dom34-delta(1-152)Hbs1 complex

全体名称: sSem-loop stalled yeast 80S ribosome/Dom34-delta(1-152)Hbs1 complex
要素
  • 試料: sSem-loop stalled yeast 80S ribosome/Dom34-delta(1-152)Hbs1 complex
  • 複合体: Saccharomyces cerevisiae 80S ribosome
  • タンパク質・ペプチド: Hbs1p
  • タンパク質・ペプチド: Dom34p

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超分子 #1000: sSem-loop stalled yeast 80S ribosome/Dom34-delta(1-152)Hbs1 complex

超分子名称: sSem-loop stalled yeast 80S ribosome/Dom34-delta(1-152)Hbs1 complex
タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: Single particle / 集合状態: One ribosome / Number unique components: 3
分子量実験値: 3.3 MDa / 理論値: 3.3 MDa

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超分子 #1: Saccharomyces cerevisiae 80S ribosome

超分子名称: Saccharomyces cerevisiae 80S ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: Yeast 80S ribosome
詳細: The mRNA stem-loop structure is not visible in the Cryo-EM reconstruction indicating its flexibility.
Ribosome-details: ribosome-eukaryote: ALL
分子量実験値: 3.2 MDa / 理論値: 3.2 MDa

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分子 #1: Hbs1p

分子名称: Hbs1p / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Hbs1p
詳細: Hbs1 is N-terminally truncated lacking the first 152 amino acids.
コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Bakers's yeast / 細胞: Yeast cell / Organelle: Cytosol / 細胞中の位置: Cytosol
分子量実験値: 69 KDa / 理論値: 68 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 組換プラスミド: pET28b

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分子 #2: Dom34p

分子名称: Dom34p / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: Dom34p / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Bakers's yeast / 細胞: Yeast cell / Organelle: Cytosol / 細胞中の位置: Cytosol
分子量実験値: 44 KDa / 理論値: 44 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 組換プラスミド: pET21a

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.02 mg/mL
緩衝液pH: 7
詳細: 20 mM Tris/HCl, pH 7.0, 80 mM NaCl, 97 mM KOAc, 10 mM Mg(OAc)2, 1.5 mM DTT, 0.02% Nikkol, 1.8% Glycerol, 0.01 mg/ml Cycloheximide, 0.5 mM GDPNP
グリッド詳細: Quantifoil Grid with 2 nm carbon on top
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: Vitrobot
手法: Blotted for 10 seconds before plunging, used 2 layer of filter paper

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI 12
温度平均: 84 K
アライメント法Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 100000 times magnification
撮影カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: FEI EAGLE (2k x 2k) / 実像数: 97 / 平均電子線量: 25 e/Å2 / 詳細: Images recorded on CCD. / ビット/ピクセル: 16
電子線加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6
電子光学系倍率(補正後): 90000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 90000
試料ステージ試料ホルダー: FEI Polara Cartridge System / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN

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画像解析

CTF補正詳細: CTF correction on the level of 3D volumes (SPIDER TF CTS command)
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 27.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER / 使用した粒子像数: 71400

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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