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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8ste | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Cryo-EM structure of NKCC1 Fu_CTD | ||||||
要素 | Solute carrier family 12 member 2 | ||||||
キーワード | TRANSPORT PROTEIN / cotransporter / dimer / ion / membrane protein | ||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報sodium:potassium:chloride symporter activity / sodium ion homeostasis / ammonium channel activity / chloride ion homeostasis / potassium ion homeostasis / cell volume homeostasis / potassium ion import across plasma membrane / apical plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.34 Å | ||||||
データ登録者 | Moseng, M.A. | ||||||
| 資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022タイトル: Inhibition mechanism of NKCC1 involves the carboxyl terminus and long-range conformational coupling. 著者: Mitchell A Moseng / Chih-Chia Su / Kerri Rios / Meng Cui / Meinan Lyu / Przemyslaw Glaza / Philip A Klenotic / Eric Delpire / Edward W Yu / ![]() 要旨: The Na-K-2Cl cotransporter-1 (NKCC1) is an electroneutral Na-dependent transporter responsible for simultaneously translocating Na, K, and Cl ions into cells. In human tissue, NKCC1 plays a critical ...The Na-K-2Cl cotransporter-1 (NKCC1) is an electroneutral Na-dependent transporter responsible for simultaneously translocating Na, K, and Cl ions into cells. In human tissue, NKCC1 plays a critical role in regulating cytoplasmic volume, fluid intake, chloride homeostasis, and cell polarity. Here, we report four structures of human NKCC1 (hNKCC1), both in the absence and presence of loop diuretic (bumetanide or furosemide), using single-particle cryo-electron microscopy. These structures allow us to directly observe various novel conformations of the hNKCC1 dimer. They also reveal two drug-binding sites located at the transmembrane and cytosolic carboxyl-terminal domains, respectively. Together, our findings enable us to delineate an inhibition mechanism that involves a coupled movement between the cytosolic and transmembrane domains of hNKCC1. | ||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8ste.cif.gz | 137.5 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8ste.ent.gz | 107.7 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8ste.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/st/8ste ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/st/8ste | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 40759MC ![]() 7mxoC ![]() 7n3nC ![]() 7sflC ![]() 7smpC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 45190.438 Da / 分子数: 2 / 断片: NKCC1 Fu_CTD / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SLC12A2 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: A0A8C9GPS0#2: 化合物 | 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: NKCC1_Fu_CTD / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 緩衝液 | pH: 7.5 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
|---|---|
| 3次元再構成 | 解像度: 3.34 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 304440 / 対称性のタイプ: POINT |
ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)
米国, 1件
引用








PDBj


FIELD EMISSION GUN