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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 5o9z | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of a pre-catalytic human spliceosome primed for activation (B complex) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / Spliceosome / pre-mRNA splicing / macromolecular complex | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報microfibril / Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding ...microfibril / Lsm2-8 complex / U6 snRNA 3'-end binding / spliceosomal snRNP complex / ribonucleoprotein complex localization / U4atac snRNP / positive regulation of cytotoxic T cell differentiation / maturation of 5S rRNA / RNA localization / U4atac snRNA binding / mRNA decay by 5' to 3' exoribonuclease / Lsm1-7-Pat1 complex / U6 snRNP / box C/D sno(s)RNA binding / PH domain binding / U11/U12 snRNP / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / U7 snRNP / dense fibrillar component / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / histone pre-mRNA 3'end processing complex / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / B-WICH complex / box C/D methylation guide snoRNP complex / U4/U6 snRNP / protein localization to kinetochore / protein methylation / 7-methylguanosine cap hypermethylation / U12-type spliceosomal complex / U1 snRNP binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / methylosome / pICln-Sm protein complex / RNA splicing, via transesterification reactions / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / proline-rich region binding / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / splicing factor binding / P granule / snRNP binding / commitment complex / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / telomerase holoenzyme complex / telomerase RNA binding / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / U2-type spliceosomal complex / U4 snRNA binding / box C/D snoRNP assembly / U1 snRNP / SAGA complex / RNA Polymerase II Transcription Termination / U2 snRNP / P-body assembly / U4 snRNP / tRNA processing / U2-type prespliceosome / U3 snoRNA binding / positive regulation of transcription by RNA polymerase III / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / cyclosporin A binding / precatalytic spliceosome / rRNA modification in the nucleus and cytosol / mitotic spindle assembly checkpoint signaling / regulation of alternative mRNA splicing, via spliceosome / regulation of RNA splicing / mRNA catabolic process / mRNA Splicing - Minor Pathway / positive regulation of transcription by RNA polymerase I / spliceosomal complex assembly / MLL1 complex / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / U5 snRNP / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / U5 snRNA binding / pre-mRNA intronic binding / spliceosomal snRNP assembly / U6 snRNA binding / U2 snRNA binding / single fertilization / ribonucleoprotein complex binding / regulation of DNA repair / Cajal body / U1 snRNA binding / RNA processing / positive regulation of viral genome replication / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / catalytic step 2 spliceosome / mRNA Splicing - Major Pathway / Gene and protein expression by JAK-STAT signaling after Interleukin-12 stimulation / RNA splicing / helicase activity 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Bertram, K. / Kastner, B. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | ドイツ, 3件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2017タイトル: Cryo-EM Structure of a Pre-catalytic Human Spliceosome Primed for Activation. 著者: Karl Bertram / Dmitry E Agafonov / Olexandr Dybkov / David Haselbach / Majety N Leelaram / Cindy L Will / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Reinhard Lührmann / Holger Stark / ![]() 要旨: Little is known about the spliceosome's structure before its extensive remodeling into a catalytically active complex. Here, we report a 3D cryo-EM structure of a pre-catalytic human spliceosomal B ...Little is known about the spliceosome's structure before its extensive remodeling into a catalytically active complex. Here, we report a 3D cryo-EM structure of a pre-catalytic human spliceosomal B complex. The U2 snRNP-containing head domain is connected to the B complex main body via three main bridges. U4/U6.U5 tri-snRNP proteins, which are located in the main body, undergo significant rearrangements during tri-snRNP integration into the B complex. These include formation of a partially closed Prp8 conformation that creates, together with Dim1, a 5' splice site (ss) binding pocket, displacement of Sad1, and rearrangement of Brr2 such that it contacts its U4/U6 substrate and is poised for the subsequent spliceosome activation step. The molecular organization of several B-specific proteins suggests that they are involved in negatively regulating Brr2, positioning the U6/5'ss helix, and stabilizing the B complex structure. Our results indicate significant differences between the early activation phase of human and yeast spliceosomes. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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| PDBx/mmCIF形式 | 5o9z.cif.gz | 1.7 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb5o9z.ent.gz | 1.1 MB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 5o9z.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/o9/5o9z ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/o9/5o9z | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
-タンパク質 , 15種, 17分子 ABGIJKLMNOPQRfmXy
| #1: タンパク質 | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9 | ||
|---|---|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 109560.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029 | ||
| #7: タンパク質 | 分子量: 107092.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O94906 | ||
| #9: タンパク質 | 分子量: 37563.863 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8NAV1 | ||
| #10: タンパク質 | 分子量: 16807.346 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P83876 | ||
| #11: タンパク質 | 分子量: 52050.527 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55081 | ||
| #12: タンパク質 | 分子量: 57616.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q2TAY7 | ||
| #13: タンパク質 | 分子量: 19230.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43447, peptidylprolyl isomerase | ||
| #14: タンパク質 | 分子量: 23664.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96NC0 | ||
| #15: タンパク質 | 分子量: 14191.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P55769 | ||
| #16: タンパク質 | 分子量: 90414.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43290 | ||
| #17: タンパク質 | 分子量: 42575.801 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75554 | ||
| #18: タンパク質 | 分子量: 65731.508 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13123 | ||
| #24: タンパク質 | 分子量: 24642.131 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P14678#36: タンパク質 | | 分子量: 12427.524 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q7RTV0 |
-U5 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 CD
| #3: タンパク質 | 分子量: 244823.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75643, RNA helicase |
|---|---|
| #4: タンパク質 | 分子量: 39359.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96DI7 |
-U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein ... , 3種, 3分子 EFH
| #5: タンパク質 | 分子量: 77669.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43395 |
|---|---|
| #6: タンパク質 | 分子量: 58407.980 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43172 |
| #8: タンパク質 | 分子量: 55528.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8WWY3 |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 18分子 ahSbiTcjUdkVelWgnZ
| #19: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62316#20: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62306#21: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62304#22: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62308#23: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62318#25: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62314 |
|---|
-U6 snRNA-associated Sm-like protein ... , 7種, 7分子 opqrstu
| #26: タンパク質 | 分子量: 10847.495 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y333 |
|---|---|
| #27: タンパク質 | 分子量: 11859.390 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62310 |
| #28: タンパク質 | 分子量: 15375.775 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y4Z0 |
| #29: タンパク質 | 分子量: 9945.448 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y4Y9 |
| #30: タンパク質 | 分子量: 9139.571 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62312 |
| #31: タンパク質 | 分子量: 11617.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UK45 |
| #32: タンパク質 | 分子量: 10410.589 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O95777 |
-Splicing factor 3B subunit ... , 3種, 3分子 vwx
| #33: タンパク質 | 分子量: 146024.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75533 |
|---|---|
| #34: タンパク質 | 分子量: 135718.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15393 |
| #35: タンパク質 | 分子量: 10149.369 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BWJ5 |
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 z1
| #37: タンパク質 | 分子量: 28631.766 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P09661 |
|---|---|
| #38: タンパク質 | 分子量: 25524.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P08579 |
-RNA鎖 , 2種, 2分子 Y2
| #39: RNA鎖 | 分子量: 103979.148 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
|---|---|
| #40: RNA鎖 | 分子量: 60186.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36516 |
-Homo sapiens ... , 3種, 3分子 456
| #41: RNA鎖 | 分子量: 46528.465 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36174 |
|---|---|
| #42: RNA鎖 | 分子量: 36908.668 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 36515 |
| #43: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 161087014 |
-詳細
| Has protein modification | N |
|---|
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Human B Complex Spliceosome, sharpened map, masked refinement タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 緩衝液 | pH: 7.9 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 湿度: 80 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / アライメント法: COMA FREE |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 平均露光時間: 0.05 sec. / 電子線照射量: 1.5 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
| 画像スキャン | サンプリングサイズ: 14 µm / 横: 4096 / 縦: 4096 / 動画フレーム数/画像: 17 / 利用したフレーム数/画像: 2-17 |
-
解析
| 画像処理 | 詳細: FALCON III Direct Electron Detector |
|---|---|
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
| 3次元再構成 | 解像度: 4.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 44629 / 対称性のタイプ: POINT |
| 原子モデル構築 | 空間: REAL |
ムービー
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万見について




Homo sapiens (ヒト)
ドイツ, 3件
引用
UCSF Chimera









PDBj

















































