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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7314 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of BCL10 CARD filament | |||||||||
マップデータ | Cryo-EM reconstruction of BCL10 CARD at 4A resolution | |||||||||
試料 |
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キーワード | CARD / filament / signalosome / helical reconstruction / SIGNALING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of lymphotoxin A production / polkadots / CBM complex / protein kinase B binding / antifungal innate immune response / CARD domain binding / positive regulation of mast cell cytokine production / T cell apoptotic process / B cell apoptotic process / negative regulation of mature B cell apoptotic process ...positive regulation of lymphotoxin A production / polkadots / CBM complex / protein kinase B binding / antifungal innate immune response / CARD domain binding / positive regulation of mast cell cytokine production / T cell apoptotic process / B cell apoptotic process / negative regulation of mature B cell apoptotic process / programmed cell death / positive regulation of extrinsic apoptotic signaling pathway / non-canonical NF-kappaB signal transduction / response to food / toll-like receptor signaling pathway / : / positive regulation of T cell receptor signaling pathway / cytoplasmic microtubule / general transcription initiation factor binding / immunological synapse / NF-kappaB binding / immunoglobulin mediated immune response / cellular defense response / lipopolysaccharide-mediated signaling pathway / positive regulation of phosphorylation / positive regulation of protein ubiquitination / neural tube closure / positive regulation of interleukin-8 production / Activation of NF-kappaB in B cells / protein homooligomerization / CLEC7A (Dectin-1) signaling / cellular response to mechanical stimulus / FCERI mediated NF-kB activation / positive regulation of interleukin-6 production / positive regulation of T cell activation / Downstream TCR signaling / E3 ubiquitin ligases ubiquitinate target proteins / positive regulation of NF-kappaB transcription factor activity / T cell receptor signaling pathway / protein-macromolecule adaptor activity / cellular response to lipopolysaccharide / protease binding / positive regulation of canonical NF-kappaB signal transduction / adaptive immune response / transcription coactivator activity / lysosome / positive regulation of apoptotic process / membrane raft / innate immune response / ubiquitin protein ligase binding / protein-containing complex binding / positive regulation of DNA-templated transcription / perinuclear region of cytoplasm / protein-containing complex / identical protein binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.0 Å | |||||||||
データ登録者 | David L / Li Y / Ma J / Garner E / Zhang X / Wu H | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2018 タイトル: Assembly mechanism of the CARMA1-BCL10-MALT1-TRAF6 signalosome. 著者: Liron David / Yang Li / Jun Ma / Ethan Garner / Xinzheng Zhang / Hao Wu / 要旨: The CARMA1-BCL10-MALT1 (CBM) signalosome is a central mediator of T cell receptor and B cell receptor-induced NF-κB signaling that regulates multiple lymphocyte functions. While caspase-recruitment ...The CARMA1-BCL10-MALT1 (CBM) signalosome is a central mediator of T cell receptor and B cell receptor-induced NF-κB signaling that regulates multiple lymphocyte functions. While caspase-recruitment domain (CARD) membrane-associated guanylate kinase (MAGUK) protein 1 (CARMA1) nucleates B cell lymphoma 10 (BCL10) filament formation through interactions between CARDs, mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1 (MALT1) is a paracaspase with structural similarity to caspases, which recruits TNF receptor-associated factor 6 (TRAF6) for K63-linked polyubiquitination. Here we present cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure of the BCL10 CARD filament at 4.0-Å resolution. The structure redefines CARD-CARD interactions compared with the previous EM structure determined from a negatively stained sample. Surprisingly, time-lapse confocal imaging shows that BCL10 polymerizes in a unidirectional manner. CARMA1, the BCL10 nucleator, serves as a hub for formation of star-shaped filamentous networks of BCL10 and significantly decreases the lag period of BCL10 polymerization. Cooperative MALT1 interaction with BCL10 filaments observed under EM suggests immediate dimerization of MALT1 in the BCL10 filamentous scaffold. In addition, TRAF6 cooperatively decorates CBM filaments to form higher-order assemblies, likely resulting in all-or-none activation of the downstream pathway. Collectively, these data reveal biophysical mechanisms in the assembly of the CARMA1-BCL10-MALT1-TRAF6 complex for signal transduction. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7314.map.gz | 3.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7314-v30.xml emd-7314.xml | 12.7 KB 12.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7314.png | 44.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-7314.cif.gz | 5.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7314 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7314 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7314_validation.pdf.gz | 620.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7314_full_validation.pdf.gz | 619.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7314_validation.xml.gz | 5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_7314_validation.cif.gz | 5.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7314 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7314 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7314.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 3.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Cryo-EM reconstruction of BCL10 CARD at 4A resolution | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.51 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : BCL10 CARD
全体 | 名称: BCL10 CARD |
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要素 |
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-超分子 #1: BCL10 CARD
超分子 | 名称: BCL10 CARD / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: B-cell lymphoma/leukemia 10
分子 | 名称: B-cell lymphoma/leukemia 10 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 8 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 12.614566 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: EEDLTEVKKD ALENLRVYLC EKIIAERHFD HLRAKKILSR EDTEEISCRT SSRKRAGKLL DYLQENPKGL DTLVESIRRE KTQNFLIQK ITDEVLKLRN IKLEHLK UniProtKB: B-cell lymphoma/leukemia 10 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: C-flat-1.2/1.3 4C / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 278 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III / 詳細: 5 second blotting time with force 3. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: DIRECT ELECTRON DE-16 (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 339 / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 5.0 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: -100.8 ° 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称) 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: PHENIX / ソフトウェア - 詳細: phenix refine / 使用した粒子像数: 39992 |
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Segment selection | 選択した数: 103873 / ソフトウェア - 名称: EMAN2 ソフトウェア - 詳細: EMAN2 e2helixboxer was used to select filament segments |
初期モデル | モデルのタイプ: OTHER / 詳細: Cylinder/negative stained EM model |
最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |