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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8ayz | ||||||
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タイトル | Poliovirus type 2 (strain MEF-1) virus-like particle in complex with capsid binder compound 17 | ||||||
要素 | (Capsid protein, ...) x 3 | ||||||
キーワード | VIRUS LIKE PARTICLE / Capsid protein / inhibitor / complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MAVS activity / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane ...symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MDA-5 activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of MAVS activity / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / nucleoside-triphosphate phosphatase / protein complex oligomerization / monoatomic ion channel activity / symbiont-mediated suppression of host gene expression / DNA replication / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / RNA helicase activity / induction by virus of host autophagy / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / virus-mediated perturbation of host defense response / DNA-templated transcription / host cell nucleus / virion attachment to host cell / structural molecule activity / proteolysis / RNA binding / ATP binding / membrane / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Human poliovirus 2 (ポリオウイルス) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 1.88 Å | ||||||
データ登録者 | Bahar, M.W. / Fry, E.E. / Stuart, D.I. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Commun Biol / 年: 2022 タイトル: A conserved glutathione binding site in poliovirus is a target for antivirals and vaccine stabilisation. 著者: Mohammad W Bahar / Veronica Nasta / Helen Fox / Lee Sherry / Keith Grehan / Claudine Porta / Andrew J Macadam / Nicola J Stonehouse / David J Rowlands / Elizabeth E Fry / David I Stuart / 要旨: Strategies to prevent the recurrence of poliovirus (PV) after eradication may utilise non-infectious, recombinant virus-like particle (VLP) vaccines. Despite clear advantages over inactivated or ...Strategies to prevent the recurrence of poliovirus (PV) after eradication may utilise non-infectious, recombinant virus-like particle (VLP) vaccines. Despite clear advantages over inactivated or attenuated virus vaccines, instability of VLPs can compromise their immunogenicity. Glutathione (GSH), an important cellular reducing agent, is a crucial co-factor for the morphogenesis of enteroviruses, including PV. We report cryo-EM structures of GSH bound to PV serotype 3 VLPs showing that it can enhance particle stability. GSH binds the positively charged pocket at the interprotomer interface shown recently to bind GSH in enterovirus F3 and putative antiviral benzene sulphonamide compounds in other enteroviruses. We show, using high-resolution cryo-EM, the binding of a benzene sulphonamide compound with a PV serotype 2 VLP, consistent with antiviral activity through over-stabilizing the interprotomer pocket, preventing the capsid rearrangements necessary for viral infection. Collectively, these results suggest GSH or an analogous tight-binding antiviral offers the potential for stabilizing VLP vaccines. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8ayz.cif.gz | 156.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8ayz.ent.gz | 124.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8ayz.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8ayz_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8ayz_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8ayz_validation.xml.gz | 44.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8ayz_validation.cif.gz | 66.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ay/8ayz ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ay/8ayz | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 15727MC 8ayxC 8ayyC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
| x 60
-要素
-Capsid protein, ... , 3種, 3分子 ABC
#1: タンパク質 | 分子量: 33111.207 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Human poliovirus 2 (ポリオウイルス) 株: MEF-1 / プラスミド: MVA-T7-Polio2 pIRES / 詳細 (発現宿主): Vaccinia virus transfer vector / 細胞株 (発現宿主): BHK-21 / 発現宿主: Mesocricetus auratus (ネズミ) / 参照: UniProt: P06210 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 37456.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: Sequence is given for the VP0 polypeptide. 由来: (組換発現) Human poliovirus 2 (ポリオウイルス) 株: MEF-1 / プラスミド: MVA-T7-Polio2 pIRES / 詳細 (発現宿主): Vaccinia virus transfer vector / 細胞株 (発現宿主): BHK-21 / 発現宿主: Mesocricetus auratus (ネズミ) / 参照: UniProt: P06210 |
#3: タンパク質 | 分子量: 26472.293 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Human poliovirus 2 (ポリオウイルス) 株: MEF-1 / プラスミド: MVA-T7-Polio2 pIRES / 詳細 (発現宿主): Vaccinia virus transfer vector / 細胞株 (発現宿主): BHK-21 / 発現宿主: Mesocricetus auratus (ネズミ) / 参照: UniProt: P06210 |
-非ポリマー , 3種, 264分子
#4: 化合物 | ChemComp-SPH / |
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#5: 化合物 | ChemComp-FHK / |
#6: 水 | ChemComp-HOH / |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Human poliovirus 2 / タイプ: VIRUS 詳細: Recombinantly expressed virus-like particle of PV2 (strain MEF-1) Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||
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分子量 | 値: 5.81 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Human poliovirus 2 (ポリオウイルス) / 株: MEF-1 | ||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Mesocricetus auratus (ネズミ) / 細胞: BHK-21 / プラスミド: MVA-T7-Polio2 pIRES | ||||||||||||
ウイルスについての詳細 | 中空か: YES / エンベロープを持つか: NO / 単離: SEROTYPE / タイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE | ||||||||||||
天然宿主 | 生物種: mammal environmental sample | ||||||||||||
ウイルス殻 | 名称: Virus shell 1 / 直径: 310 nm / 三角数 (T数): 1 | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 7 詳細: 1 x DPBS was made from tissue culture grade Dulbecco's Phosphate Buffered Saline (Sigma-Aldrich). 20 mM EDTA was prepared from fresh stocks of buffered EDTA. | ||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.75 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Recombinant VLP of PV2 mixed with capsid inhibitor compound 17 at a molar ratio of 1:2500. | ||||||||||||
試料支持 | 詳細: The specific type of grid used was Ultra-thin carbon support film, 3nm - on lacey carbon AGS187-4 from Agar Scientific. グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: EMS Lacey Carbon | ||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K 詳細: Single blotting with 3.5ul of sample. Four second blot time and -17 blot force on the vitrobot. |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 倍率(補正後): 60314 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2300 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 1.7 sec. / 電子線照射量: 34.68 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4750 詳細: Images were collected in electron counting mode with a calibrated pixel size of 0.829 A/pixel. Super-resolution pixel size 0.4145 A/pixel. Movies were collected in 50 frames. |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 5760 / 縦: 4092 |
-解析
EMソフトウェア |
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画像処理 | 詳細: All frames were used for motion correction. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 157002 詳細: Particle selection was automated with ETHAN particle picking software. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 1.88 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 51518 / アルゴリズム: BACK PROJECTION 詳細: Final reconstruction was Ewald sphere corrected and sharpened with Post-processing in RELION using an inverse B-factor of -15.0 Angstroms. B-factor was selected ad-hoc while testing a range ...詳細: Final reconstruction was Ewald sphere corrected and sharpened with Post-processing in RELION using an inverse B-factor of -15.0 Angstroms. B-factor was selected ad-hoc while testing a range of values for map interpretability. クラス平均像の数: 2 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Correlation coefficient 詳細: Initial model was rigid body fitted using UCSF chimera and Coot. Global minimization and B-factor refinement was performed in real space using phenix_real.space.refine. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 1EAH |