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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8jh2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | RNA polymerase II elongation complex bound with Elf1, Spt4/5 and foreign DNA, stalled at SHL(-1) of the nucleosome | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | Transcription/DNA/RNA / Transcription-DNA-RNA complex / RNAPII / Cryo-EM | |||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() regulation of septum digestion after cytokinesis / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / DSIF complex / negative regulation of chromosome condensation / Barr body / regulation of centromere complex assembly / muscle cell differentiation / transcription elongation factor activity / pericentric heterochromatin formation / RPB4-RPB7 complex ...regulation of septum digestion after cytokinesis / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / DSIF complex / negative regulation of chromosome condensation / Barr body / regulation of centromere complex assembly / muscle cell differentiation / transcription elongation factor activity / pericentric heterochromatin formation / RPB4-RPB7 complex / inner kinetochore / positive regulation of DNA-templated transcription, elongation / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, deadenylation-dependent decay / oocyte maturation / termination of RNA polymerase II transcription / termination of RNA polymerase III transcription / nucleus organization / : / : / termination of RNA polymerase I transcription / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / RNA polymerase II complex binding / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / chromosome, centromeric region / spermatid development / negative regulation of tumor necrosis factor-mediated signaling pathway / subtelomeric heterochromatin formation / single fertilization / transcription elongation by RNA polymerase I / negative regulation of megakaryocyte differentiation / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / positive regulation of translational initiation / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / protein localization to CENP-A containing chromatin / transcription-coupled nucleotide-excision repair / RNA polymerase III activity / RNA polymerase II, core complex / pericentric heterochromatin / tRNA transcription by RNA polymerase III / Replacement of protamines by nucleosomes in the male pronucleus / CENP-A containing nucleosome / RNA polymerase I activity / heterochromatin organization / Packaging Of Telomere Ends / RNA polymerase II activity / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected purine / Cleavage of the damaged purine / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / nucleosomal DNA binding / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected pyrimidine / Cleavage of the damaged pyrimidine / translation initiation factor binding / Inhibition of DNA recombination at telomere / Meiotic synapsis / telomere organization / RNA Polymerase I Promoter Opening / embryo implantation / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / SUMOylation of chromatin organization proteins / DNA methylation / Condensation of Prophase Chromosomes / ERCC6 (CSB) and EHMT2 (G9a) positively regulate rRNA expression / SIRT1 negatively regulates rRNA expression / Chromatin modifications during the maternal to zygotic transition (MZT) / HCMV Late Events / transcription elongation factor complex / PRC2 methylates histones and DNA / innate immune response in mucosa / regulation of DNA-templated transcription elongation / Defective pyroptosis / HDACs deacetylate histones / transcription elongation by RNA polymerase II / RNA Polymerase I Promoter Escape / lipopolysaccharide binding / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / Transcriptional regulation by small RNAs / Formation of the beta-catenin:TCF transactivating complex / P-body / RUNX1 regulates genes involved in megakaryocyte differentiation and platelet function / NoRC negatively regulates rRNA expression / Activated PKN1 stimulates transcription of AR (androgen receptor) regulated genes KLK2 and KLK3 / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / G2/M DNA damage checkpoint / HDMs demethylate histones / multicellular organism growth / DNA Damage/Telomere Stress Induced Senescence / Metalloprotease DUBs / ribonucleoside binding / PKMTs methylate histone lysines / Meiotic recombination / RMTs methylate histone arginines / Pre-NOTCH Transcription and Translation / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / Activation of anterior HOX genes in hindbrain development during early embryogenesis / HCMV Early Events 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | synthetic construct (人工物)![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.7 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Akatsu, M. / Fujita, R. / Ogasawara, M. / Ehara, H. / Kujirai, T. / Takizawa, Y. / Sekine, S. / Kurumizaka, H. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structures of RNA polymerase II-nucleosome complexes rewrapping transcribed DNA. 著者: Munetaka Akatsu / Haruhiko Ehara / Tomoya Kujirai / Risa Fujita / Tomoko Ito / Ken Osumi / Mitsuo Ogasawara / Yoshimasa Takizawa / Shun-Ichi Sekine / Hitoshi Kurumizaka / ![]() 要旨: RNA polymerase II (RNAPII) transcribes DNA wrapped in the nucleosome by stepwise pausing, especially at nucleosomal superhelical locations -5 and -1 [SHL(-5) and SHL(-1), respectively]. In the ...RNA polymerase II (RNAPII) transcribes DNA wrapped in the nucleosome by stepwise pausing, especially at nucleosomal superhelical locations -5 and -1 [SHL(-5) and SHL(-1), respectively]. In the present study, we performed cryo-electron microscopy analyses of RNAPII-nucleosome complexes paused at a major nucleosomal pausing site, SHL(-1). We determined two previously undetected structures, in which the transcribed DNA behind RNAPII is sharply kinked at the RNAPII exit tunnel and rewrapped around the nucleosomal histones in front of RNAPII by DNA looping. This DNA kink shifts the DNA orientation toward the nucleosome, and the transcribed DNA region interacts with basic amino acid residues of histones H2A, H2B, and H3 exposed by the RNAPII-mediated nucleosomal DNA peeling. The DNA loop structure was not observed in the presence of the transcription elongation factors Spt4/5 and Elf1. These RNAPII-nucleosome structures provide important information for understanding the functional relevance of DNA looping during transcription elongation in the nucleosome. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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その他 | ![]() |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 36251MC ![]() 8jh3C ![]() 8jh4C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-DNA鎖 , 4種, 4分子 01NT
#1: DNA鎖 | 分子量: 12306.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() ![]() |
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#2: DNA鎖 | 分子量: 12316.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() ![]() |
#16: DNA鎖 | 分子量: 70594.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() ![]() |
#18: DNA鎖 | 分子量: 70193.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() ![]() |
-DNA-directed RNA polymerase ... , 3種, 3分子 ABI
#3: タンパク質 | 分子量: 194107.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#4: タンパク質 | 分子量: 139746.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#11: タンパク質 | 分子量: 13612.320 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-RNA polymerase II ... , 4種, 4分子 CDGK
#5: タンパク質 | 分子量: 34216.293 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#6: タンパク質 | 分子量: 20622.980 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#9: タンパク質 | 分子量: 18802.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#13: タンパク質 | 分子量: 13832.896 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-RNA polymerase subunit ... , 4種, 4分子 EFJL
#7: タンパク質 | 分子量: 24962.680 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#8: タンパク質 | 分子量: 17803.588 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#12: タンパク質 | 分子量: 8554.064 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#14: タンパク質 | 分子量: 7862.048 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-タンパク質 , 5種, 9分子 Haebfcgdh
#10: タンパク質 | 分子量: 16249.220 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||||||
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#21: タンパク質 | 分子量: 15360.983 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: H3-3A, H3.3A, H3F3, H3F3A, PP781, H3-3B, H3.3B, H3F3B 発現宿主: ![]() ![]() #22: タンパク質 | 分子量: 11394.426 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() #23: タンパク質 | 分子量: 14165.551 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() #24: タンパク質 | 分子量: 13935.239 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
-Transcription elongation factor ... , 3種, 3分子 MVW
#15: タンパク質 | 分子量: 12395.677 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#19: タンパク質 | 分子量: 12627.260 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
#20: タンパク質 | 分子量: 101248.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#17: RNA鎖 | 分子量: 5124.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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-非ポリマー , 2種, 11分子 ![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
#25: 化合物 | ChemComp-ZN / #26: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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分子量 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20 mM HEPES-KOH(pH7.5), 50 mM Potassium acetate, 200 nM Zinc acetate, 0.1 mM TCEP-HCl | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.09144 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: dsDNA concentration is 0.09144 mg/mL. This sample contains 0.005% Tween20. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 59.84 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成 | 解像度: 5.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 74079 / 対称性のタイプ: POINT |