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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-13829 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis RNA polymerase holoenzyme dimer comprising sigma factor SigB | |||||||||
マップデータ | primary map | |||||||||
試料 |
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キーワード | DNA-dependent RNA polymerase / alternative sigma / TRANSCRIPTION | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA polymerase core enzyme binding / Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / peptidoglycan-based cell wall / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat ...RNA polymerase core enzyme binding / Antimicrobial action and antimicrobial resistance in Mtb / sigma factor activity / DNA-directed RNA polymerase complex / peptidoglycan-based cell wall / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein dimerization activity / response to hypoxia / response to xenobiotic stimulus / response to antibiotic / DNA-templated transcription / positive regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.36 Å | |||||||||
データ登録者 | Brodolin K | |||||||||
資金援助 | フランス, 1件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2014 タイトル: Mycobacterium RbpA cooperates with the stress-response σB subunit of RNA polymerase in promoter DNA unwinding. 著者: Yangbo Hu / Zakia Morichaud / Ayyappasamy Sudalaiyadum Perumal / Françoise Roquet-Baneres / Konstantin Brodolin / 要旨: RbpA, a transcriptional activator that is essential for Mycobacterium tuberculosis replication and survival during antibiotic treatment, binds to RNA polymerase (RNAP) in the absence of promoter DNA. ...RbpA, a transcriptional activator that is essential for Mycobacterium tuberculosis replication and survival during antibiotic treatment, binds to RNA polymerase (RNAP) in the absence of promoter DNA. It has been hypothesized that RbpA stimulates housekeeping gene expression by promoting assembly of the σ(A) subunit with core RNAP. Here, using a purified in vitro transcription system of M. tuberculosis, we show that RbpA functions in a promoter-dependent manner as a companion of RNAP essential for promoter DNA unwinding and formation of the catalytically active open promoter complex (RPo). Screening for RbpA activity using a full panel of the M. tuberculosis σ subunits demonstrated that RbpA targets σ(A) and stress-response σ(B), but not the alternative σ subunits from the groups 3 and 4. In contrast to σ(A), the σ(B) subunit activity displayed stringent dependency upon RbpA. These results suggest that RbpA-dependent control of RPo formation provides a mechanism for tuning gene expression during the switch between different physiological states, and in the stress response. #1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2022 タイトル: Structural basis of the mycobacterial stress-response RNA polymerase auto-inhibition via oligomerization 著者: Morichaud Z / Trapani S / Vishwakarma R / Chaloin L / Lionne C / Lai-Kee-Him J / Bron P / Brodolin K | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_13829.map.gz | 327.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-13829-v30.xml emd-13829.xml | 24.8 KB 24.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_13829_fsc.xml | 15.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_13829.png | 118.6 KB | ||
マスクデータ | emd_13829_msk_1.map | 347.6 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-13829.cif.gz | 8.5 KB | ||
その他 | emd_13829_additional_1.map.gz | 154.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13829 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-13829 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_13829_validation.pdf.gz | 573.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_13829_full_validation.pdf.gz | 572.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_13829_validation.xml.gz | 14.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_13829_validation.cif.gz | 19.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-13829 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-13829 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_13829.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 347.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | primary map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_13829_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: raw map
ファイル | emd_13829_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | raw map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : RNA polymerase holoenzyme with sigma factor sigB
全体 | 名称: RNA polymerase holoenzyme with sigma factor sigB |
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要素 |
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-超分子 #1: RNA polymerase holoenzyme with sigma factor sigB
超分子 | 名称: RNA polymerase holoenzyme with sigma factor sigB / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5 詳細: RNA polymerase holoenzyme assembled from individually expressed RNA polymerase core and sigma factor sigB |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) |
分子量 | 理論値: 800 KDa |
-分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / 株: ATCC 25618 / H37Rv |
分子量 | 理論値: 37.745328 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MLISQRPTLS EDVLTDNRSQ FVIEPLEPGF GYTLGNSLRR TLLSSIPGAA VTSIRIDGVL HEFTTVPGVK EDVTEIILNL KSLVVSSEE DEPVTMYLRK QGPGEVTAGD IVPPAGVTVH NPGMHIATLN DKGKLEVELV VERGRGYVPA VQNRASGAEI G RIPVDSIY ...文字列: MLISQRPTLS EDVLTDNRSQ FVIEPLEPGF GYTLGNSLRR TLLSSIPGAA VTSIRIDGVL HEFTTVPGVK EDVTEIILNL KSLVVSSEE DEPVTMYLRK QGPGEVTAGD IVPPAGVTVH NPGMHIATLN DKGKLEVELV VERGRGYVPA VQNRASGAEI G RIPVDSIY SPVLKVTYKV DATRVEQRTD FDKLILDVET KNSISPRDAL ASAGKTLVEL FGLARELNVE AEGIEIGPSP AE ADHIASF ALPIDDLDLT VRSYNCLKRE GVHTVGELVA RTESDLLDIR NFGQKSIDEV KIKLHQLGLS LKDSPPSFDP SEV AGYDVA TGTWSTEGAY DEQDYAETEQ L UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha |
-分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / 株: ATCC 25618 / H37Rv |
分子量 | 理論値: 129.602344 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MVLADSRQSK TAASPSPSRP QSSSNNSVPG APNRVSFAKL REPLEVPGLL DVQTDSFEWL IGSPRWRESA AERGDVNPVG GLEEVLYEL SPIEDFSGSM SLSFSDPRFD DVKAPVDECK DKDMTYAAPL FVTAEFINNN TGEIKSQTVF MGDFPMMTEK G TFIINGTE ...文字列: MVLADSRQSK TAASPSPSRP QSSSNNSVPG APNRVSFAKL REPLEVPGLL DVQTDSFEWL IGSPRWRESA AERGDVNPVG GLEEVLYEL SPIEDFSGSM SLSFSDPRFD DVKAPVDECK DKDMTYAAPL FVTAEFINNN TGEIKSQTVF MGDFPMMTEK G TFIINGTE RVVVSQLVRS PGVYFDETID KSTDKTLHSV KVIPSRGAWL EFDVDKRDTV GVRIDRKRRQ PVTVLLKALG WT SEQIVER FGFSEIMRST LEKDNTVGTD EALLDIYRKL RPGEPPTKES AQTLLENLFF KEKRYDLARV GRYKVNKKLG LHV GEPITS STLTEEDVVA TIEYLVRLHE GQTTMTVPGG VEVPVETDDI DHFGNRRLRT VGELIQNQIR VGMSRMERVV RERM TTQDV EAITPQTLIN IRPVVAAIKE FFGTSQLSQF MDQNNPLSGL THKRRLSALG PGGLSRERAG LEVRDVHPSH YGRMC PIET PEGPNIGLIG SLSVYARVNP FGFIETPYRK VVDGVVSDEI VYLTADEEDR HVVAQANSPI DADGRFVEPR VLVRRK AGE VEYVPSSEVD YMDVSPRQMV SVATAMIPFL EHDDANRALM GANMQRQAVP LVRSEAPLVG TGMELRAAID AGDVVVA EE SGVIEEVSAD YITVMHDNGT RRTYRMRKFA RSNHGTCANQ CPIVDAGDRV EAGQVIADGP CTDDGEMALG KNLLVAIM P WEGHNYEDAI ILSNRLVEED VLTSIHIEEH EIDARDTKLG AEEITRDIPN ISDEVLADLD ERGIVRIGAE VRDGDILVG KVTPKGETEL TPEERLLRAI FGEKAREVRD TSLKVPHGES GKVIGIRVFS REDEDELPAG VNELVRVYVA QKRKISDGDK LAGRHGNKG VIGKILPVED MPFLADGTPV DIILNTHGVP RRMNIGQILE THLGWCAHSG WKVDAAKGVP DWAARLPDEL L EAQPNAIV STPVFDGAQE AELQGLLSCT LPNRDGDVLV DADGKAMLFD GRSGEPFPYP VTVGYMYIMK LHHLVDDKIH AR STGPYSM ITQQPLGGKA QFGGQRFGEM ECWAMQAYGA AYTLQELLTI KSDDTVGRVK VYEAIVKGEN IPEPGIPESF KVL LKELQS LCLNVEVLSS DGAAIELREG EDEDLERAAA NLGINLSRNE SASVEDLA UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta |
-分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / 株: ATCC 25618 / H37Rv |
分子量 | 理論値: 147.438344 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: VNFFDELRIG LATAEDIRQW SYGEVKKPET INYRTLKPEK DGLFCEKIFG PTRDWECYCG KYKRVRFKGI ICERCGVEVT RAKVRRERM GHIELAAPVT HIWYFKGVPS RLGYLLDLAP KDLEKIIYFA AYVITSVDEE MRHNELSTLE AEMAVERKAV E DQRDGELE ...文字列: VNFFDELRIG LATAEDIRQW SYGEVKKPET INYRTLKPEK DGLFCEKIFG PTRDWECYCG KYKRVRFKGI ICERCGVEVT RAKVRRERM GHIELAAPVT HIWYFKGVPS RLGYLLDLAP KDLEKIIYFA AYVITSVDEE MRHNELSTLE AEMAVERKAV E DQRDGELE ARAQKLEADL AELEAEGAKA DARRKVRDGG EREMRQIRDR AQRELDRLED IWSTFTKLAP KQLIVDENLY RE LVDRYGE YFTGAMGAES IQKLIENFDI DAEAESLRDV IRNGKGQKKL RALKRLKVVA AFQQSGNSPM GMVLDAVPVI PPE LRPMVQ LDGGRFATSD LNDLYRRVIN RNNRLKRLID LGAPEIIVNN EKRMLQESVD ALFDNGRRGR PVTGPGNRPL KSLS DLLKG KQGRFRQNLL GKRVDYSGRS VIVVGPQLKL HQCGLPKLMA LELFKPFVMK RLVDLNHAQN IKSAKRMVER QRPQV WDVL EEVIAEHPVL LNRAPTLHRL GIQAFEPMLV EGKAIQLHPL VCEAFNADFD GDQMAVHLPL SAEAQAEARI LMLSSN NIL SPASGRPLAM PRLDMVTGLY YLTTEVPGDT GEYQPASGDH PETGVYSSPA EAIMAADRGV LSVRAKIKVR LTQLRPP VE IEAELFGHSG WQPGDAWMAE TTLGRVMFNE LLPLGYPFVN KQMHKKVQAA IINDLAERYP MIVVAQTVDK LKDAGFYW A TRSGVTVSMA DVLVPPRKKE ILDHYEERAD KVEKQFQRGA LNHDERNEAL VEIWKEATDE VGQALREHYP DDNPIITIV DSGATGNFTQ TRTLAGMKGL VTNPKGEFIP RPVKSSFREG LTVLEYFINT HGARKGLADT ALRTADSGYL TRRLVDVSQD VIVREHDCQ TERGIVVELA ERAPDGTLIR DPYIETSAYA RTLGTDAVDE AGNVIVERGQ DLGDPEIDAL LAAGITQVKV R SVLTCATS TGVCATCYGR SMATGKLVDI GEAVGIVAAQ SIGEPGTQLT MRTFHQGGVG EDITGGLPRV QELFEARVPR GK APIADVT GRVRLEDGER FYKITIVPDD GGEEVVYDKI SKRQRLRVFK HEDGSERVLS DGDHVEVGQQ LMEGSADPHE VLR VQGPRE VQIHLVREVQ EVYRAQGVSI HDKHIEVIVR QMLRRVTIID SGSTEFLPGS LIDRAEFEAE NRRVVAEGGE PAAG RPVLM GITKASLATD SWLSAASFQE TTRVLTDAAI NCRSDKLNGL KENVIIGKLI PAGTGINRYR NIAVQPTEEA RAAAY TIPS YEDQYYSPDF GAATGAAVPL DDYGYSDYRH HHHHH UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' |
-分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit omega / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / 株: ATCC 25618 / H37Rv |
分子量 | 理論値: 11.85114 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MSISQSDASL AAVPAVDQFD PSSGASGGYD TPLGITNPPI DELLDRVSSK YALVIYAAKR ARQINDYYNQ LGEGILEYVG PLVEPGLQE KPLSIALREI HADLLEHTEG E UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit omega |
-分子 #5: RNA polymerase sigma factor SigB
分子 | 名称: RNA polymerase sigma factor SigB / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium tuberculosis H37Rv (結核菌) / 株: ATCC 25618 / H37Rv |
分子量 | 理論値: 38.572773 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MADAPTRATT SRVDSDLDAQ SPAADLVRVY LNGIGKTALL NAAGEVELAK RIEAGLYAEH LLETRKRLG ENRKRDLAAV VRDGEAARRH LLEANLRLVV SLAKRYTGRG MPLLDLIQEG NLGLIRAMEK FDYTKGFKFS T YATWWIRQ ...文字列: MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MADAPTRATT SRVDSDLDAQ SPAADLVRVY LNGIGKTALL NAAGEVELAK RIEAGLYAEH LLETRKRLG ENRKRDLAAV VRDGEAARRH LLEANLRLVV SLAKRYTGRG MPLLDLIQEG NLGLIRAMEK FDYTKGFKFS T YATWWIRQ AITRGMADQS RTIRLPVHLV EQVNKLARIK REMHQHLGRE ATDEELAAES GIPIDKINDL LEHSRDPVSL DM PVGSEEE APLGDFIEDA EAMSAENAVI AELLHTDIRS VLATLDEREH QVIRLRFGLD DGQPRTLDQI GKLFGLSRER VRQ IERDVM SKLRHGERAD RLRSYAS UniProtKB: RNA polymerase sigma factor SigB |
-分子 #6: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 4 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-分子 #7: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 2 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.4 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.9 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 実像数: 3064 / 平均電子線量: 49.6 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 7.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |