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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10619 | |||||||||
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タイトル | CryoEM structure of human CMG bound to ATPgammaS and DNA | |||||||||
マップデータ | Human CMG helicase bound to DNA and ATP-gamma-S - final postprocessed map | |||||||||
試料 |
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キーワード | CMG / Helicase / ATPase / Replisome / REPLICATION | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Switching of origins to a post-replicative state / Unwinding of DNA / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication / GINS complex / mitotic DNA replication preinitiation complex assembly / nuclear origin of replication recognition complex / mitotic DNA replication / alpha DNA polymerase:primase complex / CMG complex / DNA replication checkpoint signaling ...Switching of origins to a post-replicative state / Unwinding of DNA / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication / GINS complex / mitotic DNA replication preinitiation complex assembly / nuclear origin of replication recognition complex / mitotic DNA replication / alpha DNA polymerase:primase complex / CMG complex / DNA replication checkpoint signaling / DNA replication preinitiation complex / MCM complex / regulation of phosphorylation / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / DNA strand elongation involved in DNA replication / inner cell mass cell proliferation / cochlea development / DNA unwinding involved in DNA replication / G1/S-Specific Transcription / DNA replication origin binding / DNA replication initiation / Activation of the pre-replicative complex / cellular response to interleukin-4 / Activation of ATR in response to replication stress / DNA helicase activity / ciliary basal body / Assembly of the pre-replicative complex / helicase activity / Orc1 removal from chromatin / cellular response to xenobiotic stimulus / nucleosome assembly / single-stranded DNA binding / histone binding / DNA helicase / DNA replication / cell population proliferation / chromosome, telomeric region / centrosome / DNA damage response / chromatin binding / chromatin / apoptotic process / perinuclear region of cytoplasm / enzyme binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / membrane / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.29 Å | |||||||||
データ登録者 | Rzechorzek NJ / Pellegrini L | |||||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2020 タイトル: CryoEM structures of human CMG-ATPγS-DNA and CMG-AND-1 complexes. 著者: Neil J Rzechorzek / Steven W Hardwick / Vincentius A Jatikusumo / Dimitri Y Chirgadze / Luca Pellegrini / 要旨: DNA unwinding in eukaryotic replication is performed by the Cdc45-MCM-GINS (CMG) helicase. Although the CMG architecture has been elucidated, its mechanism of DNA unwinding and replisome interactions ...DNA unwinding in eukaryotic replication is performed by the Cdc45-MCM-GINS (CMG) helicase. Although the CMG architecture has been elucidated, its mechanism of DNA unwinding and replisome interactions remain poorly understood. Here we report the cryoEM structure at 3.3 Å of human CMG bound to fork DNA and the ATP-analogue ATPγS. Eleven nucleotides of single-stranded (ss) DNA are bound within the C-tier of MCM2-7 AAA+ ATPase domains. All MCM subunits contact DNA, from MCM2 at the 5'-end to MCM5 at the 3'-end of the DNA spiral, but only MCM6, 4, 7 and 3 make a full set of interactions. DNA binding correlates with nucleotide occupancy: five MCM subunits are bound to either ATPγS or ADP, whereas the apo MCM2-5 interface remains open. We further report the cryoEM structure of human CMG bound to the replisome hub AND-1 (CMGA). The AND-1 trimer uses one β-propeller domain of its trimerisation region to dock onto the side of the helicase assembly formed by Cdc45 and GINS. In the resulting CMGA architecture, the AND-1 trimer is closely positioned to the fork DNA while its CIP (Ctf4-interacting peptide)-binding helical domains remain available to recruit partner proteins. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10619.map.gz | 166.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10619-v30.xml emd-10619.xml | 34.8 KB 34.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_10619_fsc.xml | 12.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_10619.png | 216.5 KB | ||
マスクデータ | emd_10619_msk_1.map | 178 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-10619.cif.gz | 10.4 KB | ||
その他 | emd_10619_half_map_1.map.gz emd_10619_half_map_2.map.gz | 140.8 MB 140.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10619 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10619 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10619_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10619_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10619_validation.xml.gz | 19.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_10619_validation.cif.gz | 26.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10619 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10619 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6xtxMC 6xtyC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10471 (タイトル: CryoEM structure of human CMG bound to ATPgammaS and DNA Data size: 7.7 TB Data #1: Unaligned multiframe micrographs of human CMG bound ATPgammaS and DNA [micrographs - multiframe]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10619.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Human CMG helicase bound to DNA and ATP-gamma-S - final postprocessed map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.07 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_10619_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Human CMG helicase bound to DNA and ATP-gamma-S - refined half-map 1
ファイル | emd_10619_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Human CMG helicase bound to DNA and ATP-gamma-S - refined half-map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Human CMG helicase bound to DNA and ATP-gamma-S - refined half-map 2
ファイル | emd_10619_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Human CMG helicase bound to DNA and ATP-gamma-S - refined half-map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Complex of human CMG bound to DNA
+超分子 #1: Complex of human CMG bound to DNA
+超分子 #2: Human CMG helicase
+超分子 #3: DNA
+分子 #1: DNA replication licensing factor MCM2
+分子 #2: DNA replication licensing factor MCM3
+分子 #3: DNA replication licensing factor MCM4
+分子 #4: DNA replication licensing factor MCM5
+分子 #5: DNA replication licensing factor MCM6
+分子 #6: DNA replication licensing factor MCM7
+分子 #7: DNA replication complex GINS protein PSF1
+分子 #8: DNA replication complex GINS protein PSF2
+分子 #9: DNA replication complex GINS protein PSF3
+分子 #10: DNA replication complex GINS protein SLD5
+分子 #11: Cell division control protein 45 homolog
+分子 #12: DNA (5'-D(P*TP*TP*TP*TP*TP*TP*TP*TP*TP*TP*T)-3')
+分子 #13: ZINC ION
+分子 #14: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #15: PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER
+分子 #16: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 57.6 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |