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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8vym | ||||||
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タイトル | Soluble ectodomain of human cytomegalovirus (HCMV) glycoprotein B (gB) in the postfusion conformation in complex with 1G2 and 7H3 Fabs | ||||||
要素 |
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キーワード | VIRAL PROTEIN/IMMUNE SYSTEM / orthoherpesvirus / betaherpesvirus / cytomegalovirus / human betaherpesvirus 5 / human cytomegalovirus / HCMV / glycoprotein B / gB / HCMV gB / VIRAL PROTEIN / 7H3 / 1G2 / VIRAL PROTEIN-IMMUNE SYSTEM complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 host cell Golgi membrane / host cell endosome membrane / symbiont entry into host cell / viral envelope / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / virion membrane / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス) Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||
データ登録者 | Sponholtz, M.R. / Byrne, P.O. / McLellan, J.S. | ||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2024 タイトル: Structure-based design of a soluble human cytomegalovirus glycoprotein B antigen stabilized in a prefusion-like conformation. 著者: Madeline R Sponholtz / Patrick O Byrne / Alison G Lee / Ajit R Ramamohan / Jory A Goldsmith / Ryan S McCool / Ling Zhou / Nicole V Johnson / Ching-Lin Hsieh / Megan Connors / Krithika P ...著者: Madeline R Sponholtz / Patrick O Byrne / Alison G Lee / Ajit R Ramamohan / Jory A Goldsmith / Ryan S McCool / Ling Zhou / Nicole V Johnson / Ching-Lin Hsieh / Megan Connors / Krithika P Karthigeyan / Chelsea M Crooks / Adelaide S Fuller / John D Campbell / Sallie R Permar / Jennifer A Maynard / Dong Yu / Matthew J Bottomley / Jason S McLellan / 要旨: Human cytomegalovirus (HCMV) glycoprotein B (gB) is a class III membrane fusion protein required for viral entry. HCMV vaccine candidates containing gB have demonstrated moderate clinical efficacy, ...Human cytomegalovirus (HCMV) glycoprotein B (gB) is a class III membrane fusion protein required for viral entry. HCMV vaccine candidates containing gB have demonstrated moderate clinical efficacy, but no HCMV vaccine has been approved. Here, we used structure-based design to identify and characterize amino acid substitutions that stabilize gB in its metastable prefusion conformation. One variant containing two engineered interprotomer disulfide bonds and two cavity-filling substitutions (gB-C7), displayed increased expression and thermostability. A 2.8 Å resolution cryoelectron microscopy structure shows that gB-C7 adopts a prefusion-like conformation, revealing additional structural elements at the membrane-distal apex. Unlike previous observations for several class I viral fusion proteins, mice immunized with postfusion or prefusion-stabilized forms of soluble gB protein displayed similar neutralizing antibody titers, here specifically against an HCMV laboratory strain on fibroblasts. Collectively, these results identify initial strategies to stabilize class III viral fusion proteins and provide tools to probe gB-directed antibody responses. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8vym.cif.gz | 484.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8vym.ent.gz | 385 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8vym.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8vym_validation.pdf.gz | 2.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8vym_full_validation.pdf.gz | 2.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8vym_validation.xml.gz | 83.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8vym_validation.cif.gz | 122.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/vy/8vym ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/vy/8vym | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 43667MC 8vynC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 1種, 3分子 ABC
#1: タンパク質 | 分子量: 88931.438 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Human betaherpesvirus 5 (ヘルペスウイルス) 遺伝子: gB, UL55 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P13201 |
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-抗体 , 4種, 8分子 DGJEFIHK
#2: 抗体 | 分子量: 24206.172 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #3: 抗体 | 分子量: 22853.125 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #4: 抗体 | | 分子量: 22879.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #5: 抗体 | | 分子量: 25152.064 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) |
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-糖 , 3種, 26分子
#6: 多糖 | 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose #7: 多糖 | #8: 糖 | ChemComp-NAG / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Soluble ectodomain of human cytomegalovirus (HCMV) glycoprotein B (gB) in the postfusion conformation in complex with 1G2 and 7H3 Fabs タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#5 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 実験値: NO |
緩衝液 | pH: 8 詳細: 2 mM Tris pH 8.0, 200 mM NaCl, 0.02% (w/v) sodium azide, 3% (v/v) glycerol, 0.25% CHAPS, and 0.1% (w/v) amphipol A8-35 |
試料 | 濃度: 3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Soluble ectodomain of human cytomegalovirus (HCMV) glycoprotein B (gB) in the postfusion conformation, 1G2 Fab, and 7H3 Fab purified separately, mixed, and incubated for 30 minutes on ice ...詳細: Soluble ectodomain of human cytomegalovirus (HCMV) glycoprotein B (gB) in the postfusion conformation, 1G2 Fab, and 7H3 Fab purified separately, mixed, and incubated for 30 minutes on ice prior to grid preparation |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 80 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 8679 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 211132 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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