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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 2r1c | ||||||
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タイトル | Coordinates of the thermus thermophilus ribosome binding factor A (RbfA) homology model as fitted into the CRYO-EM map of a 30S-RBFA complex | ||||||
要素 | Ribosome-binding factor A | ||||||
キーワード | RNA BINDING PROTEIN / helix-kink-helix / KH domain / rRNA processing | ||||||
機能・相同性 | Ribosome-binding factor A / Ribosome-binding factor A domain superfamily / Ribosome-binding factor A / maturation of SSU-rRNA / K homology domain-like, alpha/beta / rRNA binding / cytoplasm / Ribosome-binding factor A 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Thermus thermophilus (バクテリア) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 12.5 Å | ||||||
データ登録者 | Datta, P.P. / Wilson, D.N. / Kawazoe, M. / Swami, N.K. / Kaminishi, T. / Sharma, M.R. / Booth, T.M. / Takemoto, C. / Fucini, P. / Yokoyama, S. / Agrawal, R.K. | ||||||
引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2007 タイトル: Structural aspects of RbfA action during small ribosomal subunit assembly. 著者: Partha P Datta / Daniel N Wilson / Masahito Kawazoe / Neil K Swami / Tatsuya Kaminishi / Manjuli R Sharma / Timothy M Booth / Chie Takemoto / Paola Fucini / Shigeyuki Yokoyama / Rajendra K Agrawal / 要旨: Ribosome binding factor A (RbfA) is a bacterial cold shock response protein, required for an efficient processing of the 5' end of the 16S ribosomal RNA (rRNA) during assembly of the small (30S) ...Ribosome binding factor A (RbfA) is a bacterial cold shock response protein, required for an efficient processing of the 5' end of the 16S ribosomal RNA (rRNA) during assembly of the small (30S) ribosomal subunit. Here we present a crystal structure of Thermus thermophilus (Tth) RbfA and a three-dimensional cryo-electron microscopic (EM) map of the Tth 30S*RbfA complex. RbfA binds to the 30S subunit in a position overlapping the binding sites of the A and P site tRNAs, and RbfA's functionally important C terminus extends toward the 5' end of the 16S rRNA. In the presence of RbfA, a portion of the 16S rRNA encompassing helix 44, which is known to be directly involved in mRNA decoding and tRNA binding, is displaced. These results shed light on the role played by RbfA during maturation of the 30S subunit, and also indicate how RbfA provides cells with a translational advantage under conditions of cold shock. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 2r1c.cif.gz | 27.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb2r1c.ent.gz | 16.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 2r1c.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 2r1c_validation.pdf.gz | 730.1 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 2r1c_full_validation.pdf.gz | 738.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | 2r1c_validation.xml.gz | 12.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 2r1c_validation.cif.gz | 15.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/r1/2r1c ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/r1/2r1c | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 10875.709 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Thermus thermophilus (バクテリア) 株: HB8 / 遺伝子: TTHA0907 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21 (DE3) / 参照: UniProt: Q5SJV1 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: THERMUS THERMOPHILUS 30S RIBOSOMAL SUBUNIT COMPLEXED WITH RBFA タイプ: RIBOSOME / 詳細: RBFA WAS BOUND TO S1-DEPLETED 30S SUBUNIT |
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緩衝液 | 名称: 20mM, Hepes-KOH (pH 7.8), 10mM Mg(OAc)2, 200mM NH4Cl, 65mM KCl pH: 7.8 詳細: 20mM, Hepes-KOH (pH 7.8), 10mM Mg(OAc)2, 200mM NH4Cl, 65mM KCl |
試料 | 濃度: 0.03 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: QUANTIFOIL HOLEY-CRBON FILM GRID |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE / 詳細: RAPID-FREEZING IN LIQUID ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2005年1月1日 / 詳細: ZEISS IMAGING SCANNER, STEP SIZE 14micro-m |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 50000 X / 倍率(補正後): 50760 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 700 nm / Cs: 2 mm |
試料ホルダ | 温度: 93 K / 傾斜角・最大: 0 ° / 傾斜角・最小: 0 ° |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
画像スキャン | デジタル画像の数: 131 |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: CTF CORRECTION OF 3D-MAPS BY WIENER FILTRATION | ||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 手法: REFERENCE BASED ALIGNMENT / 解像度: 12.5 Å / 粒子像の数: 61207 / ピクセルサイズ(実測値): 2.76 Å / 倍率補正: TMV 詳細: CROSS-CORRELATION COEFFICIENT (CCF) VALUE FOR RBFA HOMOLOGY MODEL FITTED INTO THE CORRESPONDING CRYO-EM DENSITY WAS 0.79 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL Target criteria: X-RAY COORDINATES OF T. THERMOPHILUS 30S RIBOSOMAL SUBUNIT AND THE HOMOLOGY MODEL OF T. THERMOPHILUS RBFA WERE FITTED INTO THE 12.5 ANGSTROMS RESOLUTION CRYO-EM MAP OF THE T. ...Target criteria: X-RAY COORDINATES OF T. THERMOPHILUS 30S RIBOSOMAL SUBUNIT AND THE HOMOLOGY MODEL OF T. THERMOPHILUS RBFA WERE FITTED INTO THE 12.5 ANGSTROMS RESOLUTION CRYO-EM MAP OF THE T. THERMOPHILUS 30S SUBUNIT-RBFA COMPLEX. ALL THE ATOMIC COORDINATES WERE FITTED AS RIGID BODIES 詳細: METHOD--CROSS-CORRELATION BASED MANUAL FITTING IN O REFINEMENT PROTOCOL--MULTIPLE RIGID BODY | ||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化ステップ | サイクル: LAST
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