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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1778 | |||||||||
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| タイトル | Structure of the Nuclear Chaperone Nucleoplamsin. | |||||||||
マップデータ | This a map of the nuclear chaperone nucleoplasmin. | |||||||||
試料 |
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キーワード | Nucleoplasmin / Histone H2A / Histone H2B / Chaperone / Chromatin / Nuclear-chaperone / Histone-chaperone | |||||||||
| 機能・相同性 | Nucleoplasmin family 機能・相同性情報 | |||||||||
| 生物種 | ||||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 21.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Ramos I / Martin-Benito J / Finn R / Bretana L / Aloria K / Arizmendi JM / Ausio J / Muga A / Valpuesta JM / Prado A | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2010タイトル: Nucleoplasmin binds histone H2A-H2B dimers through its distal face. 著者: Isbaal Ramos / Jaime Martín-Benito / Ron Finn / Laura Bretaña / Kerman Aloria / Jesús M Arizmendi / Juan Ausió / Arturo Muga / José M Valpuesta / Adelina Prado / ![]() 要旨: Nucleoplasmin (NP) is a pentameric chaperone that regulates the condensation state of chromatin extracting specific basic proteins from sperm chromatin and depositing H2A-H2B histone dimers. It has ...Nucleoplasmin (NP) is a pentameric chaperone that regulates the condensation state of chromatin extracting specific basic proteins from sperm chromatin and depositing H2A-H2B histone dimers. It has been proposed that histones could bind to either the lateral or distal face of the pentameric structure. Here, we combine different biochemical and biophysical techniques to show that natural, hyperphosphorylated NP can bind five H2A-H2B dimers and that the amount of bound ligand depends on the overall charge (phosphorylation level) of the chaperone. Three-dimensional reconstruction of NP/H2A-H2B complex carried out by electron microscopy reveals that histones interact with the chaperone distal face. Limited proteolysis and mass spectrometry indicate that the interaction results in protection of the histone fold and most of the H2A and H2B C-terminal tails. This structural information can help to understand the function of NP as a histone chaperone. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_1778.map.gz | 1.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-1778-v30.xml emd-1778.xml | 9.2 KB 9.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_1778.tif | 756.1 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1778 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1778 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_1778_validation.pdf.gz | 201.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_1778_full_validation.pdf.gz | 200.2 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_1778_validation.xml.gz | 4.7 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1778 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1778 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1778.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 注釈 | This a map of the nuclear chaperone nucleoplasmin. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.3 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Nucleoplasmin chaperone
| 全体 | 名称: Nucleoplasmin chaperone |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1000: Nucleoplasmin chaperone
| 超分子 | 名称: Nucleoplasmin chaperone / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Pentameric / Number unique components: 1 |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: 110 KDa / 理論値: 110 KDa |
-分子 #1: Nucleoplasmin
| 分子 | 名称: Nucleoplasmin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Nucleoplasmin / コピー数: 5 / 集合状態: Pentamer / 組換発現: No |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: |
| 分子量 | 実験値: 110 KDa / 理論値: 110 KDa |
| 配列 | InterPro: Nucleoplasmin family |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | ネガティブ染色法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 緩衝液 | pH: 7.5 / 詳細: 2mM MgCl2, 240mM NaCl, 25 mM Tris-HCl |
|---|---|
| 染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Grids were stained with 2% w/v Uranyl Acetate solution for 1 minute. |
| グリッド | 詳細: 200 mesh CuRh grid |
| 凍結 | 凍結剤: NONE / 装置: OTHER |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | JEOL 1200EXII |
|---|---|
| アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 200,000 times magnification |
| 撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 2.3 µm / 実像数: 10 / 詳細: downsampling factor of 2 / ビット/ピクセル: 8 |
| 電子線 | 加速電圧: 100 kV / 電子線源: TUNGSTEN HAIRPIN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 5.6 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 60000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: JEOL |
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画像解析
| CTF補正 | 詳細: Each plate |
|---|---|
| 最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C5 (5回回転対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 21.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN, XMIPP, SPIDER / 使用した粒子像数: 9862 |
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データ登録者
引用
UCSF Chimera






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