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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8xvd | ||||||
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タイトル | CryoEM structure of ADP-DNA-MuB conformation2 | ||||||
要素 | ATP-dependent target DNA activator B | ||||||
キーワード | VIRAL PROTEIN / ADP-MuB complex / D10 symmetry / Ring | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 DNA transposition / viral DNA genome replication / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 / DNA integration / host cell cytoplasm / DNA replication / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Escherichia phage Mu (ファージ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.43 Å | ||||||
データ登録者 | Zhao, X. / Zhang, K. / Li, S. | ||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Elucidating the Architectural dynamics of MuB filaments in bacteriophage Mu DNA transposition. 著者: Xiaolong Zhao / Yongxiang Gao / Qingguo Gong / Kaiming Zhang / Shanshan Li / 要旨: MuB is a non-specific DNA-binding protein and AAA+ ATPase that significantly influences the DNA transposition process of bacteriophage Mu, especially in target DNA selection for transposition. While ...MuB is a non-specific DNA-binding protein and AAA+ ATPase that significantly influences the DNA transposition process of bacteriophage Mu, especially in target DNA selection for transposition. While studies have established the ATP-dependent formation of MuB filament as pivotal to this process, the high-resolution structure of a full-length MuB protomer and the underlying molecular mechanisms governing its oligomerization remain elusive. Here, we use cryo-EM to obtain a 3.4-Å resolution structure of the ATP(+)-DNA(+)-MuB helical filament, which encapsulates the DNA substrate within its axial channel. The structure categorizes MuB within the initiator clade of the AAA+ protein family and precisely locates the ATP and DNA binding sites. Further investigation into the oligomeric states of MuB show the existence of various forms of the filament. These findings lead to a mechanistic model where MuB forms opposite helical filaments along the DNA, exposing potential target sites on the bare DNA and then recruiting MuA, which stimulates MuB's ATPase activity and disrupts the previously formed helical structure. When this happens, MuB generates larger ring structures and dissociates from the DNA. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8xvd.cif.gz | 803 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8xvd.ent.gz | 678.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8xvd.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8xvd_validation.pdf.gz | 2.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8xvd_full_validation.pdf.gz | 2.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8xvd_validation.xml.gz | 136.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8xvd_validation.cif.gz | 160.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xv/8xvd ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xv/8xvd | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 38697MC 8xvbC 8xvcC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 35153.133 Da / 分子数: 20 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia phage Mu (ファージ) / 遺伝子: B, Mup04 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) 参照: UniProt: P03763, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; リン含有酸無水物に作用 #2: 化合物 | ChemComp-ADP / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: ADP-DNA-MuB conformation2 with D10 in Bacteriophage Mu DNA Transposition タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Escherichia phage Mu (ファージ) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 60.9 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 9510 |
-解析
CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
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3次元再構成 | 解像度: 4.43 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 67932 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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