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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10430 | |||||||||
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タイトル | Mouse RNF213 mutant R4753K modeling the Moyamoya-disease-related Human variant R4810K | |||||||||
マップデータ | Composite map assembled from 4 focused refinements | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 lipid ubiquitination / negative regulation of non-canonical Wnt signaling pathway / lipid droplet formation / xenophagy / Antigen processing: Ubiquitination & Proteasome degradation / 転移酵素; アシル基を移すもの; アミノアシル基を移すもの / sprouting angiogenesis / immune system process / protein K63-linked ubiquitination / regulation of lipid metabolic process ...lipid ubiquitination / negative regulation of non-canonical Wnt signaling pathway / lipid droplet formation / xenophagy / Antigen processing: Ubiquitination & Proteasome degradation / 転移酵素; アシル基を移すもの; アミノアシル基を移すもの / sprouting angiogenesis / immune system process / protein K63-linked ubiquitination / regulation of lipid metabolic process / protein autoubiquitination / lipid droplet / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / RING-type E3 ubiquitin transferase / ubiquitin-protein transferase activity / ubiquitin protein ligase activity / ubiquitin-dependent protein catabolic process / angiogenesis / protein ubiquitination / defense response to bacterium / nucleolus / ATP hydrolysis activity / ATP binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mus musculus (ハツカネズミ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Ahel J / Meinhart A / Haselbach D / Clausen T | |||||||||
資金援助 | オーストリア, 1件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Moyamoya disease factor RNF213 is a giant E3 ligase with a dynein-like core and a distinct ubiquitin-transfer mechanism. 著者: Juraj Ahel / Anita Lehner / Antonia Vogel / Alexander Schleiffer / Anton Meinhart / David Haselbach / Tim Clausen / 要旨: RNF213 is the major susceptibility factor for Moyamoya disease, a progressive cerebrovascular disorder that often leads to brain stroke in adults and children. Characterization of disease-associated ...RNF213 is the major susceptibility factor for Moyamoya disease, a progressive cerebrovascular disorder that often leads to brain stroke in adults and children. Characterization of disease-associated mutations has been complicated by the enormous size of RNF213. Here, we present the cryo-EM structure of mouse RNF213. The structure reveals the intricate fold of the 584 kDa protein, comprising an N-terminal stalk, a dynein-like core with six ATPase units, and a multidomain E3 module. Collaboration with UbcH7, a cysteine-reactive E2, points to an unexplored ubiquitin-transfer mechanism that proceeds in a RING-independent manner. Moreover, we show that pathologic MMD mutations cluster in the composite E3 domain, likely interfering with substrate ubiquitination. In conclusion, the structure of RNF213 uncovers a distinct type of an E3 enzyme, highlighting the growing mechanistic diversity in ubiquitination cascades. Our results also provide the molecular framework for investigating the emerging role of RNF213 in lipid metabolism, hypoxia, and angiogenesis. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10430.map.gz | 153.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10430-v30.xml emd-10430.xml | 28.4 KB 28.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_10430.png | 51 KB | ||
その他 | emd_10430_additional_1.map.gz emd_10430_additional_2.map.gz emd_10430_additional_3.map.gz emd_10430_additional_4.map.gz | 151.5 MB 154.6 MB 153.3 MB 151.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10430 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10430 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10430_validation.pdf.gz | 235.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10430_full_validation.pdf.gz | 234.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10430_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10430 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10430 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6tayMC 6taxC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10334 (タイトル: Cryo-EM structure of RNF213 reveals a RING-type E3 with a dynein core and cysteine reactivity Data size: 1.9 TB Data #1: unaligned multi-frame micrographs of moyamoya variant of RNF213 (R4753K) [micrographs - multiframe] Data #2: unaligned multi-frame micrographs of wildtype RNF213 [micrographs - multiframe]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10430.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 166.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Composite map assembled from 4 focused refinements | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.04 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: None
ファイル | emd_10430_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: focused refinement on the second half of the AAA-region
ファイル | emd_10430_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | focused refinement on the second half of the AAA-region | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: None
ファイル | emd_10430_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: focused refinement on the N-terminus
ファイル | emd_10430_additional_4.map | ||||||||||||
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注釈 | focused refinement on the N-terminus | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : full length mouse RNF213 with the R4753K mutation
全体 | 名称: full length mouse RNF213 with the R4753K mutation |
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要素 |
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-超分子 #1: full length mouse RNF213 with the R4753K mutation
超分子 | 名称: full length mouse RNF213 with the R4753K mutation / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 組換株: BTI-Tn-5B1-4 / 組換プラスミド: EMBacY |
分子量 | 実験値: 580 KDa |
-分子 #1: RNF213,E3 ubiquitin-protein ligase RNF213,E3 ubiquitin-protein li...
分子 | 名称: RNF213,E3 ubiquitin-protein ligase RNF213,E3 ubiquitin-protein ligase RNF213 タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: RING-type E3 ubiquitin transferase |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
分子量 | 理論値: 527.650312 KDa |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK) ...文字列: (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK) (UNK)KLTLGLSIL FMVEAAEFTV PKKDLDSLCY LLIPSAGSPE ALHSDLSPVL RIRQRWRIYL TNLCLR CID ERCDRWLGIL PLLHTCMQKS PPKKNSKSQP EDTWAGLEGI SFSEFRDKAP TRSQPLQFMQ SKMALLRVDE YLFRSWL SV VPLESLSSYL ENSIDYLSDV PVRVLDCLQG ISYRLPGLRK ISNQNMKKDV ENVFKMLMHL VDIYQHRIFG ENLLQIYL T ECLTLHETVC NITANHQFFE IPALSAELIC KLLELSPPGH TDEGLPEKSY EDLVTSTLQE ALATTRNWLR SLFKSRMLS ISSAYVRLTY SEEMAVWRRL VEIGFPEKHG WKGSLLGDME GRLKQEPPRL QISFFCSSQC RDGGLHDSVS RSFEKCVIEA VSSACQSQT SVLEGLSCQD 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-分子 #2: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 1 / 式: ATP |
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分子量 | 理論値: 507.181 Da |
Chemical component information | ChemComp-ATP: |
-分子 #3: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 1 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #4: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 2 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.4 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.2 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.01 kPa 詳細: SCD 005 Sputter Coater (BAL-TEC) grid sitting on a metallic mesh during glow discharge | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: LEICA EM GP 詳細: blot for 1.5 seconds using using Whatman Filter Paper Grade 1. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-40 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6561 / 平均露光時間: 10.0 sec. / 平均電子線量: 47.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | PDB-6tay: |