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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7xr3 | |||||||||
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タイトル | 3.4 Angstrom cryoEM D5 reconstruction of mud crab reovirus | |||||||||
要素 |
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キーワード | VIRUS / Reovirus / ds-RNA virus | |||||||||
機能・相同性 | VP3 / VP1 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Scylla serrata reovirus SZ-2007 (ウイルス) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhang, Q.F. / Gao, Y.Z. | |||||||||
資金援助 | 中国, 2件
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引用 | ジャーナル: PLoS Pathog / 年: 2023 タイトル: The structure of a 12-segmented dsRNA reovirus: New insights into capsid stabilization and organization. 著者: Qinfen Zhang / Yuanzhu Gao / Matthew L Baker / Shanshan Liu / Xudong Jia / Haidong Xu / Jianguo He / Jason T Kaelber / Shaoping Weng / Wen Jiang / 要旨: Infecting a wide range of hosts, members of Reovirales (formerly Reoviridae) consist of a genome with different numbers of segmented double stranded RNAs (dsRNA) encapsulated by a proteinaceous shell ...Infecting a wide range of hosts, members of Reovirales (formerly Reoviridae) consist of a genome with different numbers of segmented double stranded RNAs (dsRNA) encapsulated by a proteinaceous shell and carry out genome replication and transcription inside the virion. Several cryo-electron microscopy (cryo-EM) structures of reoviruses with 9, 10 or 11 segmented dsRNA genomes have revealed insights into genome arrangement and transcription. However, the structure and genome arrangement of 12-segmented Reovirales members remain poorly understood. Using cryo-EM, we determined the structure of mud crab reovirus (MCRV), a 12-segmented dsRNA virus that is a putative member of Reovirales in the non-turreted Sedoreoviridae family, to near-atomic resolutions with icosahedral symmetry (3.1 Å) and without imposing icosahedral symmetry (3.4 Å). These structures revealed the organization of the major capsid proteins in two layers: an outer T = 13 layer consisting of VP12 trimers and unique VP11 clamps, and an inner T = 1 layer consisting of VP3 dimers. Additionally, ten RNA dependent RNA polymerases (RdRp) were well resolved just below the VP3 layer but were offset from the 5-fold axes and arranged with D5 symmetry, which has not previously been seen in other members of Reovirales. The N-termini of VP3 were shown to adopt four unique conformations; two of which anchor the RdRps, while the other two conformations are likely involved in genome organization and capsid stability. Taken together, these structures provide a new level of understanding for capsid stabilization and genome organization of segmented dsRNA viruses. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7xr3.cif.gz | 1.6 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7xr3.ent.gz | 1.3 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7xr3.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7xr3_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7xr3_full_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7xr3_validation.xml.gz | 267.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7xr3_validation.cif.gz | 396.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xr/7xr3 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xr/7xr3 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 33404MC 7xr2C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
| x 10
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3 |
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対称性 | 点対称性: (シェーンフリース記号: D5 (2回x5回 2面回転対称)) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 97019.383 Da / 分子数: 10 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Scylla serrata reovirus SZ-2007 (ウイルス) 参照: UniProt: E9LEU6 #2: タンパク質 | | 分子量: 161488.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Scylla serrata reovirus SZ-2007 (ウイルス) 参照: UniProt: G9BD97 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Scylla serrata reovirus SZ-2007 / タイプ: VIRUS / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Scylla serrata reovirus SZ-2007 (ウイルス) |
ウイルスについての詳細 | 中空か: NO / エンベロープを持つか: NO / 単離: STRAIN / タイプ: VIRION |
天然宿主 | 生物種: Scylla serrata |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 75000 X / 倍率(補正後): 128440 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / Calibrated defocus min: 600 nm / 最大 デフォーカス(補正後): 3000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 最高温度: 100 K / 最低温度: 80 K |
撮影 | 平均露光時間: 1.1 sec. / 電子線照射量: 25 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3595 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 14 µm / 横: 4096 / 縦: 4096 / 動画フレーム数/画像: 16 / 利用したフレーム数/画像: 1-16 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.14rc1_3161: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 58095 | ||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 58095 / 対称性のタイプ: POINT |