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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0992 | ||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the multiple peptide resistance factor (MprF) loaded with one lysyl-phosphatidylglycerol molecule | ||||||||||||
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![]() | bacteria membrane protein / MEMBRANE PROTEIN | ||||||||||||
機能・相同性 | : / phosphatidylglycerol alanyltransferase activity / Phosphatidylglycerol lysyltransferase, C-terminal / Phosphatidylglycerol lysyltransferase, C-terminal / phospholipid homeostasis / Acyl-CoA N-acyltransferase / plasma membrane / Bifunctional lysylphosphatidylglycerol flippase/synthetase MprF / : ![]() | ||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | ||||||||||||
![]() | Song DF / Jiao HZ | ||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Phospholipid translocation captured in a bifunctional membrane protein MprF. 著者: Danfeng Song / Haizhan Jiao / Zhenfeng Liu / ![]() 要旨: As a large family of membrane proteins crucial for bacterial physiology and virulence, the Multiple Peptide Resistance Factors (MprFs) utilize two separate domains to synthesize and translocate ...As a large family of membrane proteins crucial for bacterial physiology and virulence, the Multiple Peptide Resistance Factors (MprFs) utilize two separate domains to synthesize and translocate aminoacyl phospholipids to the outer leaflets of bacterial membranes. The function of MprFs enables Staphylococcus aureus and other pathogenic bacteria to acquire resistance to daptomycin and cationic antimicrobial peptides. Here we present cryo-electron microscopy structures of MprF homodimer from Rhizobium tropici (RtMprF) at two different states in complex with lysyl-phosphatidylglycerol (LysPG). RtMprF contains a membrane-embedded lipid-flippase domain with two deep cavities opening toward the inner and outer leaflets of the membrane respectively. Intriguingly, a hook-shaped LysPG molecule is trapped inside the inner cavity with its head group bent toward the outer cavity which hosts a second phospholipid-binding site. Moreover, RtMprF exhibits multiple conformational states with the synthase domain adopting distinct positions relative to the flippase domain. Our results provide a detailed framework for understanding the mechanisms of MprF-mediated modification and translocation of phospholipids. | ||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 3.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 15.5 KB 15.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 6.8 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 23.4 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : bacterial membrane protein
全体 | 名称: bacterial membrane protein |
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要素 |
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-超分子 #1: bacterial membrane protein
超分子 | 名称: bacterial membrane protein / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 詳細: A recombinant protein from Rhizobium tropici expressed in Escherichia coli cells |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-分子 #1: Low pH-inducible protein LpiA
分子 | 名称: Low pH-inducible protein LpiA / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 96.094672 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MSSPIDLESA DEELEERGGI VGLLNRYRAL IVAVLTVAVF CIAAYAIYDL TTEVRYDDVV HALTTTKISS VLLALLFTGL SFASLIFYD QNALEYIGKR LPFPHVALTS FSAYAVGNTA GFGALSAGAI RYRAYTRLGL SPDDITRVIA FVTLAFGLGL A SVGAMALL ...文字列: MSSPIDLESA DEELEERGGI VGLLNRYRAL IVAVLTVAVF CIAAYAIYDL TTEVRYDDVV HALTTTKISS VLLALLFTGL SFASLIFYD QNALEYIGKR LPFPHVALTS FSAYAVGNTA GFGALSAGAI RYRAYTRLGL SPDDITRVIA FVTLAFGLGL A SVGAMALL VIADEIGPLI SVDGLWLRLI AIAILAALAF VVYAGRNGRE VRIGPVAVRL PDSRTWSRQF LVTAFDIAAS AS VLYVLLP ETSIGWPGFF AIYAIAVGLG VLSHVPAGFG VFETIIIAWL GSSVNEDAVL SSLVLYRVIY NVIPLVIAIA AIS VAELRR FVDHPVASSM RRIGARLMPQ LLSAFALLLG MMLVFSSVTP TPDHNLIVLS DYLPLSLVES AHFLSSLLGL AIIV AARGL SQRLDGAWWV STFSALFALF FSLLKAIAIV EAGLLAFFVF SLVVSRRLFK RPASLLNQTL TAGWLTAIAV VCIGA IVVL FFVYRDVGYS NELWWQFEFA DEAPRGLRAA LGISIVSSAI AIFSLLRPAT KRPEPVSDDA VARAVEIVRK QGVADA NLV RMGDKSIMFS EKGDAFIMYG KQGRSWIALF DPVGPRQALP DLIWRFVETA RAAGCRSVFY QISPALLSYC ADAGLRA FK LGELAVVNLA NFELKGGKWA NLRQTASRAV RDGLEFAVIE PQDIPDVLDQ LAHVSDTWLA DHNAKEKSFS LGAFDPDY V CSQPVGVLKK DGKIVAFANI LMTETKEEGS VDLMRFSPDA PKGSMDFLFV QILEYLKGEG FQRFNLGMAP LSGMSRRES APVWDRVGGT VFEHGERFYN FKGLRAFKSK FHPEWQPRYL AVSGGVSPMI ALMDATFLIG GGLKGVVRKK LAAALEHHHH HH UniProtKB: UNIPROTKB: L0LM43 |
-分子 #2: [(2~{R})-3-[[(2~{S})-3-[(2~{S})-2,6-bis(azanyl)hexanoyl]oxy-2-oxi...
分子 | 名称: [(2~{R})-3-[[(2~{S})-3-[(2~{S})-2,6-bis(azanyl)hexanoyl]oxy-2-oxidanyl-propoxy]-oxidanyl-phosphoryl]oxy-2-hexadecanoyloxy-propyl] hexadecanoate タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 2 / 式: EV9 |
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分子量 | 理論値: 851.142 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-EV9: |
-分子 #3: 1,2-DIPALMITOYL-PHOSPHATIDYL-GLYCEROLE
分子 | 名称: 1,2-DIPALMITOYL-PHOSPHATIDYL-GLYCEROLE / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 2 / 式: LHG |
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分子量 | 理論値: 722.97 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-LHG: |
-分子 #4: (1S)-2-{[{[(2R)-2,3-DIHYDROXYPROPYL]OXY}(HYDROXY)PHOSPHORYL]OXY}-...
分子 | 名称: (1S)-2-{[{[(2R)-2,3-DIHYDROXYPROPYL]OXY}(HYDROXY)PHOSPHORYL]OXY}-1-[(PALMITOYLOXY)METHYL]ETHYL STEARATE タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 2 / 式: PGT |
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分子量 | 理論値: 751.023 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-PGT: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 6 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / チャンバー内温度: 291 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV | |||||||||
詳細 | The protein is reconstituted in lipid nanodiscs |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-32 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2921 / 平均露光時間: 5.2 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient |
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得られたモデル | ![]() PDB-6lvf: |