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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8jh2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | RNA polymerase II elongation complex bound with Elf1, Spt4/5 and foreign DNA, stalled at SHL(-1) of the nucleosome | |||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | Transcription/DNA/RNA / Transcription-DNA-RNA complex / RNAPII / Cryo-EM | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / regulation of septum digestion after cytokinesis / co-transcriptional lncRNA 3' end processing, cleavage and polyadenylation pathway / regulation of transcription-coupled nucleotide-excision repair / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / Barr body / RNA polymerase I core binding / DSIF complex / regulation of rRNA processing ...negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase I / regulation of septum digestion after cytokinesis / co-transcriptional lncRNA 3' end processing, cleavage and polyadenylation pathway / regulation of transcription-coupled nucleotide-excision repair / siRNA-mediated pericentric heterochromatin formation / Barr body / RNA polymerase I core binding / DSIF complex / regulation of rRNA processing / RNA polymerase I general transcription initiation factor binding / intracellular mRNA localization / negative regulation of chromosome condensation / rDNA heterochromatin / RPB4-RPB7 complex / pericentric heterochromatin formation / inner kinetochore / muscle cell differentiation / intracellular phosphate ion homeostasis / snRNP binding / transcription elongation-coupled chromatin remodeling / chromatin-protein adaptor activity / U4 snRNA binding / transcription elongation factor activity / oocyte maturation / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, deadenylation-dependent decay / nucleosomal DNA binding / termination of RNA polymerase II transcription / termination of RNA polymerase III transcription / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / nucleus organization / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / termination of RNA polymerase I transcription / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / spliceosomal complex assembly / RNA polymerase II complex binding / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / positive regulation of translational initiation / chromosome, centromeric region / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / U5 snRNA binding / spermatid development / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / single fertilization / negative regulation of tumor necrosis factor-mediated signaling pathway / subtelomeric heterochromatin formation / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / pericentric heterochromatin / transcription elongation by RNA polymerase I / U1 snRNA binding / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III / transcription by RNA polymerase I / negative regulation of megakaryocyte differentiation / translesion synthesis / protein localization to CENP-A containing chromatin / Replacement of protamines by nucleosomes in the male pronucleus / CENP-A containing nucleosome / transcription-coupled nucleotide-excision repair / translation initiation factor binding / Packaging Of Telomere Ends / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected purine / Cleavage of the damaged purine / embryo implantation / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / positive regulation of autophagy / telomere organization / Recognition and association of DNA glycosylase with site containing an affected pyrimidine / Cleavage of the damaged pyrimidine / RNA Polymerase I Promoter Opening / transcription initiation-coupled chromatin remodeling / Inhibition of DNA recombination at telomere / Assembly of the ORC complex at the origin of replication / Meiotic synapsis / SUMOylation of chromatin organization proteins / Regulation of endogenous retroelements by the Human Silencing Hub (HUSH) complex / transcription elongation factor complex / DNA methylation / Condensation of Prophase Chromosomes / Chromatin modifications during the maternal to zygotic transition (MZT) / SIRT1 negatively regulates rRNA expression / HCMV Late Events / ERCC6 (CSB) and EHMT2 (G9a) positively regulate rRNA expression / PRC2 methylates histones and DNA / innate immune response in mucosa / Regulation of endogenous retroelements by KRAB-ZFP proteins / Defective pyroptosis / HDACs deacetylate histones / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / P-body / Regulation of endogenous retroelements by Piwi-interacting RNAs (piRNAs) / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / transcription elongation by RNA polymerase II / RNA Polymerase I Promoter Escape / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / lipopolysaccharide binding / Transcriptional regulation by small RNAs 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | synthetic construct (人工物) Komagataella phaffii (菌類) Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.7 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Akatsu, M. / Fujita, R. / Ogasawara, M. / Ehara, H. / Kujirai, T. / Takizawa, Y. / Sekine, S. / Kurumizaka, H. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 日本, 10件
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引用 | ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2023タイトル: Cryo-EM structures of RNA polymerase II-nucleosome complexes rewrapping transcribed DNA. 著者: Munetaka Akatsu / Haruhiko Ehara / Tomoya Kujirai / Risa Fujita / Tomoko Ito / Ken Osumi / Mitsuo Ogasawara / Yoshimasa Takizawa / Shun-Ichi Sekine / Hitoshi Kurumizaka / ![]() 要旨: RNA polymerase II (RNAPII) transcribes DNA wrapped in the nucleosome by stepwise pausing, especially at nucleosomal superhelical locations -5 and -1 [SHL(-5) and SHL(-1), respectively]. In the ...RNA polymerase II (RNAPII) transcribes DNA wrapped in the nucleosome by stepwise pausing, especially at nucleosomal superhelical locations -5 and -1 [SHL(-5) and SHL(-1), respectively]. In the present study, we performed cryo-electron microscopy analyses of RNAPII-nucleosome complexes paused at a major nucleosomal pausing site, SHL(-1). We determined two previously undetected structures, in which the transcribed DNA behind RNAPII is sharply kinked at the RNAPII exit tunnel and rewrapped around the nucleosomal histones in front of RNAPII by DNA looping. This DNA kink shifts the DNA orientation toward the nucleosome, and the transcribed DNA region interacts with basic amino acid residues of histones H2A, H2B, and H3 exposed by the RNAPII-mediated nucleosomal DNA peeling. The DNA loop structure was not observed in the presence of the transcription elongation factors Spt4/5 and Elf1. These RNAPII-nucleosome structures provide important information for understanding the functional relevance of DNA looping during transcription elongation in the nucleosome. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8jh2.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8jh2.ent.gz | 883.7 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8jh2.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jh/8jh2 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jh/8jh2 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 36251MC ![]() 8jh3C ![]() 8jh4C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-DNA鎖 , 4種, 4分子 01NT
| #1: DNA鎖 | 分子量: 12306.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() |
|---|---|
| #2: DNA鎖 | 分子量: 12316.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() |
| #16: DNA鎖 | 分子量: 70594.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() |
| #18: DNA鎖 | 分子量: 70193.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: ![]() |
-DNA-directed RNA polymerase ... , 3種, 3分子 ABI
| #3: タンパク質 | 分子量: 194107.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R4Y0, DNA-directed RNA polymerase |
|---|---|
| #4: タンパク質 | 分子量: 139746.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4QZQ7, DNA-directed RNA polymerase |
| #11: タンパク質 | 分子量: 13612.320 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: F2QPE6 |
-RNA polymerase II ... , 4種, 4分子 CDGK
| #5: タンパク質 | 分子量: 34216.293 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R7L2 |
|---|---|
| #6: タンパク質 | 分子量: 20622.980 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R2U9 |
| #9: タンパク質 | 分子量: 18802.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R9A1 |
| #13: タンパク質 | 分子量: 13832.896 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R3Z5 |
-RNA polymerase subunit ... , 4種, 4分子 EFJL
| #7: タンパク質 | 分子量: 24962.680 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R3P8 |
|---|---|
| #8: タンパク質 | 分子量: 17803.588 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R1V1 |
| #12: タンパク質 | 分子量: 8554.064 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R009 |
| #14: タンパク質 | 分子量: 7862.048 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: F2QMI1 |
-タンパク質 , 5種, 9分子 Haebfcgdh
| #10: タンパク質 | 分子量: 16249.220 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4R273 | ||||||
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| #21: タンパク質 | 分子量: 15360.983 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト)遺伝子: H3-3A, H3.3A, H3F3, H3F3A, PP781, H3-3B, H3.3B, H3F3B 発現宿主: ![]() #22: タンパク質 | 分子量: 11394.426 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: ![]() #23: タンパク質 | 分子量: 14165.551 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: ![]() #24: タンパク質 | 分子量: 13935.239 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: HIST1H2BJ, H2BFR / 発現宿主: ![]() |
-Transcription elongation factor ... , 3種, 3分子 MVW
| #15: タンパク質 | 分子量: 12395.677 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Komagataella phaffii (菌類) / 参照: UniProt: C4QZ45 |
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| #19: タンパク質 | 分子量: 12627.260 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Komagataella phaffii (菌類) / 遺伝子: SPT4 / 発現宿主: ![]() |
| #20: タンパク質 | 分子量: 101248.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Komagataella phaffii (菌類) / 遺伝子: PAS_chr3_1136 / 発現宿主: ![]() |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
| #17: RNA鎖 | 分子量: 5124.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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-非ポリマー , 2種, 11分子 


| #25: 化合物 | ChemComp-ZN / #26: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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| 分子量 |
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| 由来(天然) |
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| 由来(組換発現) |
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| 緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20 mM HEPES-KOH(pH7.5), 50 mM Potassium acetate, 200 nM Zinc acetate, 0.1 mM TCEP-HCl | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 濃度: 0.09144 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: dsDNA concentration is 0.09144 mg/mL. This sample contains 0.005% Tween20. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 59.84 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
|---|---|
| 3次元再構成 | 解像度: 5.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 74079 / 対称性のタイプ: POINT |
ムービー
コントローラー
万見について




Komagataella phaffii (菌類)
Homo sapiens (ヒト)
日本, 10件
引用





PDBj





































































FIELD EMISSION GUN