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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1171 | |||||||||
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タイトル | Structural roles for human translation factor eIF3 in initiation of protein synthesis. | |||||||||
![]() | Cryo-EM density of human translation initiation factor eIF3 bound to a conformation of HCV-IRES | |||||||||
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生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 40.0 Å | |||||||||
![]() | Siridechadilok B / Fraser CS / Hall RJ / Doudna JA / Nogales E | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural roles for human translation factor eIF3 in initiation of protein synthesis. 著者: Bunpote Siridechadilok / Christopher S Fraser / Richard J Hall / Jennifer A Doudna / Eva Nogales / ![]() 要旨: Protein synthesis in mammalian cells requires initiation factor eIF3, a approximately 750-kilodalton complex that controls assembly of 40S ribosomal subunits on messenger RNAs (mRNAs) bearing either ...Protein synthesis in mammalian cells requires initiation factor eIF3, a approximately 750-kilodalton complex that controls assembly of 40S ribosomal subunits on messenger RNAs (mRNAs) bearing either a 5'-cap or an internal ribosome entry site (IRES). Cryo-electron microscopy reconstructions show that eIF3, a five-lobed particle, interacts with the hepatitis C virus (HCV) IRES RNA and the 5'-cap binding complex eIF4F via the same domain. Detailed modeling of eIF3 and eIF4F onto the 40S ribosomal subunit reveals that eIF3 uses eIF4F or the HCV IRES in structurally similar ways to position the mRNA strand near the exit site of 40S, promoting initiation complex assembly. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 9.7 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 8.7 KB 8.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 8.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 203.5 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 202.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 5.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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注釈 | Cryo-EM density of human translation initiation factor eIF3 bound to a conformation of HCV-IRES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 5.08 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Human eIF3 bound to HCV-IRES
全体 | 名称: Human eIF3 bound to HCV-IRES |
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要素 |
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-超分子 #1000: Human eIF3 bound to HCV-IRES
超分子 | 名称: Human eIF3 bound to HCV-IRES / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 850 KDa |
-分子 #1: eIF3
分子 | 名称: eIF3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 実験値: 750 KDa |
組換発現 | 生物種: HeLa |
-分子 #2: Hepatitis-C-virus internal ribosomal entry site
分子 | 名称: Hepatitis-C-virus internal ribosomal entry site / タイプ: rna / ID: 2 / Name.synonym: HCV-IRES / 分類: OTHER / Structure: OTHER / Synthetic?: No |
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分子量 | 実験値: 100 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.08 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20mM Tris pH7.5, 100mM KCl, 3mM MgCl2, 1mM DTT,0.1mM CHAPS, 2% Trehalose |
染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: cryo |
グリッド | 詳細: holey-carbon with thin layer of carbon |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 22 K / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: Vitrobot |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM200FEG |
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撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: OTHER / 平均電子線量: 20 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 倍率(補正後): 50000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.2 mm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
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画像解析
CTF補正 | 詳細: Phase flip |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 40.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER, IMAGIC / 詳細: This reconstruction is the refined model. |