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- PDB-7pkp: NSP2 RNP complex -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7pkp
タイトルNSP2 RNP complex
要素Non-structural protein 2
キーワードVIRAL PROTEIN / RNA Chaperone RNA folding Rotavirus
機能・相同性
機能・相同性情報


nucleoside diphosphate kinase activity / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / viral genome replication / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / host cell cytoplasm / RNA binding / ATP binding / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
: / : / Rotavirus non-structural protein 35, N-terminal / Rotavirus NSP2, N-terminal / Rotavirus NSP2, C-terminal / Rotavirus non-structural protein 35, C-terminal / Rotavirus non-structural protein 2
類似検索 - ドメイン・相同性
Non-structural protein 2
類似検索 - 構成要素
生物種Rotavirus A (ロタウイルス A)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å
データ登録者Bravo, J.P.K. / Borodavka, A.
資金援助 英国, 2件
組織認可番号
Wellcome Trust213437/Z/18/Z 英国
Biotechnology and Biological Sciences Research Council (BBSRC)BB/M011151/1 英国
引用ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / : 2021
タイトル: Structural basis of rotavirus RNA chaperone displacement and RNA annealing.
著者: Jack P K Bravo / Kira Bartnik / Luca Venditti / Julia Acker / Emma H Gail / Alice Colyer / Chen Davidovich / Don C Lamb / Roman Tuma / Antonio N Calabrese / Alexander Borodavka /
要旨: Rotavirus genomes are distributed between 11 distinct RNA molecules, all of which must be selectively copackaged during virus assembly. This likely occurs through sequence-specific RNA interactions ...Rotavirus genomes are distributed between 11 distinct RNA molecules, all of which must be selectively copackaged during virus assembly. This likely occurs through sequence-specific RNA interactions facilitated by the RNA chaperone NSP2. Here, we report that NSP2 autoregulates its chaperone activity through its C-terminal region (CTR) that promotes RNA-RNA interactions by limiting its helix-unwinding activity. Unexpectedly, structural proteomics data revealed that the CTR does not directly interact with RNA, while accelerating RNA release from NSP2. Cryo-electron microscopy reconstructions of an NSP2-RNA complex reveal a highly conserved acidic patch on the CTR, which is poised toward the bound RNA. Virus replication was abrogated by charge-disrupting mutations within the acidic patch but completely restored by charge-preserving mutations. Mechanistic similarities between NSP2 and the unrelated bacterial RNA chaperone Hfq suggest that accelerating RNA dissociation while promoting intermolecular RNA interactions may be a widespread strategy of RNA chaperone recycling.
履歴
登録2021年8月26日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02021年9月29日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12021年10月20日Group: Data collection / Database references
カテゴリ: citation / citation_author ...citation / citation_author / database_PDB_rev / database_PDB_rev_record / em_admin / pdbx_database_proc
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_ASTM / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _em_admin.last_update
改定 1.22024年7月17日Group: Data collection / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / em_admin / Item: _em_admin.last_update

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-13476
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-13476
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
U: Non-structural protein 2
A: Non-structural protein 2
B: Non-structural protein 2
C: Non-structural protein 2
D: Non-structural protein 2
E: Non-structural protein 2
F: Non-structural protein 2
G: Non-structural protein 2


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)289,8798
ポリマ-289,8798
非ポリマー00
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551
Buried area19180 Å2
ΔGint-98 kcal/mol
Surface area120170 Å2
手法PISA

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要素

#1: タンパク質
Non-structural protein 2 / NSP2 / NCVP3 / Non-structural RNA-binding protein 35 / NS35


分子量: 36234.820 Da / 分子数: 8 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Rotavirus A (ロタウイルス A) / 遺伝子: NSP2 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌)
参照: UniProt: A2T3N6, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: NSP2 RNP complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
由来(天然)生物種: Rotavirus (ウイルス)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD
撮影電子線照射量: 55 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.16_3549: / 分類: 精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 38252 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00820792
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.6828072
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d5.04512640
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0433136
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0043552

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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