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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8qpa | ||||||
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タイトル | Cryo-EM Structure of Pre-B+5'ssLNG Complex (core part) | ||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / spliceosome | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / R-loop processing / U4atac snRNA binding / box C/D sno(s)RNA binding / dense fibrillar component ...spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / R-loop processing / U4atac snRNA binding / box C/D sno(s)RNA binding / dense fibrillar component / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / box C/D methylation guide snoRNP complex / U4/U6 snRNP / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / snRNP binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / RNA splicing, via transesterification reactions / U4 snRNA binding / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type spliceosomal complex / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / box C/D snoRNP assembly / U4 snRNP / U2 snRNP / U3 snoRNA binding / rRNA modification in the nucleus and cytosol / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / mRNA Splicing - Minor Pathway / spliceosomal complex assembly / mRNA 3'-splice site recognition / MLL1 complex / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / protein deubiquitination / single fertilization / U5 snRNA binding / U5 snRNP / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / ribonucleoprotein complex binding / spliceosomal snRNP assembly / Cajal body / RNA processing / pre-mRNA intronic binding / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / maturation of SSU-rRNA / response to cocaine / small-subunit processome / helicase activity / spliceosomal complex / mRNA splicing, via spliceosome / mRNA processing / osteoblast differentiation / ribosomal small subunit biogenesis / cellular response to xenobiotic stimulus / cellular response to tumor necrosis factor / ATPase binding / protein-macromolecule adaptor activity / cellular response to lipopolysaccharide / ubiquitinyl hydrolase 1 / RNA helicase activity / hydrolase activity / RNA helicase / nuclear speck / cell division / intracellular membrane-bounded organelle / GTPase activity / mRNA binding / chromatin / nucleolus / GTP binding / Golgi apparatus / positive regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / protein-containing complex / RNA binding / extracellular exosome / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / membrane / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | ||||||
データ登録者 | Zhang, Z. / Kumar, V. / Dybkov, O. / Will, C.L. / Zhong, J. / Ludwig, S. / Urlaub, H. / Kastner, B. / Stark, H. / Luehrmann, R. | ||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2024 タイトル: Structural insights into the cross-exon to cross-intron spliceosome switch. 著者: Zhenwei Zhang / Vinay Kumar / Olexandr Dybkov / Cindy L Will / Jiayun Zhong / Sebastian E J Ludwig / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Holger Stark / Reinhard Lührmann / 要旨: Early spliceosome assembly can occur through an intron-defined pathway, whereby U1 and U2 small nuclear ribonucleoprotein particles (snRNPs) assemble across the intron. Alternatively, it can occur ...Early spliceosome assembly can occur through an intron-defined pathway, whereby U1 and U2 small nuclear ribonucleoprotein particles (snRNPs) assemble across the intron. Alternatively, it can occur through an exon-defined pathway, whereby U2 binds the branch site located upstream of the defined exon and U1 snRNP interacts with the 5' splice site located directly downstream of it. The U4/U6.U5 tri-snRNP subsequently binds to produce a cross-intron (CI) or cross-exon (CE) pre-B complex, which is then converted to the spliceosomal B complex. Exon definition promotes the splicing of upstream introns and plays a key part in alternative splicing regulation. However, the three-dimensional structure of exon-defined spliceosomal complexes and the molecular mechanism of the conversion from a CE-organized to a CI-organized spliceosome, a pre-requisite for splicing catalysis, remain poorly understood. Here cryo-electron microscopy analyses of human CE pre-B complex and B-like complexes reveal extensive structural similarities with their CI counterparts. The results indicate that the CE and CI spliceosome assembly pathways converge already at the pre-B stage. Add-back experiments using purified CE pre-B complexes, coupled with cryo-electron microscopy, elucidate the order of the extensive remodelling events that accompany the formation of B complexes and B-like complexes. The molecular triggers and roles of B-specific proteins in these rearrangements are also identified. We show that CE pre-B complexes can productively bind in trans to a U1 snRNP-bound 5' splice site. Together, our studies provide new mechanistic insights into the CE to CI switch during spliceosome assembly and its effect on pre-mRNA splice site pairing at this stage. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8qpa.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8qpa.ent.gz | 809.9 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8qpa.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8qpa_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8qpa_full_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8qpa_validation.xml.gz | 144.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8qpa_validation.cif.gz | 219.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qp/8qpa ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/qp/8qpa | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 18546MC 8qozC 8qp8C 8qp9C 8qpbC 8qpeC 8qpkC 8qxdC 8qzsC 8r08C 8r09C 8r0aC 8r0bC 8rm5C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 10種, 10分子 BGNAUSCMD7
#1: タンパク質 | 分子量: 244823.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75643, RNA helicase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 95785.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BUQ8 |
#6: タンパク質 | 分子量: 107092.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O94906 |
#7: タンパク質 | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9 |
#8: タンパク質 | 分子量: 65481.426 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q53GS9 |
#9: タンパク質 | 分子量: 90414.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43290 |
#10: タンパク質 | 分子量: 109560.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029 |
#11: タンパク質 | 分子量: 14191.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55769 |
#12: タンパク質 | 分子量: 16807.346 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P83876 |
#15: タンパク質 | 分子量: 88991.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15459 |
-U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein ... , 3種, 3分子 JLF
#3: タンパク質 | 分子量: 77669.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43395 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 55528.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8WWY3 |
#5: タンパク質 | 分子量: 58536.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43172 |
-RNA鎖 , 4種, 4分子 5z46
#13: RNA鎖 | 分子量: 37254.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 20330981 |
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#14: RNA鎖 | 分子量: 5757.475 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
#16: RNA鎖 | 分子量: 46181.289 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 340142 |
#17: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: NR_004394.1 |
-非ポリマー , 1種, 1分子
#18: 化合物 | ChemComp-IHP / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: human spliceosomal pre-B+5'ssLNG+ATPyS complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#17 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 5000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
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3次元再構成 | 解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 136333 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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