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- PDB-7paf: Streptococcus pneumoniae choline importer LicB in lipid nanodiscs -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7paf
タイトルStreptococcus pneumoniae choline importer LicB in lipid nanodiscs
要素
  • LicB protein
  • Nanobody
キーワードTRANSPORT PROTEIN / Importer / Choline / nanodisc / Nanobody
機能・相同性: / EamA domain / EamA-like transporter family / membrane / Chem-PGT / LicB protein
機能・相同性情報
生物種synthetic construct (人工物)
Streptococcus pneumoniae TIGR4 (肺炎レンサ球菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.75 Å
データ登録者Perez, C. / Baerland, N.
資金援助 スイス, 1件
組織認可番号国
Swiss National Science FoundationPP00P3_170607 スイス
引用
ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022
タイトル: Mechanistic basis of choline import involved in teichoic acids and lipopolysaccharide modification.
著者: Natalie Bärland / Anne-Stéphanie Rueff / Gonzalo Cebrero / Cedric A J Hutter / Markus A Seeger / Jan-Willem Veening / Camilo Perez /
要旨: Phosphocholine molecules decorating bacterial cell wall teichoic acids and outer-membrane lipopolysaccharide have fundamental roles in adhesion to host cells, immune evasion, and persistence. ...Phosphocholine molecules decorating bacterial cell wall teichoic acids and outer-membrane lipopolysaccharide have fundamental roles in adhesion to host cells, immune evasion, and persistence. Bacteria carrying the operon that performs phosphocholine decoration synthesize phosphocholine after uptake of the choline precursor by LicB, a conserved transporter among divergent species. is a prominent pathogen where phosphocholine decoration plays a fundamental role in virulence. Here, we present cryo-electron microscopy and crystal structures of LicB, revealing distinct conformational states and describing architectural and mechanistic elements essential to choline import. Together with in vitro and in vivo functional characterization, we found that LicB displays proton-coupled import activity and promiscuous selectivity involved in adaptation to choline deprivation conditions, and describe LicB inhibition by synthetic nanobodies (sybodies). Our results provide previously unknown insights into the molecular mechanism of a key transporter involved in bacterial pathogenesis and establish a basis for inhibition of the phosphocholine modification pathway across bacterial phyla.
#1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2021
タイトル: Mechanistic basis of choline import involved in teichoic acids and lipopolysaccharide modification
著者: Barland, N. / Rueff, A.S. / Cebrero, G. / Hutter, C.A. / Seeger, M.A. / Veening, J.W. / Perez, C.
履歴
登録2021年7月29日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02022年3月16日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年11月6日Group: Data collection / Database references / Structure summary
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / citation / em_admin / pdbx_entry_details / pdbx_modification_feature
Item: _citation.journal_id_ISSN / _em_admin.last_update / _pdbx_entry_details.has_protein_modification

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-13268
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
B: Nanobody
A: LicB protein
C: Nanobody
D: LicB protein
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)97,6515
ポリマ－96,9004
非ポリマー7511
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area3150 Å2
ΔGint-36 kcal/mol
Surface area37860 Å2

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要素

#1: 抗体 Nanobody


分子量: 16802.365 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) synthetic construct (人工物) / 発現宿主: Escherichia coli MC1061 (大腸菌)
#2: タンパク質 LicB protein


分子量: 31647.631 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Streptococcus pneumoniae TIGR4 (肺炎レンサ球菌)
株: ATCC BAA-334 / TIGR4 / 遺伝子: licB, SP_1268 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0H2UQH5
#3: 化合物 ChemComp-PGT / (1S)-2-{[{[(2R)-2,3-DIHYDROXYPROPYL]OXY}(HYDROXY)PHOSPHORYL]OXY}-1-[(PALMITOYLOXY)METHYL]ETHYL STEARATE / PHOSPHATIDYLGLYCEROL / 1-PALMITOYL-2-OLEOYL-SN-GLYCERO-3-[PHOSPHO-RAC-(1-GLYCEROL)](SODIUM SALT)


分子量: 751.023 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: C40H79O10P / コメント: リン脂質*YM
研究の焦点であるリガンドがあるかN
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Choline importer in nanodiscs bound to nanobody / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 0.260 MDa / 実験値: YES
由来(天然)生物種: Streptococcus pneumoniae TIGR4 (肺炎レンサ球菌)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE-PROPANE / 湿度: 95 %

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電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: TFS GLACIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: SPOT SCAN
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 3000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0 nm
撮影電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.15.2_3472: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1cryoSPARCv3.2.0粒子像選択
4cryoSPARCv3.2.0CTF補正
10cryoSPARCv3.2.0初期オイラー角割当
11cryoSPARCv3.2.0最終オイラー角割当
12cryoSPARCv3.2.0分類
13cryoSPARCv3.2.0３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C2 (2回回転対称)
3次元再構成解像度: 3.75 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 78649 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: OTHER
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0036454
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.5598788
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d8.8933684
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.041042
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0041070

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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