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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-15420 | |||||||||
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タイトル | Structure of yeast oligosaccharylransferase complex with lipid-linked oligosaccharide and non-acceptor peptide bound | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | N-glycosylation OST complex / TRANSFERASE | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 : / oligosaccharyltransferase complex / dolichyl-diphosphooligosaccharide-protein glycotransferase / dolichyl-diphosphooligosaccharide-protein glycotransferase activity / protein N-linked glycosylation via asparagine / protein N-linked glycosylation / protein glycosylation / endoplasmic reticulum membrane / structural molecule activity / membrane / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Ramirez AS / de Capitani M / Pesciullesi G / Kowal J / Bloch JS / Irobalieva RN / Aebi M / Reymond JL / Locher KP | |||||||||
資金援助 | スイス, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Molecular basis for glycan recognition and reaction priming of eukaryotic oligosaccharyltransferase. 著者: Ana S Ramírez / Mario de Capitani / Giorgio Pesciullesi / Julia Kowal / Joël S Bloch / Rossitza N Irobalieva / Jean-Louis Reymond / Markus Aebi / Kaspar P Locher / 要旨: Oligosaccharyltransferase (OST) is the central enzyme of N-linked protein glycosylation. It catalyzes the transfer of a pre-assembled glycan, GlcNAcManGlc, from a dolichyl-pyrophosphate donor to ...Oligosaccharyltransferase (OST) is the central enzyme of N-linked protein glycosylation. It catalyzes the transfer of a pre-assembled glycan, GlcNAcManGlc, from a dolichyl-pyrophosphate donor to acceptor sites in secretory proteins in the lumen of the endoplasmic reticulum. Precise recognition of the fully assembled glycan by OST is essential for the subsequent quality control steps of glycoprotein biosynthesis. However, the molecular basis of the OST-donor glycan interaction is unknown. Here we present cryo-EM structures of S. cerevisiae OST in distinct functional states. Our findings reveal that the terminal glucoses (Glc) of a chemo-enzymatically generated donor glycan analog bind to a pocket formed by the non-catalytic subunits WBP1 and OST2. We further find that binding either donor or acceptor substrate leads to distinct primed states of OST, where subsequent binding of the other substrate triggers conformational changes required for catalysis. This alternate priming allows OST to efficiently process closely spaced N-glycosylation sites. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_15420.map.gz | 153.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-15420-v30.xml emd-15420.xml | 26.7 KB 26.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_15420.png | 61.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-15420.cif.gz | 8.4 KB | ||
その他 | emd_15420_half_map_1.map.gz emd_15420_half_map_2.map.gz | 151.5 MB 151.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15420 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-15420 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_15420_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_15420_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_15420_validation.xml.gz | 15.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_15420_validation.cif.gz | 18.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15420 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-15420 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_15420.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.85 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_15420_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_15420_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Yeast OST complex with lipid-linked oligosaccharide and non-accep...
+超分子 #1: Yeast OST complex with lipid-linked oligosaccharide and non-accep...
+分子 #1: Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycotransferase
+分子 #2: OST4 isoform 1
+分子 #3: Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycosyltransferase su...
+分子 #4: Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycosyltransferase su...
+分子 #5: Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycosyltransferase su...
+分子 #6: Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycosyltransferase su...
+分子 #7: Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycosyltransferase su...
+分子 #8: OST3 isoform 1
+分子 #9: PEPTIDE
+分子 #13: phosphono [(3~{R},6~{E},10~{E})-3,7,11,15-tetramethylhexadeca-6,1...
+分子 #14: 1-PALMITOYL-2-LINOLEOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOCHOLINE
+分子 #15: PHOSPHATIDYLETHANOLAMINE
+分子 #16: MANGANESE (II) ION
+分子 #17: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
+分子 #18: 2-[3,6-bis(dimethylamino)xanthen-9-yl]-5-methanoyl-benzoate
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) 平均電子線量: 64.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 75382 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION |