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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7unf | ||||||||||||
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タイトル | CryoEM structure of a mEAK7 bound human V-ATPase complex | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | PROTON TRANSPORT / mTOR signaling | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 proton-transporting two-sector ATPase complex / renal tubular secretion / Blockage of phagosome acidification / Ion channel transport / Regulation of MITF-M-dependent genes involved in lysosome biogenesis and autophagy / intracellular pH reduction / Nef Mediated CD8 Down-regulation / ATPase-coupled ion transmembrane transporter activity / plasma membrane proton-transporting V-type ATPase complex / cellular response to increased oxygen levels ...proton-transporting two-sector ATPase complex / renal tubular secretion / Blockage of phagosome acidification / Ion channel transport / Regulation of MITF-M-dependent genes involved in lysosome biogenesis and autophagy / intracellular pH reduction / Nef Mediated CD8 Down-regulation / ATPase-coupled ion transmembrane transporter activity / plasma membrane proton-transporting V-type ATPase complex / cellular response to increased oxygen levels / Golgi lumen acidification / proton-transporting V-type ATPase, V0 domain / synaptic vesicle lumen acidification / Transferrin endocytosis and recycling / extrinsic component of synaptic vesicle membrane / lysosomal lumen acidification / clathrin-coated vesicle membrane / endosomal lumen acidification / XBP1(S) activates chaperone genes / vacuolar proton-transporting V-type ATPase, V0 domain / vacuolar transport / vacuolar proton-transporting V-type ATPase, V1 domain / regulation of pH / Amino acids regulate mTORC1 / proton-transporting V-type ATPase complex / vacuolar proton-transporting V-type ATPase complex / ROS and RNS production in phagocytes / protein localization to cilium / Nef Mediated CD4 Down-regulation / vacuolar acidification / dendritic spine membrane / azurophil granule membrane / tertiary granule membrane / microvillus / proton transmembrane transporter activity / autophagosome membrane / positive regulation of Wnt signaling pathway / ficolin-1-rich granule membrane / cilium assembly / transmembrane transporter complex / regulation of macroautophagy / specific granule membrane / enzyme regulator activity / H+-transporting two-sector ATPase / axon terminus / Insulin receptor recycling / proton-transporting ATPase activity, rotational mechanism / RNA endonuclease activity / proton-transporting ATP synthase activity, rotational mechanism / receptor-mediated endocytosis / ossification / proton transmembrane transport / secretory granule / membrane => GO:0016020 / sensory perception of sound / brush border membrane / transmembrane transport / cilium / synaptic vesicle membrane / endocytosis / phagocytic vesicle membrane / apical part of cell / signaling receptor activity / ATPase binding / intracellular iron ion homeostasis / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / early endosome / endosome membrane / endosome / apical plasma membrane / lysosomal membrane / Golgi membrane / intracellular membrane-bounded organelle / focal adhesion / centrosome / ubiquitin protein ligase binding / Neutrophil degranulation / endoplasmic reticulum membrane / protein-containing complex binding / ATP hydrolysis activity / extracellular exosome / nucleoplasm / ATP binding / membrane / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.08 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Wang, R. / Li, X. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Molecular basis of mEAK7-mediated human V-ATPase regulation. 著者: Rong Wang / Yu Qin / Xiao-Song Xie / Xiaochun Li / 要旨: The activity of V-ATPase is well-known to be regulated by reversible dissociation of its V and V domains in response to growth factor stimulation, nutrient sensing, and cellular differentiation. The ...The activity of V-ATPase is well-known to be regulated by reversible dissociation of its V and V domains in response to growth factor stimulation, nutrient sensing, and cellular differentiation. The molecular basis of its regulation by an endogenous modulator without affecting V-ATPase assembly remains unclear. Here, we discover that a lysosome-anchored protein termed (mammalian Enhancer-of-Akt-1-7 (mEAK7)) binds to intact V-ATPase. We determine cryo-EM structure of human mEAK7 in complex with human V-ATPase in native lipid-containing nanodiscs. The structure reveals that the TLDc domain of mEAK7 engages with subunits A, B, and E, while its C-terminal domain binds to subunit D, presumably blocking V-V torque transmission. Our functional studies suggest that mEAK7, which may act as a V-ATPase inhibitor, does not affect the activity of V-ATPase in vitro. However, overexpression of mEAK7 in HCT116 cells that stably express subunit a4 of V-ATPase represses the phosphorylation of ribosomal protein S6. Thus, this finding suggests that mEAK7 potentially links mTOR signaling with V-ATPase activity. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7unf.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7unf.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7unf.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7unf_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7unf_full_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7unf_validation.xml.gz | 202.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7unf_validation.cif.gz | 321.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/un/7unf ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/un/7unf | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 26623MC 7uneC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-V-type proton ATPase ... , 14種, 30分子 aLMNOPQDbcdefgFCHkms8923456701
#1: タンパク質 | 分子量: 98530.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ATP6V0A4, ATP6N1B, ATP6N2 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9HBG4 | ||||||||||||||||||||||||
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#3: タンパク質 | 分子量: 68379.875 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P38606, H+-transporting two-sector ATPase #4: タンパク質 | 分子量: 56561.500 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P21281 #5: タンパク質 | | 分子量: 28311.918 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y5K8 #6: タンパク質 | 分子量: 26183.346 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P36543 #7: タンパク質 | 分子量: 13781.547 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75348 #8: タンパク質 | | 分子量: 13388.210 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q16864 #9: タンパク質 | | 分子量: 43999.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P21283 #10: タンパク質 | | 分子量: 55949.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UI12 #11: タンパク質 | | 分子量: 40369.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P61421 #12: タンパク質 | | 分子量: 9380.329 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O15342 #14: タンパク質 | | 分子量: 52067.480 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15904 #16: タンパク質 | 分子量: 15743.655 Da / 分子数: 9 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P27449 #17: タンパク質 | | 分子量: 21418.213 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q99437 |
-タンパク質 , 3種, 3分子 Unr
#2: タンパク質 | 分子量: 51096.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: D3DUL8 |
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#13: タンパク質 | 分子量: 15435.220 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) 参照: UniProt: Q6P5S7, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 |
#15: タンパク質 | 分子量: 38421.098 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: A0A1B0GVW0 |
-糖 , 3種, 8分子
#18: 多糖 | alpha-D-glucopyranose-(1-3)-alpha-D-glucopyranose-(1-3)-alpha-D-mannopyranose-(1-2)-alpha-D- ...alpha-D-glucopyranose-(1-3)-alpha-D-glucopyranose-(1-3)-alpha-D-mannopyranose-(1-2)-alpha-D-mannopyranose-(1-2)-alpha-D-mannopyranose-(1-3)-beta-D-mannopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose タイプ: oligosaccharide / 分子量: 1397.245 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 |
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#19: 多糖 | alpha-D-mannopyranose-(1-6)-alpha-D-mannopyranose |
#21: 糖 | ChemComp-NAG / |
-非ポリマー , 2種, 10分子
#20: 化合物 | ChemComp-ADP / |
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#22: 化合物 | ChemComp-POV / ( |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: CryoEM structure of mEAK7 bound human V-ATPase complex タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#17 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
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3次元再構成 | 解像度: 4.08 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 24984 / 対称性のタイプ: POINT |