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- PDB-8gts: CryoEM structure of human Pannexin1 with R217H congenital mutation. -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8gts
タイトルCryoEM structure of human Pannexin1 with R217H congenital mutation.
要素Pannexin-1
キーワードMEMBRANE PROTEIN / Pannexin1 / ATP release / large-pore ion channel
機能・相同性
機能・相同性情報


ATP transmembrane transporter activity / ATP transport / leak channel activity / Electric Transmission Across Gap Junctions / positive regulation of interleukin-1 alpha production / wide pore channel activity / bleb / monoatomic anion transmembrane transport / gap junction / monoatomic anion channel activity ...ATP transmembrane transporter activity / ATP transport / leak channel activity / Electric Transmission Across Gap Junctions / positive regulation of interleukin-1 alpha production / wide pore channel activity / bleb / monoatomic anion transmembrane transport / gap junction / monoatomic anion channel activity / gap junction channel activity / positive regulation of macrophage cytokine production / Mechanical load activates signaling by PIEZO1 and integrins in osteocytes / oogenesis / response to ATP / The NLRP3 inflammasome / monoatomic cation transport / positive regulation of interleukin-1 beta production / response to ischemia / calcium channel activity / calcium ion transport / actin filament binding / cell-cell signaling / protease binding / High laminar flow shear stress activates signaling by PIEZO1 and PECAM1:CDH5:KDR in endothelial cells / scaffold protein binding / transmembrane transporter binding / signaling receptor binding / endoplasmic reticulum membrane / structural molecule activity / endoplasmic reticulum / protein-containing complex / identical protein binding / membrane / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Pannexin / Innexin / Innexin / Pannexin family profile.
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.87 Å
データ登録者Hussain, N. / Penmatsa, A.
資金援助 インド, 1件
組織認可番号国
Department of Biotechnology (DBT, India)IA/I/15/2/502063 インド
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: Cryo-EM structures of pannexin 1 and 3 reveal differences among pannexin isoforms.
著者: Nazia Hussain / Ashish Apotikar / Shabareesh Pidathala / Sourajit Mukherjee / Ananth Prasad Burada / Sujit Kumar Sikdar / Kutti R Vinothkumar / Aravind Penmatsa /
要旨: Pannexins are single-membrane large-pore channels that release ions and ATP upon activation. Three isoforms of pannexins 1, 2, and 3, perform diverse cellular roles and differ in their pore lining ...Pannexins are single-membrane large-pore channels that release ions and ATP upon activation. Three isoforms of pannexins 1, 2, and 3, perform diverse cellular roles and differ in their pore lining residues. In this study, we report the cryo-EM structure of pannexin 3 at 3.9 Å and analyze its structural differences with pannexin isoforms 1 and 2. The pannexin 3 vestibule has two distinct chambers and a wider pore radius in comparison to pannexins 1 and 2. We further report two cryo-EM structures of pannexin 1, with pore substitutions W74R/R75D that mimic the pore lining residues of pannexin 2 and a germline mutant of pannexin 1, R217H at resolutions of 3.2 Å and 3.9 Å, respectively. Substitution of cationic residues in the vestibule of pannexin 1 results in reduced ATP interaction propensities to the channel. The germline mutant R217H in transmembrane helix 3 (TM3), leads to a partially constricted pore, reduced ATP interaction and weakened voltage sensitivity. The study compares the three pannexin isoform structures, the effects of substitutions of pore and vestibule-lining residues and allosteric effects of a pathological substitution on channel structure and function thereby enhancing our understanding of this vital group of ATP-release channels.
履歴
登録2022年9月8日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02024年2月28日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年3月6日Group: Database references / カテゴリ: citation / Item: _citation.title
改定 1.22024年6月19日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID
改定 1.32024年11月20日Group: Data collection / Structure summary
カテゴリ: em_admin / pdbx_entry_details / pdbx_modification_feature
Item: _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Pannexin-1
B: Pannexin-1
C: Pannexin-1
D: Pannexin-1
E: Pannexin-1
F: Pannexin-1
G: Pannexin-1


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)336,5247
ポリマ－336,5247
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質
Pannexin-1


分子量: 48074.816 Da / 分子数: 7 / 変異: R217H / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PANX1, MRS1, UNQ2529/PRO6028 / 細胞株 (発現宿主): HEK293S / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96RD7
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Pannexin 1 (R217H) / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT
詳細: human isoform 1 of Pannexin. Expressed in plasma membranes involved in ATP release
Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 48 kDa/nm / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
由来(組換発現)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 細胞: HEK293S / プラスミド: pEG Bacmam
緩衝液pH: 8
詳細: Fresh solution containing detergent was prepared for every prep.
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
125 mMTrisTris1
2100 mMpotassium chlorideKCl1
31 %glycerolGlycerol1
450 microMGlycodiosgeninGDN1
試料濃度: 2.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: Sample is homoheptamer purified to homogeneity.
試料支持詳細: 25 milli amps for 60s / グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 288 K
詳細: sequentially blotted for 2 and 3.5 seconds with a wait of 10 s.

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER
電子レンズモード: OTHER / 倍率（公称値）: 130000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 3300 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1800 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: COMA FREE
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
最高温度: 100 K / 最低温度: 100 K
撮影電子線照射量: 41.12 e/Å2 / 検出モード: COUNTING
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1776
電子光学装置エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / 色収差補正装置: None / 詳細: Bioquantum with K2 camera / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV / 位相板: OTHER / 球面収差補正装置: None
画像スキャン動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ詳細
1cryoSPARC粒子像選択Blobpicker
2EPU画像取得
4cryoSPARCv3CTF補正patch CTF
7Coot9.03モデルフィッティング
11cryoSPARC分類2D classification
12cryoSPARC３次元再構成non uniform refinement
13PHENIXモデル精密化real space refine
画像処理詳細: Images were screened for ice thickness
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 781859 / 詳細: selected through particle picking
対称性点対称性: C7 (7回回転対称)
3次元再構成解像度: 3.87 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 40873 / クラス平均像の数: 5 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築B value: 156 / プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coeficient
原子モデル構築PDB-ID: 6WBF

6wbf


PDB chain-ID: A / Accession code: 6WBF / Source name: PDB / タイプ: experimental model

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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