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万見
- EMDB-31552: Cryo-EM structure of the nonameric SsaV cytosolic domain with C9 ... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-31552
タイトルCryo-EM structure of the nonameric SsaV cytosolic domain with C9 symmetry
マップデータ
試料
  • 細胞器官・細胞要素: export gate protein of type III secretion system
    • タンパク質・ペプチド: Secretion system apparatus protein SsaV
キーワードtransporter / PROTEIN TRANSPORT
機能・相同性
機能・相同性情報


protein secretion / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Type III secretion protein HrcV / FHIPEP, domain 1 / FHIPEP conserved site / Bacterial export FHIPEP family signature. / Type III secretion system FHIPEP / FHIPEP, domain 3 / FHIPEP, domain 4 / FHIPEP family
類似検索 - ドメイン・相同性
Secretion system apparatus protein SsaV
類似検索 - 構成要素
生物種Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium str. LT2 (サルモネラ菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.64 Å
データ登録者Xu JH / Zhang YQ
資金援助 中国, 1件
OrganizationGrant number国
Ministry of Science and Technology (MoST, China) 中国
引用ジャーナル: Microbiol Spectr / 年: 2021
タイトル: Structural and Functional Analysis of SsaV Cytoplasmic Domain and Variable Linker States in the Context of the InvA-SsaV Chimeric Protein.
著者: Jinghua Xu / Jiuqing Wang / Aijun Liu / Yanqing Zhang / Xiang Gao /
要旨: The type III secretion (T3S) injectisome is a syringe-like protein-delivery nanomachine widely utilized by Gram-negative bacteria. It can deliver effector proteins directly from bacteria into ...The type III secretion (T3S) injectisome is a syringe-like protein-delivery nanomachine widely utilized by Gram-negative bacteria. It can deliver effector proteins directly from bacteria into eukaryotic host cells, which is crucial for the bacterial-host interaction. Intracellular pathogen Salmonella enterica serovar Typhimurium encodes two sets of T3S injectisomes from Salmonella pathogenicity islands 1 and 2 (SPI-1 and SPI-2), which are critical for its host invasion and intracellular survival, respectively. The inner membrane export gate protein, SctV (InvA in SPI-1 and SsaV in SPI-2), is the largest component of the injectisome and is essential for assembly and function of T3SS. Here, we report the 2.11 Å cryo-EM structure of the SsaV cytoplasmic domain (SsaV) in the context of a full-length SctV chimera consisting of the transmembrane region of InvA, the linker of SsaV (SsaV) and SsaV. The structural analysis shows that SsaV exists in a semi-open state and SsaV exhibits two major orientations, implying a highly dynamic process of SsaV for the substrate selection and secretion in a full-length context. A biochemical assay indicates that SsaV plays an essential role in maintaining the nonameric state of SsaV. This study offers near atomic-level insights into how SsaV and SsaV facilitate the assembly and function of SsaV and may lead to the development of potential anti-virulence therapeutics against T3SS-mediated bacterial infection. Type III secretion system (T3SS) is a multicomponent nanomachine and a critical virulence factor for a wide range of Gram-negative bacterial pathogens. It can deliver numbers of effectors into the host cell to facilitate the bacterial host infection. Export gate protein SctV, as one of the engines of T3SS, is at the center of T3SS assembly and function. In this study, we show the high-resolution atomic structure of the cytosolic domain of SctV in the nonameric state with variable linker conformations. Our first observation of conformational changes of the linker region of SctV and the semi-open state of the cytosolic domain of SctV in the full-length context further support that the substrate selection and secretion process of SctV is highly dynamic. These findings have important implications for the development of therapeutic strategies targeting SctV to combat T3SS-mediated bacterial infection.
履歴
登録2021年7月19日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年2月16日-
マップ公開2022年2月16日-
更新2024年6月12日-
現状2024年6月12日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-7fec
  • 表面レベル: 0.3
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-7fec
  • Jmolによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_31552.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_31552.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.8433 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.3 / ムービー #1: 0.3
最小 - 最大-2.0681324 - 3.2507977
平均 (標準偏差)-0.000039395487 (±0.06314751)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ400400400
Spacing400400400
セルA=B=C: 337.32 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z0.84330.84330.8433
M x/y/z400400400
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z337.320337.320337.320
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ535455
NX/NY/NZ134138134
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS400400400
D min/max/mean-2.0683.251-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : export gate protein of type III secretion system

全体名称: export gate protein of type III secretion system
要素
  • 細胞器官・細胞要素: export gate protein of type III secretion system
    • タンパク質・ペプチド: Secretion system apparatus protein SsaV

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超分子 #1: export gate protein of type III secretion system

超分子名称: export gate protein of type III secretion system / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium str. LT2 (サルモネラ菌)

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分子 #1: Secretion system apparatus protein SsaV

分子名称: Secretion system apparatus protein SsaV / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 9 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium str. LT2 (サルモネラ菌)
株: LT2
分子量理論値: 38.12418 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
配列文字列: MVPGACPLIL RLSPTLHSAD LIRDIDAMRW FLFEDTGVPL PEVNIEVLPE PTEKLTVLLY QEPVFSLSIP AQADYLLIGA DASVVGDSQ TLPNGMGQIC WLTKDMAHKA QGFGLDVFAG SQRISALLKC VLLRHMGEFI GVQETRYLMN AMEKNYSELV K ELQRQLPI ...文字列:
MVPGACPLIL RLSPTLHSAD LIRDIDAMRW FLFEDTGVPL PEVNIEVLPE PTEKLTVLLY QEPVFSLSIP AQADYLLIGA DASVVGDSQ TLPNGMGQIC WLTKDMAHKA QGFGLDVFAG SQRISALLKC VLLRHMGEFI GVQETRYLMN AMEKNYSELV K ELQRQLPI NKIAETLQRL VSERVSIRDL RLIFGTLIDW APREKDVLML TEYVRIALRR HILRRLNPEG KPLPILRIGE GI ENLVRES IRQTAMGTYT ALSSRHKTQI LQLIEQALKQ SAKLFIVTSV DTRRFLRKIT EATLFDVPIL SWQELGEESL IQV VESIDL SEEELADNEE

UniProtKB: Secretion system apparatus protein SsaV

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 8
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.64 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 90916
初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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