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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-11219 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of DNA-PK dimer | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Kinase / DNA-PKcs / NHEJ / DNA-repair / DNA-PK / DNA BINDING PROTEIN / Ku70/80 | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of lymphocyte differentiation / small-subunit processome assembly / Ku70:Ku80 complex / DNA-dependent protein kinase complex / negative regulation of t-circle formation / DNA end binding / DNA-dependent protein kinase-DNA ligase 4 complex / MHC class II antigen presentation / nonhomologous end joining complex / cellular response to X-ray ...positive regulation of lymphocyte differentiation / small-subunit processome assembly / Ku70:Ku80 complex / DNA-dependent protein kinase complex / negative regulation of t-circle formation / DNA end binding / DNA-dependent protein kinase-DNA ligase 4 complex / MHC class II antigen presentation / nonhomologous end joining complex / cellular response to X-ray / regulation of smooth muscle cell proliferation / Cytosolic sensors of pathogen-associated DNA / Neutrophil degranulation / DNA ligation / IRF3-mediated induction of type I IFN / nuclear telomere cap complex / double-strand break repair via classical nonhomologous end joining / positive regulation of catalytic activity / entry into host cell by a symbiont-containing vacuole / U3 snoRNA binding / recombinational repair / regulation of telomere maintenance / protein localization to chromosome, telomeric region / cellular response to fatty acid / positive regulation of neurogenesis / cellular hyperosmotic salinity response / hematopoietic stem cell proliferation / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; アスパラギン酸プロテアーゼ / telomeric DNA binding / 2-LTR circle formation / : / site of DNA damage / protein autoprocessing / 付加脱離酵素(リアーゼ); 炭素-酸素リアーゼ類; その他の炭素-酸素リアーゼ / 5'-deoxyribose-5-phosphate lyase activity / hematopoietic stem cell differentiation / positive regulation of protein kinase activity / ATP-dependent activity, acting on DNA / activation of innate immune response / transport vesicle / enzyme activator activity / positive regulation of telomere maintenance via telomerase / DNA helicase activity / telomere maintenance / cyclin binding / neurogenesis / protein-DNA complex / cellular response to leukemia inhibitory factor / small-subunit processome / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / cellular response to gamma radiation / protein processing / double-strand break repair via nonhomologous end joining / double-strand break repair / double-stranded DNA binding / scaffold protein binding / secretory granule lumen / DNA recombination / transcription regulator complex / ficolin-1-rich granule lumen / damaged DNA binding / chromosome, telomeric region / aspartic-type endopeptidase activity / transcription cis-regulatory region binding / response to xenobiotic stimulus / ribonucleoprotein complex / innate immune response / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA damage response / ubiquitin protein ligase binding / Neutrophil degranulation / protein-containing complex binding / nucleolus / positive regulation of DNA-templated transcription / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / protein-containing complex / proteolysis / DNA binding / RNA binding / extracellular region / nucleoplasm / ATP binding / membrane / nucleus / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.24 Å | |||||||||
データ登録者 | Chaplin AK / Hardwick SW | |||||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2021 タイトル: Dimers of DNA-PK create a stage for DNA double-strand break repair. 著者: Amanda K Chaplin / Steven W Hardwick / Shikang Liang / Antonia Kefala Stavridi / Ales Hnizda / Lee R Cooper / Taiana Maia De Oliveira / Dimitri Y Chirgadze / Tom L Blundell / 要旨: DNA double-strand breaks are the most dangerous type of DNA damage and, if not repaired correctly, can lead to cancer. In humans, Ku70/80 recognizes DNA broken ends and recruits the DNA-dependent ...DNA double-strand breaks are the most dangerous type of DNA damage and, if not repaired correctly, can lead to cancer. In humans, Ku70/80 recognizes DNA broken ends and recruits the DNA-dependent protein kinase catalytic subunit (DNA-PKcs) to form DNA-dependent protein kinase holoenzyme (DNA-PK) in the process of non-homologous end joining (NHEJ). We present a 2.8-Å-resolution cryo-EM structure of DNA-PKcs, allowing precise amino acid sequence registration in regions uninterpreted in previous 4.3-Å X-ray maps. We also report a cryo-EM structure of DNA-PK at 3.5-Å resolution and reveal a dimer mediated by the Ku80 C terminus. Central to dimer formation is a domain swap of the conserved C-terminal helix of Ku80. Our results suggest a new mechanism for NHEJ utilizing a DNA-PK dimer to bring broken DNA ends together. Furthermore, drug inhibition of NHEJ in combination with chemo- and radiotherapy has proved successful, making these models central to structure-based drug targeting efforts. #1: ジャーナル: Nat.Struct.Mol.Biol. / 年: 2020 タイトル: Dimers of DNA-PK create a stage for DNA-double strand break repair 著者: Chaplin AK / Hardwick SW / Liang S / Stavridi AK / Hnizda A / Cooper LR / De Oliveira TM / Chirgadze DY / Blundell TL | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_11219.map.gz | 631.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-11219-v30.xml emd-11219.xml | 29.8 KB 29.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_11219_fsc.xml | 25.9 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_11219.png | 32.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-11219.cif.gz | 9.9 KB | ||
その他 | emd_11219_additional_1.map.gz emd_11219_half_map_1.map.gz emd_11219_half_map_2.map.gz | 64.1 MB 622.3 MB 622.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11219 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11219 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_11219_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_11219_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_11219_validation.xml.gz | 27.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_11219_validation.cif.gz | 36.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11219 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11219 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_11219.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 669.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.05 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: Resolve cryoEM density modified map at 5.72 angstrom resolution
ファイル | emd_11219_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Resolve cryoEM density modified map at 5.72 angstrom resolution | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_11219_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_11219_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : DNA-PK dimer
+超分子 #1: DNA-PK dimer
+超分子 #2: DNA-dependent protein kinase catalytic subunit
+超分子 #3: X-ray repair cross-complementing proteins 5 and 6
+超分子 #4: DNA
+分子 #1: DNA-dependent protein kinase catalytic subunit,DNA-PKcs
+分子 #2: X-ray repair cross-complementing protein 6
+分子 #3: X-ray repair cross-complementing protein 5
+分子 #4: DNA (25-MER)
+分子 #5: DNA (27-MER)
+分子 #6: DNA (26-MER)
+分子 #7: DNA (28-MER)
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 52.97 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |