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- EMDB-4441: MloK1 map from single particle analysis of 2D crystals, class 1 (... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-4441
タイトルMloK1 map from single particle analysis of 2D crystals, class 1 (extended conformation)
マップデータMloK1 map from single particle analysis of 2D crystals, class 1 (extended conformation)
試料
  • 複合体: MloK1 potassium channel in lipidic bilayer of 2D crystals
    • タンパク質・ペプチド: Cyclic nucleotide-gated potassium channel mll3241
  • リガンド: POTASSIUM IONカリウム
キーワードVoltage-gated potassium channel / Cyclic nucleotide-binding domain / ion channel (イオンチャネル) / ion transport / MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質)
機能・相同性
機能・相同性情報


potassium channel activity / cAMP binding / identical protein binding / 細胞膜
類似検索 - 分子機能
Cyclic nucleotide-regulated ion channel, N-terminal / Cyclic nucleotide-binding domain signature 2. / Cyclic nucleotide-binding domain signature 1. / Cyclic nucleotide-binding, conserved site / Cyclic nucleotide-monophosphate binding domain / Cyclic nucleotide-binding domain / cAMP/cGMP binding motif profile. / Cyclic nucleotide-binding domain / Cyclic nucleotide-binding domain superfamily / RmlC-like jelly roll fold ...Cyclic nucleotide-regulated ion channel, N-terminal / Cyclic nucleotide-binding domain signature 2. / Cyclic nucleotide-binding domain signature 1. / Cyclic nucleotide-binding, conserved site / Cyclic nucleotide-monophosphate binding domain / Cyclic nucleotide-binding domain / cAMP/cGMP binding motif profile. / Cyclic nucleotide-binding domain / Cyclic nucleotide-binding domain superfamily / RmlC-like jelly roll fold / Ion transport domain / Ion transport protein
類似検索 - ドメイン・相同性
Cyclic nucleotide-gated potassium channel mll3241
類似検索 - 構成要素
生物種Mesorhizobium loti MAFF303099 (根粒菌) / Mesorhizobium japonicum (strain LMG 29417 / CECT 9101 / MAFF 303099) (根粒菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.2 Å
データ登録者Righetto R / Biyani N
資金援助 スイス, 1件
OrganizationGrant number国
Swiss National Science Foundation205320_166164 スイス
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019
タイトル: Retrieving high-resolution information from disordered 2D crystals by single-particle cryo-EM.
著者: Ricardo D Righetto / Nikhil Biyani / Julia Kowal / Mohamed Chami / Henning Stahlberg /
要旨: Electron crystallography can reveal the structure of membrane proteins within 2D crystals under close-to-native conditions. High-resolution structural information can only be reached if crystals are ...Electron crystallography can reveal the structure of membrane proteins within 2D crystals under close-to-native conditions. High-resolution structural information can only be reached if crystals are perfectly flat and highly ordered. In practice, such crystals are difficult to obtain. Available image unbending algorithms correct for disorder, but only perform well on images of non-tilted, flat crystals, while out-of-plane distortions are not addressed. Here, we present an approach that employs single-particle refinement procedures to locally unbend crystals in 3D. With this method, density maps of the MloK1 potassium channel with a resolution of 4 Å were obtained from images of 2D crystals that do not diffract beyond 10 Å. Furthermore, 3D classification allowed multiple structures to be resolved, revealing a series of MloK1 conformations within a single 2D crystal. This conformational heterogeneity explains the poor diffraction observed and is related to channel function. The approach is implemented in the FOCUS package.
履歴
登録2018年11月27日-
ヘッダ(付随情報) 公開2019年4月24日-
マップ公開2019年4月24日-
更新2024年5月15日-
現状2024年5月15日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 2.5
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 2.5
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6iax
  • 表面レベル: 2.5
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-6iax
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_4441.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_4441.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 4.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈MloK1 map from single particle analysis of 2D crystals, class 1 (extended conformation)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.3 Å
密度
表面レベル登録者による: 2.5 / ムービー #1: 2.5
最小 - 最大-5.9093347 - 7.596996
平均 (標準偏差)0.000000000015317 (±1.0)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ104104104
Spacing104104104
セルA=B=C: 135.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.31.31.3
M x/y/z104104104
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z135.200135.200135.200
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS104104104
D min/max/mean-5.9097.5970.000

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_4441_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_4441_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_4441_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : MloK1 potassium channel in lipidic bilayer of 2D crystals

全体名称: MloK1 potassium channel in lipidic bilayer of 2D crystals
要素
  • 複合体: MloK1 potassium channel in lipidic bilayer of 2D crystals
    • タンパク質・ペプチド: Cyclic nucleotide-gated potassium channel mll3241
  • リガンド: POTASSIUM IONカリウム

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超分子 #1: MloK1 potassium channel in lipidic bilayer of 2D crystals

超分子名称: MloK1 potassium channel in lipidic bilayer of 2D crystals
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1
由来(天然)生物種: Mesorhizobium loti MAFF303099 (根粒菌)
分子量理論値: 160 KDa

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分子 #1: Cyclic nucleotide-gated potassium channel mll3241

分子名称: Cyclic nucleotide-gated potassium channel mll3241 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Mesorhizobium japonicum (strain LMG 29417 / CECT 9101 / MAFF 303099) (根粒菌)
株: LMG 29417 / CECT 9101 / MAFF 303099
分子量理論値: 37.766297 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列: MSVLPFLRIY APLNAVLAAP GLLAVAALTI PDMSGRSRLA LAALLAVIWG AYLLQLAATL LKRRAGVVRD RTPKIAIDVL AVLVPLAAF LLDGSPDWSL YCAVWLLKPL RDSTFFPVLG RVLANEARNL IGVTTLFGVV LFAVALAAYV IERDIQPEKF G SIPQAMWW ...文字列:
MSVLPFLRIY APLNAVLAAP GLLAVAALTI PDMSGRSRLA LAALLAVIWG AYLLQLAATL LKRRAGVVRD RTPKIAIDVL AVLVPLAAF LLDGSPDWSL YCAVWLLKPL RDSTFFPVLG RVLANEARNL IGVTTLFGVV LFAVALAAYV IERDIQPEKF G SIPQAMWW AVVTLSTTGY GDTIPQSFAG RVLAGAVMMS GIGIFGLWAG ILATGFYQEV RRGDFVRNWQ LVAAVPLFQK LG PAVLVEI VRALRARTVP AGAVICRIGE PGDRMFFVVE GSVSVATPNP VELGPGAFFG EMALISGEPR SATVSAATTV SLL SLHSAD FQMLCSSSPE IAEIFRKTAL ERRGAAASA

UniProtKB: Cyclic nucleotide-gated potassium channel mll3241

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分子 #2: POTASSIUM ION

分子名称: POTASSIUM ION / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 2 / 式: K
分子量理論値: 39.098 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態2D array

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試料調製

緩衝液pH: 7.6
詳細: 20 mM KCl, 20 mM Tris-HCl pH 7.6, 1 mM BaCl2, 1 mM EDTA, 0.2 mM cAMP
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.3 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.75 µm / 倍率（公称値）: 50000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 実像数: 270 / 平均露光時間: 16.0 sec. / 平均電子線量: 45.0 e/Å2
詳細: The dataset of 346 movies recorded and processed for Kowal et al. (2018) 2 was employed. As reported, the data were collected on an FEI Titan Krios TEM equipped with a Gatan K2 DED. Total ...詳細: The dataset of 346 movies recorded and processed for Kowal et al. (2018) 2 was employed. As reported, the data were collected on an FEI Titan Krios TEM equipped with a Gatan K2 DED. Total dose: 40 e-/A^2 distributed over 40 movie frames. Pixel size: 1.3 A on the sample level (counting mode). Nominal tilt range: -55 to +55 degrees.
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 231688
詳細: The particle positions were given by the cross-correlation profile generated by the classical unbending algorithm.
初期モデルモデルのタイプ: OTHER
詳細: An initial model was generated using the tilt geometry determined by the classical 2D electron crystallography approach.
初期 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: FOCUS
詳細: An initial model was generated using the tilt geometry determined by the classical 2D electron crystallography approach.
最終 3次元分類クラス数: 8 / 平均メンバー数/クラス: 28961 / ソフトウェア - 名称: FREALIGN (ver. 9.11)
最終 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: FREALIGN (ver. 9.11)
最終 再構成使用したクラス数: 1 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: FREALIGN (ver. 9.11)
詳細: Resolution estimated based on FSC between spherically-masked half-maps with a soft edge, with the FSC normalized to an expected volume corresponding to a molecular weight of 160 kDa.
使用した粒子像数: 27849
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

6i9d


Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
詳細The consensus model was flexibily fit in to the EM map of this class using Normal Mode Analysis with iMODFIT, and then real-space refined using PHENIX.
精密化プロトコル: FLEXIBLE FIT
得られたモデル

PDB-6iax:
MloK1 model from single particle analysis of 2D crystals, class 1 (extended conformation)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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