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万見
- EMDB-1804: Conformational flexibility of RNA polymerase III during transcrip... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-1804
タイトルConformational flexibility of RNA polymerase III during transcriptional elongation
マップデータRNA Polymerase III at 10A
試料
  • 試料: RNA Polymerase III
  • タンパク質・ペプチド: RNA polymerase III
キーワードTranscription / RNA polymerase III / elongation complex / transcription initiation / transcription elongation / transcription termination
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.0 Å
データ登録者Fernandez-Tornero C / Bottcher B / Rashid UJ / Steuerwald U / Florchinger B / Devos DP / Lindner D / Muller CW
引用ジャーナル: EMBO J / 年: 2010
タイトル: Conformational flexibility of RNA polymerase III during transcriptional elongation.
著者: Carlos Fernández-Tornero / Bettina Böttcher / Umar Jan Rashid / Ulrich Steuerwald / Beate Flörchinger / Damien P Devos / Doris Lindner / Christoph W Müller /
要旨: RNA polymerase (Pol) III is responsible for the transcription of genes encoding small RNAs, including tRNA, 5S rRNA and U6 RNA. Here, we report the electron cryomicroscopy structures of yeast Pol III ...RNA polymerase (Pol) III is responsible for the transcription of genes encoding small RNAs, including tRNA, 5S rRNA and U6 RNA. Here, we report the electron cryomicroscopy structures of yeast Pol III at 9.9 Å resolution and its elongation complex at 16.5 Å resolution. Particle sub-classification reveals prominent EM densities for the two Pol III-specific subcomplexes, C31/C82/C34 and C37/C53, that can be interpreted using homology models. While the winged-helix-containing C31/C82/C34 subcomplex initiates transcription from one side of the DNA-binding cleft, the C37/C53 subcomplex accesses the transcription bubble from the opposite side of this cleft. The transcribing Pol III enzyme structure not only shows the complete incoming DNA duplex, but also reveals the exit path of newly synthesized RNA. During transcriptional elongation, the Pol III-specific subcomplexes tightly enclose the incoming DNA duplex, which likely increases processivity and provides structural insights into the conformational switch between Pol III-mediated initiation and elongation.
履歴
登録2010年10月4日-
ヘッダ(付随情報) 公開2010年10月8日-
マップ公開2010年11月1日-
更新2011年9月9日-
現状2011年9月9日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.4
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.4
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

1804.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_1804.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 21.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈RNA Polymerase III at 10A
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.4 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.4 / ムービー #1: 0.4
最小 - 最大-2.81566 - 3.5073
平均 (標準偏差)-0.00622229 (±0.324437)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ180180180
Spacing180180180
セルA=B=C: 252 Å
α=β=γ: 90 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.41.41.4
M x/y/z180180180
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z252.000252.000252.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ-150-150-149
NX/NY/NZ300300300
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS180180180
D min/max/mean-2.8163.507-0.006

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : RNA Polymerase III

全体名称: RNA Polymerase III
要素
  • 試料: RNA Polymerase III
  • タンパク質・ペプチド: RNA polymerase III

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超分子 #1000: RNA Polymerase III

超分子名称: RNA Polymerase III / タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: Sample was monodisperse
集合状態: RNA PolIII complex of 17 different polypeptides
Number unique components: 1
分子量実験値: 700 KDa / 理論値: 700 KDa / 手法: Native mass spectrometry

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分子 #1: RNA polymerase III

分子名称: RNA polymerase III / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Pol III / 集合状態: Complex of 17 subunits / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Baker's yeast / 細胞中の位置: Nuclear
分子量実験値: 700 KDa / 理論値: 700 KDa
組換発現生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.5 mg/mL
緩衝液pH: 7.4
詳細: 10 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM Ammonium sulphate, 10 mM DTT
グリッド詳細: 400 mesh copper rhodium grids coated with perforated carbon film
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: HOMEMADE PLUNGER
詳細: Vitrification instrument: Controlled environment, self-built
手法: Blot for 15 s in controlled environment chamber before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI/PHILIPS CM200FEG
温度平均: 95 K
アライメント法Legacy - 非点収差: Astigmatism was corrected at 200,000 times magnification
撮影カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 7 µm / 実像数: 593 / ビット/ピクセル: 8
Tilt angle min0
Tilt angle max0
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 5.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.6 µm / 倍率（公称値）: 50000
試料ステージ試料ホルダー: eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN

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画像解析

詳細ca. 100000 particles were sorted into three groups according to compositional differences. The reconstruction shows the most complete species and represents ca. 48% of the particle population.
CTF補正詳細: Each particle
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER
詳細: Maps were calculated from defocus groups,and added. final combined map was amplitude corrected
使用した粒子像数: 40200

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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