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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8opl | |||||||||
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タイトル | Virus-like Particle based on PVY coat protein with T43C and D136C mutation with helical architecture encapsidating ssRNA | |||||||||
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![]() | VIRUS LIKE PARTICLE / helical / VLP / ssRNA / Potyvirus / PVY | |||||||||
機能・相同性 | Potyvirus coat protein / Potyvirus coat protein / viral capsid / RNA / Genome polyprotein![]() | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.41 Å | |||||||||
![]() | Kavcic, L. / Kezar, A. / Podobnik, M. | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: From structural polymorphism to structural metamorphosis of the coat protein of flexuous filamentous potato virus Y. 著者: Luka Kavčič / Andreja Kežar / Neža Koritnik / Magda Tušek Žnidarič / Tajda Klobučar / Žiga Vičič / Franci Merzel / Ellie Holden / Justin L P Benesch / Marjetka Podobnik / ![]() ![]() 要旨: The structural diversity and tunability of the capsid proteins (CPs) of various icosahedral and rod-shaped viruses have been well studied and exploited in the development of smart hybrid ...The structural diversity and tunability of the capsid proteins (CPs) of various icosahedral and rod-shaped viruses have been well studied and exploited in the development of smart hybrid nanoparticles. However, the potential of CPs of the wide-spread flexuous filamentous plant viruses remains to be explored. Here, we show that we can control the shape, size, RNA encapsidation ability, symmetry, stability and surface functionalization of nanoparticles through structure-based design of CP from potato virus Y (PVY). We provide high-resolution insight into CP-based self-assemblies, ranging from large polymorphic or monomorphic filaments to smaller annular, cubic or spherical particles. Furthermore, we show that we can prevent CP self-assembly in bacteria by fusion with a cleavable protein, enabling controlled nanoparticle formation in vitro. Understanding the remarkable structural diversity of PVY CP not only provides possibilities for the production of biodegradable nanoparticles, but may also advance future studies of CP's polymorphism in a biological context. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 146.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 202.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 17072MC ![]() 8opaC ![]() 8opbC ![]() 8opcC ![]() 8opdC ![]() 8opeC ![]() 8opfC ![]() 8opgC ![]() 8ophC ![]() 8opjC ![]() 8opkC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 29925.891 Da / 分子数: 27 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() プラスミド: pT7-7 / 発現宿主: ![]() ![]() #2: RNA鎖 | 分子量: 1485.872 Da / 分子数: 27 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() プラスミド: pT7-7 / 発現宿主: ![]() ![]() |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Virus-like particles from PVY coat protein with T43C and D136C mutations タイプ: COMPLEX 詳細: Monomorphic filaments with helical architecture and encapsidated RNA Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 1.8 mM KH2PO4, 10.1 mM Na2HPO4, 140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, pH 7.4 |
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
顕微鏡 | モデル: TFS GLACIOS |
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電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 150000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2100 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN |
撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 実像数: 461 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: CTFFIND-4.1 / タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||
らせん対称 | 回転角度/サブユニット: -40.997 ° / 軸方向距離/サブユニット: 4.005 Å / らせん対称軸の対称性: C1 | ||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 195881 / 詳細: CrYOLO picking based on pre-trained neural network | ||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.41 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 141112 詳細: Final reconstruction was performed in CryoSPARC after Bayesian polishing of particles in RELION. 対称性のタイプ: HELICAL |