+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6pss | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Escherichia coli RNA polymerase promoter unwinding intermediate (TRPi1.5a) with TraR and mutant rpsT P2 promoter | ||||||
![]() |
| ||||||
![]() | transcription/dna / TRANSCRIPTION / transcription-dna complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() positive regulation of secondary metabolite biosynthetic process / sigma factor antagonist complex / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility ...positive regulation of secondary metabolite biosynthetic process / sigma factor antagonist complex / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / DNA-directed RNA polymerase complex / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription initiation / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / membrane / metal ion binding / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.5 Å | ||||||
![]() | Chen, J. / Chiu, C.E. / Campbell, E.A. / Darst, S.A. | ||||||
資金援助 | ![]()
| ||||||
![]() | ![]() タイトル: Stepwise Promoter Melting by Bacterial RNA Polymerase. 著者: James Chen / Courtney Chiu / Saumya Gopalkrishnan / Albert Y Chen / Paul Dominic B Olinares / Ruth M Saecker / Jared T Winkelman / Michael F Maloney / Brian T Chait / Wilma Ross / Richard L ...著者: James Chen / Courtney Chiu / Saumya Gopalkrishnan / Albert Y Chen / Paul Dominic B Olinares / Ruth M Saecker / Jared T Winkelman / Michael F Maloney / Brian T Chait / Wilma Ross / Richard L Gourse / Elizabeth A Campbell / Seth A Darst / ![]() 要旨: Transcription initiation requires formation of the open promoter complex (RPo). To generate RPo, RNA polymerase (RNAP) unwinds the DNA duplex to form the transcription bubble and loads the DNA into ...Transcription initiation requires formation of the open promoter complex (RPo). To generate RPo, RNA polymerase (RNAP) unwinds the DNA duplex to form the transcription bubble and loads the DNA into the RNAP active site. RPo formation is a multi-step process with transient intermediates of unknown structure. We use single-particle cryoelectron microscopy to visualize seven intermediates containing Escherichia coli RNAP with the transcription factor TraR en route to forming RPo. The structures span the RPo formation pathway from initial recognition of the duplex promoter in a closed complex to the final RPo. The structures and supporting biochemical data define RNAP and promoter DNA conformational changes that delineate steps on the pathway, including previously undetected transient promoter-RNAP interactions that contribute to populating the intermediates but do not occur in RPo. Our work provides a structural basis for understanding RPo formation and its regulation, a major checkpoint in gene expression throughout evolution. | ||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
ムービー |
![]() |
---|---|
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 737.9 KB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 583.5 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 107.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 166.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
-DNA-directed RNA polymerase subunit ... , 4種, 6分子 GHMIJK
#1: タンパク質 | 分子量: 36558.680 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() #2: タンパク質 | | 分子量: 150820.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: P0A8V4, UniProt: P0A8V2*PLUS, DNA-directed RNA polymerase #3: タンパク質 | | 分子量: 158073.609 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() #4: タンパク質 | | 分子量: 10249.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: P0A802, UniProt: P0A800*PLUS, DNA-directed RNA polymerase |
---|
-タンパク質 , 2種, 2分子 LN
#5: タンパク質 | 分子量: 70715.609 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
---|---|
#6: タンパク質 | 分子量: 8193.296 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 OP
#7: DNA鎖 | 分子量: 26244.838 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: Template strand of rpsT P2 DNA promoter / 由来: (合成) ![]() ![]() |
---|---|
#8: DNA鎖 | 分子量: 26191.744 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 詳細: Template strand of rpsT P2 DNA promoter / 由来: (合成) ![]() ![]() |
-非ポリマー , 2種, 4分子 ![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
#9: 化合物 | ChemComp-MG / |
---|---|
#10: 化合物 |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
構成要素 | 名称: Escherichia coli sigma70-holoenzyme bound to TraR and mutant rpsT P2 as TRPi1.5a タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#8 / 由来: RECOMBINANT |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-
解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
---|---|
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 3.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 56721 / 対称性のタイプ: POINT |