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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-12366 | ||||||||||||
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タイトル | Nanodisc reconstituted human ABCB4 in complex with 4B1-Fab and QA2-Fab (phosphatidylcholine-bound, occluded conformation) | ||||||||||||
マップデータ | Nanodisc reconstituted human ABCB4 in complex with 4B1-Fab and QA2-Fab (phosphatidylcholine-bound, occluded conformation) | ||||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 response to fenofibrate / Defective ABCB4 causes PFIC3, ICP3 and GBD1 / positive regulation of phospholipid transport / positive regulation of phospholipid translocation / bile acid secretion / phospholipid transporter activity / cellular response to bile acid / phosphatidylcholine floppase activity / intercellular canaliculus / P-type phospholipid transporter ...response to fenofibrate / Defective ABCB4 causes PFIC3, ICP3 and GBD1 / positive regulation of phospholipid transport / positive regulation of phospholipid translocation / bile acid secretion / phospholipid transporter activity / cellular response to bile acid / phosphatidylcholine floppase activity / intercellular canaliculus / P-type phospholipid transporter / positive regulation of cholesterol transport / phospholipid translocation / clathrin-coated vesicle / lipid homeostasis / ATPase-coupled transmembrane transporter activity / ABC-type transporter activity / ABC-family proteins mediated transport / PPARA activates gene expression / lipid metabolic process / transmembrane transport / membrane raft / apical plasma membrane / focal adhesion / ATP hydrolysis activity / extracellular exosome / nucleoplasm / ATP binding / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Nosol K / Locher KP | ||||||||||||
資金援助 | スイス, 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2021 タイトル: Structures of ABCB4 provide insight into phosphatidylcholine translocation. 著者: Kamil Nosol / Rose Bang-Sørensen / Rossitza N Irobalieva / Satchal K Erramilli / Bruno Stieger / Anthony A Kossiakoff / Kaspar P Locher / 要旨: ABCB4 is expressed in hepatocytes and translocates phosphatidylcholine into bile canaliculi. The mechanism of specific lipid recruitment from the canalicular membrane, which is essential to mitigate ...ABCB4 is expressed in hepatocytes and translocates phosphatidylcholine into bile canaliculi. The mechanism of specific lipid recruitment from the canalicular membrane, which is essential to mitigate the cytotoxicity of bile salts, is poorly understood. We present cryogenic electron microscopy structures of human ABCB4 in three distinct functional conformations. An apo-inward structure reveals how phospholipid can be recruited from the inner leaflet of the membrane without flipping its orientation. An occluded structure reveals a single phospholipid molecule in a central cavity. Its choline moiety is stabilized by cation-π interactions with an essential tryptophan residue, rationalizing the specificity of ABCB4 for phosphatidylcholine. In an inhibitor-bound structure, a posaconazole molecule blocks phospholipids from reaching the central cavity. Using a proteoliposome-based translocation assay with fluorescently labeled phosphatidylcholine analogs, we recapitulated the substrate specificity of ABCB4 in vitro and confirmed the role of the key tryptophan residue. Our results provide a structural basis for understanding an essential translocation step in the generation of bile and its sensitivity to azole drugs. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_12366.map.gz | 310.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-12366-v30.xml emd-12366.xml | 21.4 KB 21.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_12366_fsc.xml | 16 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_12366.png | 117.5 KB | ||
その他 | emd_12366_additional_1.map.gz | 308.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12366 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12366 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_12366_validation.pdf.gz | 305.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_12366_full_validation.pdf.gz | 304.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_12366_validation.xml.gz | 15 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_12366_validation.cif.gz | 20.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12366 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12366 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_12366.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 343 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Nanodisc reconstituted human ABCB4 in complex with 4B1-Fab and QA2-Fab (phosphatidylcholine-bound, occluded conformation) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.66 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: Nanodisc reconstituted human ABCB4 in complex with 4B1-Fab...
ファイル | emd_12366_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Nanodisc reconstituted human ABCB4 in complex with 4B1-Fab and QA2-Fab (phosphatidylcholine-bound, occluded conformation) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Nanodisc reconstituted human ABCB4 in complex with 4B1-Fab and QA...
+超分子 #1: Nanodisc reconstituted human ABCB4 in complex with 4B1-Fab and QA...
+超分子 #2: phosphatidylcholine translocator ABCB4
+超分子 #3: QA2 Fab-fragment: light and heavy chain
+超分子 #4: 4B1 Fab-fragment: light and heavy chain
+分子 #1: QA2 Fab-fragment light chain
+分子 #2: QA2 Fab-fragment light chain
+分子 #3: Isoform 2 of Phosphatidylcholine translocator ABCB4
+分子 #4: 4B1 Fab-fragment light chain
+分子 #5: 4B1 Fab-fragment light chain
+分子 #6: 1,2-DILINOLEOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOCHOLINE
+分子 #7: CHOLESTEROL
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.6 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 80.4 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |