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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8wif | ||||||
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タイトル | Cryo- EM structure of Mycobacterium smegmatis 30S ribosomal subunit (body 2) of 70S ribosome and RafH. | ||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / protein synthesis / Mycobacterium smegmatis / hibernation promotion factor / HPF / RafH / hypoxia stress / Cryo- EM / Single particle reconstruction | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 small ribosomal subunit rRNA binding / regulation of translation / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation ...small ribosomal subunit rRNA binding / regulation of translation / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / mRNA binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | ||||||
データ登録者 | Kumar, N. / Sharma, S. / Kaushal, P.S. | ||||||
資金援助 | インド, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Cryo- EM structure of the mycobacterial 70S ribosome in complex with ribosome hibernation promotion factor RafH. 著者: Niraj Kumar / Shivani Sharma / Prem S Kaushal / 要旨: Ribosome hibernation is a key survival strategy bacteria adopt under environmental stress, where a protein, hibernation promotion factor (HPF), transitorily inactivates the ribosome. Mycobacterium ...Ribosome hibernation is a key survival strategy bacteria adopt under environmental stress, where a protein, hibernation promotion factor (HPF), transitorily inactivates the ribosome. Mycobacterium tuberculosis encounters hypoxia (low oxygen) as a major stress in the host macrophages, and upregulates the expression of RafH protein, which is crucial for its survival. The RafH, a dual domain HPF, an orthologue of bacterial long HPF (HPF), hibernates ribosome in 70S monosome form, whereas in other bacteria, the HPF induces 70S ribosome dimerization and hibernates its ribosome in 100S disome form. Here, we report the cryo- EM structure of M. smegmatis, a close homolog of M. tuberculosis, 70S ribosome in complex with the RafH factor at an overall 2.8 Å resolution. The N- terminus domain (NTD) of RafH binds to the decoding center, similarly to HPF NTD. In contrast, the C- terminus domain (CTD) of RafH, which is larger than the HPF CTD, binds to a distinct site at the platform binding center of the ribosomal small subunit. The two domain-connecting linker regions, which remain mostly disordered in earlier reported HPF structures, interact mainly with the anti-Shine Dalgarno sequence of the 16S rRNA. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8wif.cif.gz | 1.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8wif.ent.gz | 1 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8wif.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8wif_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8wif_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8wif_validation.xml.gz | 93.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8wif_validation.cif.gz | 160.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/wi/8wif ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/wi/8wif | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 37565MC 8whxC 8whyC 8wi7C 8wi8C 8wi9C 8wibC 8wicC 8widC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 1種, 1分子 a
#1: RNA鎖 | 分子量: 495373.656 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2 155 / 参照: GenBank: 118168627 |
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-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 vdefghijklmnopqrstuc
#2: タンパク質・ペプチド | 分子量: 4164.300 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QR10 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 30191.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2 155 / 参照: UniProt: A0QSD7 |
#4: タンパク質 | 分子量: 23415.787 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0A8B4QH64 |
#5: タンパク質 | 分子量: 21946.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSG6 |
#6: タンパク質 | 分子量: 10991.637 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0A8B4QKV6 |
#7: タンパク質 | 分子量: 17660.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QS97 |
#8: タンパク質 | 分子量: 14492.638 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSG3 |
#9: タンパク質 | 分子量: 16794.365 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSP9 |
#10: タンパク質 | 分子量: 11454.313 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSD0 |
#11: タンパク質 | 分子量: 14671.762 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSL6 |
#12: タンパク質 | 分子量: 13896.366 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QS96 |
#13: タンパク質 | 分子量: 14249.619 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSL5 |
#14: タンパク質 | 分子量: 11792.728 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0R550 |
#15: タンパク質 | 分子量: 10368.097 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QVQ3 |
#16: タンパク質 | 分子量: 16795.207 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QV37 |
#17: タンパク質 | 分子量: 11127.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSE0 |
#18: タンパク質 | 分子量: 9524.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0R7F7 |
#19: タンパク質 | 分子量: 10800.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QSD5 |
#20: タンパク質 | 分子量: 9556.104 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0R102 |
#21: タンパク質 | 分子量: 30145.230 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0QVB8 |
-タンパク質 , 2種, 2分子 xw
#22: タンパク質 | 分子量: 8312.485 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 / 参照: UniProt: A0R215 |
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#23: タンパク質 | 分子量: 29898.936 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 遺伝子: MSMEG_3935 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / Variant (発現宿主): C41 / 参照: UniProt: A0QZ86 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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分子量 | 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: mc(2)155 | ||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株: C41(DE3) / プラスミド: pET28a(+) | ||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.4 / 詳細: 20mM HEPES, 100mM NH4Cl, 20mM MgCl2, 3mM DTT, | ||||||||||||||||||||||||
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: 70S ribosome + RafH protein | ||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1800 nm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 2 sec. / 電子線照射量: 1.34 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 3 / 実像数: 12343 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: CTF correction in Relion3.1.4 / タイプ: NONE | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1202461 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 110934 / クラス平均像の数: 3 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / 詳細: phenix.real_space_refinement | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 8WHX Accession code: 8WHX / Source name: PDB / タイプ: experimental model | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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