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- EMDB-10683: 70S ribosome from chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae cells -
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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10683 | |||||||||
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タイトル | 70S ribosome from chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae cells | |||||||||
![]() | in-cell 70S ribosome from Mycoplasma pneumoniae cells after chloramphenicol treatment for 15 minutes | |||||||||
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生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.5 Å | |||||||||
![]() | Mahamid J / Xue L | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: In-cell architecture of an actively transcribing-translating expressome. 著者: Francis J O'Reilly / Liang Xue / Andrea Graziadei / Ludwig Sinn / Swantje Lenz / Dimitry Tegunov / Cedric Blötz / Neil Singh / Wim J H Hagen / Patrick Cramer / Jörg Stülke / Julia Mahamid / Juri Rappsilber / ![]() ![]() 要旨: Structural biology studies performed inside cells can capture molecular machines in action within their native context. In this work, we developed an integrative in-cell structural approach using the ...Structural biology studies performed inside cells can capture molecular machines in action within their native context. In this work, we developed an integrative in-cell structural approach using the genome-reduced human pathogen We combined whole-cell cross-linking mass spectrometry, cellular cryo-electron tomography, and integrative modeling to determine an in-cell architecture of a transcribing and translating expressome at subnanometer resolution. The expressome comprises RNA polymerase (RNAP), the ribosome, and the transcription elongation factors NusG and NusA. We pinpointed NusA at the interface between a NusG-bound elongating RNAP and the ribosome and propose that it can mediate transcription-translation coupling. Translation inhibition dissociated the expressome, whereas transcription inhibition stalled and rearranged it. Thus, the active expressome architecture requires both translation and transcription elongation within the cell. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 3.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 15 KB 15 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 7.1 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 79.1 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 30.5 MB | ![]() | |
その他 | ![]() ![]() | 23.4 MB 23.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
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注釈 | in-cell 70S ribosome from Mycoplasma pneumoniae cells after chloramphenicol treatment for 15 minutes | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.2 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: in-cell 70S ribosome from chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae cells,...
ファイル | emd_10683_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | in-cell 70S ribosome from chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae cells, half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: in-cell 70S ribosome from chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae cells,...
ファイル | emd_10683_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | in-cell 70S ribosome from chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae cells, half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae M129 cells
全体 | 名称: Chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae M129 cells |
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要素 |
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-超分子 #1: Chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae M129 cells
超分子 | 名称: Chloramphenicol-treated Mycoplasma pneumoniae M129 cells タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Wild-type Mycoplasma pneumoniae M129 cells were treated with 0.5 mg/ml chloramphenicol (Cm) for 15 minutes prior to plunge-freezing |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: modified Hayflick medium as described in Halbedel, Hames, and Stulke 2004, with chloramphenicol (Cm) at a final concentration of 0.5 mg/ml |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: GOLD / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 45 % / 装置: HOMEMADE PLUNGER |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 2.9 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 最大 デフォーカス(補正後): 4.5 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 1.5 µm / 倍率(補正後): 81000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |