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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6nmc | ||||||
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タイトル | CryoEM structure of the LbCas12a-crRNA-2xAcrVA1 complex | ||||||
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![]() | Unknown Function/RNA / Unknown Function-RNA complex | ||||||
機能・相同性 | ![]() | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.24 Å | ||||||
![]() | Chang, L. / Li, Z. / Zhang, H. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural Basis for the Inhibition of CRISPR-Cas12a by Anti-CRISPR Proteins. 著者: Heng Zhang / Zhuang Li / Courtney M Daczkowski / Clinton Gabel / Andrew D Mesecar / Leifu Chang / ![]() 要旨: CRISPR-Cas12a (Cpf1), a type V CRISPR-associated nuclease, provides bacterial immunity against bacteriophages and plasmids but also serves as a tool for genome editing. Foreign nucleic acids are ...CRISPR-Cas12a (Cpf1), a type V CRISPR-associated nuclease, provides bacterial immunity against bacteriophages and plasmids but also serves as a tool for genome editing. Foreign nucleic acids are integrated into the CRISPR locus, prompting transcription of CRISPR RNAs (crRNAs) that guide Cas12a cleavage of foreign complementary DNA. However, mobile genetic elements counteract Cas12a with inhibitors, notably type V-A anti-CRISPRs (AcrVAs). We present cryoelectron microscopy structures of Cas12a-crRNA bound to AcrVA1 and AcrVA4 at 3.5 and 3.3 Å resolutions, respectively. AcrVA1 is sandwiched between the recognition (REC) and nuclease (NUC) lobes of Cas12a and inserts into the binding pocket for the protospacer-adjacent motif (PAM), a short DNA sequence guiding Cas12a targeting. AcrVA1 cleaves crRNA in a Cas12a-dependent manner, inactivating Cas12a-crRNA complexes. The AcrVA4 dimer is anchored around the crRNA pseudoknot of Cas12a-crRNA, preventing required conformational changes for crRNA-DNA heteroduplex formation. These results uncover molecular mechanisms for CRISPR-Cas12a inhibition, providing insights into bacteria-phage dynamics. | ||||||
履歴 |
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ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 293.6 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 228.6 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 834 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 876.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 48.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 72.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 0446MC ![]() 0445C ![]() 0447C ![]() 0449C ![]() 9398C ![]() 6nm9C ![]() 6nmaC ![]() 6nmdC ![]() 6nmeC ![]() 6omvC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 143750.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() | ||||
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#2: RNA鎖 | 分子量: 12879.634 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) ![]() | ||||
#3: タンパク質 | 分子量: 19650.275 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: A0A5H1ZR46*PLUS #4: 化合物 | #5: 水 | ChemComp-HOH / | |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: protein complex 3 / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 35 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 3.0b / カテゴリ: 3次元再構成 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING ONLY |
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 4.24 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 28402 / 対称性のタイプ: POINT |