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- EMDB-53249: Cryo-EM structure of TTYH3 in GDN after incubation with ApoE, map2 -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-53249
タイトルCryo-EM structure of TTYH3 in GDN after incubation with ApoE, map2
マップデータTTYH3
試料
  • 複合体: TTYH3 dimer purified in GDN
    • タンパク質・ペプチド: Protein tweety homolog 3
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
キーワードMembrane protein / lipid interactions
機能・相同性
機能・相同性情報


volume-sensitive chloride channel activity / L-glutamate transmembrane transport / intracellularly calcium-gated chloride channel activity / chloride transport / chloride channel activity / chloride channel complex / Stimuli-sensing channels / monoatomic ion transmembrane transport / calcium ion binding / extracellular exosome / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Protein tweety homolog 3
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.91 Å
データ登録者Sukalskaia A / Pugnetti A / Dutzler R / Plochberger B / Weber F / Karner A
資金援助 スイス, 1件
OrganizationGrant number国
Swiss National Science Foundation スイス
引用ジャーナル: Nature / 年: 2025
タイトル: Interactions between TTYH2 and APOE facilitate endosomal lipid transfer.
著者: Anastasiia Sukalskaia / Andreas Karner / Anna Pugnetti / Florian Weber / Birgit Plochberger / Raimund Dutzler /
要旨: The Tweety homologues (TTYHs) constitute a family of eukaryotic membrane proteins that, on the basis of structural features, were recently proposed to contribute to lipid transfer between soluble ...The Tweety homologues (TTYHs) constitute a family of eukaryotic membrane proteins that, on the basis of structural features, were recently proposed to contribute to lipid transfer between soluble carriers and cellular membranes. However, in the absence of supporting data, this function was hypothetical. Here through pull-down of endogenous proteins, we identify APOE as the interaction partner of human TTYH2. Subcellular fractionation and immunocytochemistry assays showed that both proteins colocalize in endosomal compartments. Characterization of the specific interaction between APOE and TTYH2 through binding assays and structural studies enabled us to identify an epitope in an extended domain of TTYH2 that faces the endosomal lumen. Structures of complexes with APOE-containing lipoprotein particles revealed a binding mode that places lipids in a suitable position to facilitate their diffusion into the membrane. Moreover, in vitro studies revealed that lipid transfer is accelerated by TTYH2. Collectively, our findings indicate that TTYH2 has a role in the unloading of APOE-containing lipoproteins after they are endocytosed. These results define a new protein class that facilitates the extraction of lipids from and their insertion into cellular membranes. Although ubiquitous, this process could be of particular relevance in the brain, where APOE is involved in the transfer of lipids between astrocytes and neurons.
履歴
登録2025年3月25日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年5月21日-
マップ公開2025年5月21日-
更新2025年7月9日-
現状2025年7月9日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_53249.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_53249.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 40.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈TTYH3
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.3 Å/pix.
x 220 pix.
= 286.44 Å		1.3 Å/pix.
x 220 pix.
= 286.44 Å		1.3 Å/pix.
x 220 pix.
= 286.44 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.302 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.3
最小 - 最大-1.9403958 - 3.2857575
平均 (標準偏差)-0.00017912095 (±0.055201173)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ220220220
Spacing220220220
セルA=B=C: 286.44 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: TTYH3 halfmap2

ファイルemd_53249_half_map_1.map
注釈TTYH3 halfmap2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: TTYH3 halfmap1

ファイルemd_53249_half_map_2.map
注釈TTYH3 halfmap1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : TTYH3 dimer purified in GDN

全体名称: TTYH3 dimer purified in GDN
要素
  • 複合体: TTYH3 dimer purified in GDN
    • タンパク質・ペプチド: Protein tweety homolog 3
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

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超分子 #1: TTYH3 dimer purified in GDN

超分子名称: TTYH3 dimer purified in GDN / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 130 KDa

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分子 #1: Protein tweety homolog 3

分子名称: Protein tweety homolog 3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 詳細: contains C-terminal Myc-tag followed by SBP-tag / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 64.776391 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MSAGVSYAAP WWVSLLHRLP HFDLSWEATS SQFRPEDTDY QQALLLLGAA ALACLALDLL FLLFYSFWLC CRRRKSEEHL DADCCCTAW CVIIATLVCS AGIAVGFYGN GETSDGIHRA TYSLRHANRT VAGVQDRVWD TAVGLNHTAE PSLQTLERQL A GRPEPLRA ...文字列:
MSAGVSYAAP WWVSLLHRLP HFDLSWEATS SQFRPEDTDY QQALLLLGAA ALACLALDLL FLLFYSFWLC CRRRKSEEHL DADCCCTAW CVIIATLVCS AGIAVGFYGN GETSDGIHRA TYSLRHANRT VAGVQDRVWD TAVGLNHTAE PSLQTLERQL A GRPEPLRA VQRLQGLLET LLGYTAAIPF WRNTAVSLEV LAEQVDLYDW YRWLGYLGLL LLDVIICLLV LVGLIRSSKG IL VGVCLLG VLALVISWGA LGLELAVSVG SSDFCVDPDA YVTKMVEEYS VLSGDILQYY LACSPRAANP FQQKLSGSHK ALV EMQDVV AELLRTVPWE QPATKDPLLR VQEVLNGTEV NLQHLTALVD CRSLHLDYVQ ALTGFCYDGV EGLIYLALFS FVTA LMFSS IVCSVPHTWQ QKRGPDEDGE EEAAPGPRQA HDSLYRVHMP SLYSCGSSYG SETSIPAAAH TVSNAPVTEY MSQNA NFQN PRCENTPLIG RESPPPSYTS SMRAKYLATS QPRPDSSGSH ALEVLFQGPQ GTEQKLISEE DLRGASMDEK TTGWRG GHV VEGLAGELEQ LRARLEHHPQ GQREP

UniProtKB: Protein tweety homolog 3

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分子 #3: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

分子名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 4 / 式: NAG
分子量理論値: 221.208 Da
Chemical component information

ChemComp-NAG:
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / N-アセチル-β-D-グルコサミン

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度1.5 mg/mL
緩衝液pH: 7.4
構成要素:
濃度式名称
200.0 mMNaClsodium chloride
10.0 mMHepeshepes
50.0 mMGDNglycodiosgenin
グリッド材質: GOLD / メッシュ: 200
凍結凍結剤: NITROGEN / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細This sample contained TTYH3 mixed with apolipoprotein E. No complex formation between the two proteins was detected. The resulting maps display only TTYH3 density.

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 68.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.4 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正タイプ: NONE
初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.91 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 547367
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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