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- PDB-6xfa: Cryo-EM structure of EBV BFLF1 -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 6xfa
タイトルCryo-EM structure of EBV BFLF1
要素Packaging protein UL32
キーワードVIRAL PROTEIN / viral packaging / viral cleavage
機能・相同性Herpesvirus major envelope glycoprotein / Herpesvirus putative major envelope glycoprotein / host cell cytoplasm / viral envelope / host cell nucleus / cytoplasm / Packaging protein UL32 / Packaging protein UL32 homolog
機能・相同性情報
生物種Epstein-Barr virus (ヘルペスウイルス)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å
データ登録者Didychuk, A.L. / Gates, S.N. / Martin, A. / Glaunsinger, B.
資金援助 米国, 2件
組織認可番号
National Institutes of Health/National Institute Of Allergy and Infectious Diseases (NIH/NIAID)R01AI122528 米国
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: Elife / : 2021
タイトル: A pentameric protein ring with novel architecture is required for herpesviral packaging.
著者: Allison L Didychuk / Stephanie N Gates / Matthew R Gardner / Lisa M Strong / Andreas Martin / Britt A Glaunsinger /
要旨: Genome packaging in large double-stranded DNA viruses requires a powerful molecular motor to force the viral genome into nascent capsids, which involves essential accessory factors that are poorly ...Genome packaging in large double-stranded DNA viruses requires a powerful molecular motor to force the viral genome into nascent capsids, which involves essential accessory factors that are poorly understood. Here, we present structures of two such accessory factors from the oncogenic herpesviruses Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV; ORF68) and Epstein-Barr virus (EBV; BFLF1). These homologous proteins form highly similar homopentameric rings with a positively charged central channel that binds double-stranded DNA. Mutation of individual positively charged residues within but not outside the channel ablates DNA binding, and in the context of KSHV infection, these mutants fail to package the viral genome or produce progeny virions. Thus, we propose a model in which ORF68 facilitates the transfer of newly replicated viral genomes to the packaging motor.
履歴
登録2020年6月15日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02021年2月24日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年3月6日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-22168
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Packaging protein UL32
B: Packaging protein UL32
C: Packaging protein UL32
D: Packaging protein UL32
E: Packaging protein UL32
F: Packaging protein UL32
G: Packaging protein UL32
H: Packaging protein UL32
I: Packaging protein UL32
J: Packaging protein UL32
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)538,09630
ポリマ-536,78810
非ポリマー1,30820
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551
Buried area25810 Å2
ΔGint-148 kcal/mol
Surface area157910 Å2

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要素

#1: タンパク質
Packaging protein UL32


分子量: 53678.797 Da / 分子数: 10 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Epstein-Barr virus (strain GD1) (ヘルペスウイルス)
: GD1 / 遺伝子: BFLF1 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: A0A2D1LYN0, UniProt: P03184*PLUS
#2: 化合物
ChemComp-ZN / ZINC ION


分子量: 65.409 Da / 分子数: 20 / 由来タイプ: 合成 / : Zn
研究の焦点であるリガンドがあるかN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Decamer structure of EBV BFLF1 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT
分子量: 0.536 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Epstein-Barr virus (strain GD1) (ヘルペスウイルス)
由来(組換発現)生物種: Homo sapiens (ヒト)
緩衝液pH: 7.6
緩衝液成分
ID濃度名称Buffer-ID
160 mMHepes1
2100 mMSodium ChlorideNaCl1
350 mMPotassium ChlorideKCl1
410 mMMagnesium ChlorideMgCl21
50.5 mMTCEP1
60.05 %NP-401
試料濃度: 4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 295 K / 詳細: 2 second blot, 3 second wait

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TALOS ARCTICA
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN / 試料ホルダーモデル: OTHER
撮影平均露光時間: 2.4 sec. / 電子線照射量: 48 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 839

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解析

EMソフトウェア
ID名称カテゴリ
1RELION粒子像選択
2SerialEM画像取得
4CTFFINDCTF補正
10RELION初期オイラー角割当
11RELION最終オイラー角割当
12RELION分類
13RELION3次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 278234
対称性点対称性: D5 (2回x5回 2面回転対称)
3次元再構成解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 32272 / 対称性のタイプ: POINT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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