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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7tql | ||||||||||||
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タイトル | CryoEM structure of the human 40S small ribosomal subunit in complex with translation initiation factors eIF1A and eIF5B. | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / eIF5B / translation / initiation / eIF1A | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein-synthesizing GTPase / positive regulation of cysteine-type endopeptidase activity involved in execution phase of apoptosis / negative regulation of endoplasmic reticulum unfolded protein response / oxidized pyrimidine DNA binding / response to TNF agonist / positive regulation of base-excision repair / protein tyrosine kinase inhibitor activity / positive regulation of respiratory burst involved in inflammatory response / regulation of adenylate cyclase-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / positive regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway in response to DNA damage ...protein-synthesizing GTPase / positive regulation of cysteine-type endopeptidase activity involved in execution phase of apoptosis / negative regulation of endoplasmic reticulum unfolded protein response / oxidized pyrimidine DNA binding / response to TNF agonist / positive regulation of base-excision repair / protein tyrosine kinase inhibitor activity / positive regulation of respiratory burst involved in inflammatory response / regulation of adenylate cyclase-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / positive regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway in response to DNA damage / positive regulation of gastrulation / nucleolus organization / IRE1-RACK1-PP2A complex / positive regulation of endodeoxyribonuclease activity / positive regulation of Golgi to plasma membrane protein transport / TNFR1-mediated ceramide production / negative regulation of DNA repair / negative regulation of RNA splicing / negative regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway in response to hydrogen peroxide / oxidized purine DNA binding / supercoiled DNA binding / neural crest cell differentiation / NF-kappaB complex / ubiquitin-like protein conjugating enzyme binding / regulation of translational initiation / regulation of establishment of cell polarity / negative regulation of phagocytosis / positive regulation of ubiquitin-protein transferase activity / rRNA modification in the nucleus and cytosol / Formation of the ternary complex, and subsequently, the 43S complex / erythrocyte homeostasis / cytoplasmic side of rough endoplasmic reticulum membrane / protein kinase A binding / negative regulation of ubiquitin protein ligase activity / Ribosomal scanning and start codon recognition / ion channel inhibitor activity / Translation initiation complex formation / pigmentation / positive regulation of mitochondrial depolarization / mammalian oogenesis stage / activation-induced cell death of T cells / negative regulation of Wnt signaling pathway / positive regulation of T cell receptor signaling pathway / fibroblast growth factor binding / positive regulation of activated T cell proliferation / iron-sulfur cluster binding / regulation of cell division / Protein hydroxylation / monocyte chemotaxis / negative regulation of peptidyl-serine phosphorylation / BH3 domain binding / mTORC1-mediated signalling / SARS-CoV-1 modulates host translation machinery / Peptide chain elongation / positive regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway by p53 class mediator / cysteine-type endopeptidase activator activity involved in apoptotic process / Selenocysteine synthesis / positive regulation of signal transduction by p53 class mediator / Formation of a pool of free 40S subunits / Eukaryotic Translation Termination / phagocytic cup / ubiquitin ligase inhibitor activity / Response of EIF2AK4 (GCN2) to amino acid deficiency / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / negative regulation of respiratory burst involved in inflammatory response / negative regulation of phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B signal transduction / Viral mRNA Translation / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / TOR signaling / endonucleolytic cleavage to generate mature 3'-end of SSU-rRNA from (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / T cell proliferation involved in immune response / spindle assembly / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / regulation of translational fidelity / erythrocyte development / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / negative regulation of ubiquitin-dependent protein catabolic process / Protein methylation / Amplification of signal from unattached kinetochores via a MAD2 inhibitory signal / translation regulator activity / Nuclear events stimulated by ALK signaling in cancer / ribosomal small subunit export from nucleus / positive regulation of cell cycle / signaling adaptor activity / negative regulation of smoothened signaling pathway / positive regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway / stress granule assembly / Mitotic Prometaphase / cytosolic ribosome / EML4 and NUDC in mitotic spindle formation / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rough endoplasmic reticulum / positive regulation of JUN kinase activity / Maturation of protein E / Maturation of protein E / gastrulation / ER Quality Control Compartment (ERQC) / MDM2/MDM4 family protein binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Lapointe, C.P. / Grosely, R. / Sokabe, M. / Alvarado, C. / Wang, J. / Montabana, E. / Villa, N. / Shin, B. / Dever, T. / Fraser, C. ...Lapointe, C.P. / Grosely, R. / Sokabe, M. / Alvarado, C. / Wang, J. / Montabana, E. / Villa, N. / Shin, B. / Dever, T. / Fraser, C. / Fernandez, I.S. / Puglisi, J.D. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, スウェーデン, 3件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2022 タイトル: eIF5B and eIF1A reorient initiator tRNA to allow ribosomal subunit joining. 著者: Christopher P Lapointe / Rosslyn Grosely / Masaaki Sokabe / Carlos Alvarado / Jinfan Wang / Elizabeth Montabana / Nancy Villa / Byung-Sik Shin / Thomas E Dever / Christopher S Fraser / Israel ...著者: Christopher P Lapointe / Rosslyn Grosely / Masaaki Sokabe / Carlos Alvarado / Jinfan Wang / Elizabeth Montabana / Nancy Villa / Byung-Sik Shin / Thomas E Dever / Christopher S Fraser / Israel S Fernández / Joseph D Puglisi / 要旨: Translation initiation defines the identity and quantity of a synthesized protein. The process is dysregulated in many human diseases. A key commitment step is when the ribosomal subunits join at a ...Translation initiation defines the identity and quantity of a synthesized protein. The process is dysregulated in many human diseases. A key commitment step is when the ribosomal subunits join at a translation start site on a messenger RNA to form a functional ribosome. Here, we combined single-molecule spectroscopy and structural methods using an in vitro reconstituted system to examine how the human ribosomal subunits join. Single-molecule fluorescence revealed when the universally conserved eukaryotic initiation factors eIF1A and eIF5B associate with and depart from initiation complexes. Guided by single-molecule dynamics, we visualized initiation complexes that contained both eIF1A and eIF5B using single-particle cryo-electron microscopy. The resulting structure revealed how eukaryote-specific contacts between the two proteins remodel the initiation complex to orient the initiator aminoacyl-tRNA in a conformation compatible with ribosomal subunit joining. Collectively, our findings provide a quantitative and architectural framework for the molecular choreography orchestrated by eIF1A and eIF5B during translation initiation in humans. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7tql.cif.gz | 2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7tql.ent.gz | 1.6 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7tql.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/tq/7tql ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/tq/7tql | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 26067MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 4種, 4分子 14Yj
#1: タンパク質 | 分子量: 69868.062 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: EIF5B, IF2, KIAA0741 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: O60841, protein-synthesizing GTPase |
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#4: タンパク質 | 分子量: 10384.011 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) |
#27: タンパク質 | 分子量: 14361.046 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS24 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62847 |
#37: タンパク質 | 分子量: 34726.164 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RACK1, GNB2L1, HLC7, PIG21 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P63244 |
-RNA鎖 , 2種, 2分子 23
#2: RNA鎖 | 分子量: 534544.750 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) |
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#3: RNA鎖 | 分子量: 24231.510 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 174924 |
-Ribosomal protein ... , 12種, 13分子 BCNOPSTVadefh
#5: タンパク質 | 分子量: 47843.590 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #16: タンパク質 | | 分子量: 16340.327 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #17: タンパク質 | | 分子量: 13347.567 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #18: タンパク質 | | 分子量: 14344.424 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #21: タンパク質 | | 分子量: 15250.714 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #22: タンパク質 | | 分子量: 16496.223 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #24: タンパク質 | | 分子量: 11508.648 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #29: タンパク質 | | 分子量: 8182.693 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #32: タンパク質 | | 分子量: 6451.396 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #33: タンパク質 | | 分子量: 5640.648 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #34: タンパク質 | | 分子量: 6502.573 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) #36: タンパク質・ペプチド | | 分子量: 2683.481 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) |
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-40S ribosomal protein ... , 19種, 19分子 DEFGHIJKLMQRUWXZbcg
#6: タンパク質 | 分子量: 24091.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS2, RPS4 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P15880 |
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#7: タンパク質 | 分子量: 29164.336 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS4X, CCG2, RPS4, SCAR / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62701 |
#8: タンパク質 | 分子量: 24970.289 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS3, OK/SW-cl.26 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) 参照: UniProt: P23396, DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase |
#9: タンパク質 | 分子量: 26157.934 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS6, OK/SW-cl.2 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62753 |
#10: タンパク質 | 分子量: 21187.762 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS7 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62081 |
#11: タンパク質 | 分子量: 23945.959 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS8, OK/SW-cl.83 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62241 |
#12: タンパク質 | 分子量: 21279.271 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS9 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P46781 |
#13: タンパク質 | 分子量: 21327.723 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS5 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P46782 |
#14: タンパク質 | 分子量: 17170.248 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS11 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62280 |
#15: タンパク質 | 分子量: 11616.760 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS10 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: A0A2R8Y7H1 |
#19: タンパク質 | 分子量: 13586.022 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS15, RIG / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62841 |
#20: タンパク質 | 分子量: 15765.480 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS16 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62249 |
#23: タンパク質 | 分子量: 15409.689 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS19 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P39019 |
#25: タンパク質 | 分子量: 14734.357 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS15A, OK/SW-cl.82 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62244 |
#26: タンパク質 | 分子量: 15626.392 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS23 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62266 |
#28: タンパク質 | 分子量: 8977.214 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS21 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P63220 |
#30: タンパク質 | 分子量: 9210.843 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS27, MPS1 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P42677 |
#31: タンパク質 | 分子量: 11341.426 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS26 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62854 |
#35: タンパク質 | 分子量: 7623.009 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RPS27A, UBA80, UBCEP1 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62979 |
-非ポリマー , 3種, 5分子
#38: 化合物 | ChemComp-GNP / |
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#39: 化合物 | ChemComp-5GP / |
#40: 化合物 |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: human 40S ribosomal subunit in complex with eIF1A and eIF5B タイプ: CELL / Entity ID: #2-#30, #32-#33, #36-#37 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 7.2 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 70 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: REFMAC / バージョン: 5.8.0267 / 分類: 精密化 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: NONE | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 190000 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 解像度: 3.2→237.11 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.964 / SU B: 23.665 / SU ML: 0.345 / ESU R: 0.539 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
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溶媒の処理 | イオンプローブ半径: 0.8 Å / 減衰半径: 0.8 Å / VDWプローブ半径: 1.2 Å / 溶媒モデル: MASK | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 131.797 Å2
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精密化ステップ | サイクル: 1 / 合計: 80976 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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