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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2603 | |||||||||
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タイトル | Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with CrPV-IRES | |||||||||
マップデータ | Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with CrPV-IRES in a partially rotated configuration | |||||||||
試料 |
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キーワード | translation.ribosome / eukaryote / initiaction | |||||||||
生物種 | Kluyveromyces lactis (酵母) / Cricket paralysis virus (ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Fernandez IS / Bai X / Scheres SHW / Ramakrishnan V | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2014 タイトル: Initiation of translation by cricket paralysis virus IRES requires its translocation in the ribosome. 著者: Israel S Fernández / Xiao-Chen Bai / Garib Murshudov / Sjors H W Scheres / V Ramakrishnan / 要旨: The cricket paralysis virus internal ribosome entry site (CrPV-IRES) is a folded structure in a viral mRNA that allows initiation of translation in the absence of any host initiation factors. By ...The cricket paralysis virus internal ribosome entry site (CrPV-IRES) is a folded structure in a viral mRNA that allows initiation of translation in the absence of any host initiation factors. By using recent advances in single-particle electron cryomicroscopy, we have solved the structure of CrPV-IRES bound to the ribosome of the yeast Kluyveromyces lactis in both the canonical and rotated states at overall resolutions of 3.7 and 3.8 Å, respectively. In both states, the pseudoknot PKI of the CrPV-IRES mimics a tRNA/mRNA interaction in the decoding center of the A site of the 40S ribosomal subunit. The structure and accompanying factor-binding data show that CrPV-IRES binding mimics a pretranslocation rather than initiation state of the ribosome. Translocation of the IRES by elongation factor 2 (eEF2) is required to bring the first codon of the mRNA into the A site and to allow the start of translation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2603.map.gz | 20.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2603-v30.xml emd-2603.xml | 11.7 KB 11.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_2603.png | 351.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2603 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2603 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2603_validation.pdf.gz | 272.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2603_full_validation.pdf.gz | 271.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2603_validation.xml.gz | 6.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2603 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2603 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2603.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 122.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with CrPV-IRES in a partially rotated configuration | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.34 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with CrPV-IRES
全体 | 名称: Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with CrPV-IRES |
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要素 |
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-超分子 #1000: Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with CrPV-IRES
超分子 | 名称: Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with CrPV-IRES タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 実験値: 3.8 MDa / 理論値: 3.8 MDa / 手法: Sedimentation |
-超分子 #1: Kluyveromyces lactis 80S ribosome
超分子 | 名称: Kluyveromyces lactis 80S ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: Kluyveromyces lactis 80S ribosome / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-eukaryote: ALL |
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由来(天然) | 生物種: Kluyveromyces lactis (酵母) / 株: Kluyveromyces lactis / 別称: Kluyveromyces lactis / 組織: Kluyveromyces lactis / 細胞: Kluyveromyces lactis / Organelle: Kluyveromyces lactis / 細胞中の位置: Kluyveromyces lactis |
分子量 | 実験値: 3.2 MDa / 理論値: 3.2 MDa |
-分子 #1: CrPV-IRES
分子 | 名称: CrPV-IRES / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Cricket paralysis virus (ウイルス) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.1 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 6.5 詳細: 10mM MES-KOH, 40mM K-acetate, 10mM NH4-acetated, 8mM Mg-acetate, 2mM DTT |
グリッド | 詳細: 400mesh R2/2 Quantifoil grids |
凍結 | 凍結剤: PROPANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 120 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I / Timed resolved state: 30 second incubation time / 手法: 2.5 seconds blot |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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日付 | 2013年7月7日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 実像数: 1900 / 平均電子線量: 40 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.003 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.0018 µm / 倍率(公称値): 47000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Sample movement corrected as implemented in Relion |
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CTF補正 | 詳細: Each particle |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Relion / 使用した粒子像数: 28421 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: 3u5b |
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ソフトウェア | 名称: Chimera, refmac |
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 60 / 当てはまり具合の基準: R-factor, FSC |
得られたモデル | PDB-4v92: |
-原子モデル構築 2
初期モデル | PDB ID: 3u5d |
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ソフトウェア | 名称: Chimera, refmac |
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 60 / 当てはまり具合の基準: R-factor, FSC |
得られたモデル | PDB-4v92: |
-原子モデル構築 3
初期モデル | PDB ID: 3u5c |
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ソフトウェア | 名称: Chimera, refmac |
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 60 / 当てはまり具合の基準: R-factor, FSC |
得られたモデル | PDB-4v92: |