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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23834 | |||||||||
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タイトル | T4GALA Engineered Protein Nanocage | |||||||||
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![]() | Encapsulin / Nanocage / Nanocompartment / VIRUS LIKE PARTICLE | |||||||||
機能・相同性 | Type 1 encapsulin shell protein / Encapsulating protein for peroxidase / encapsulin nanocompartment / iron ion transport / intracellular iron ion homeostasis / Type 1 encapsulin shell protein![]() | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.57 Å | |||||||||
![]() | Andreas MP / Jones JA | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Triggered Reversible Disassembly of an Engineered Protein Nanocage*. 著者: Jesse A Jones / Ajitha S Cristie-David / Michael P Andreas / Tobias W Giessen / ![]() 要旨: Protein nanocages play crucial roles in sub-cellular compartmentalization and spatial control in all domains of life and have been used as biomolecular tools for applications in biocatalysis, drug ...Protein nanocages play crucial roles in sub-cellular compartmentalization and spatial control in all domains of life and have been used as biomolecular tools for applications in biocatalysis, drug delivery, and bionanotechnology. The ability to control their assembly state under physiological conditions would further expand their practical utility. To gain such control, we introduced a peptide capable of triggering conformational change at a key structural position in the largest known encapsulin nanocompartment. We report the structure of the resulting engineered nanocage and demonstrate its ability to disassemble and reassemble on demand under physiological conditions. We demonstrate its capacity for in vivo encapsulation of proteins of choice while also demonstrating in vitro cargo loading capabilities. Our results represent a functionally robust addition to the nanocage toolbox and a novel approach for controlling protein nanocage disassembly and reassembly under mild conditions. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 306.8 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 13.5 KB 13.5 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 92.2 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 5.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 716.1 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 715.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 7.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 8.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.40318 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : T4GALA Engineered Protein Nanocage
全体 | 名称: T4GALA Engineered Protein Nanocage |
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要素 |
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-超分子 #1: T4GALA Engineered Protein Nanocage
超分子 | 名称: T4GALA Engineered Protein Nanocage / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: T4GALA Engineered Protein Nanocage
分子 | 名称: T4GALA Engineered Protein Nanocage / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 詳細: Amino Acids 58-83: synthetic GALA peptide insertion; Amino Acids 305-310: Linker; Amino Acids 311-316: Affinity Tag コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 35.290652 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MNKSQLYPDS PLTDQDFNQL DQTVIEAARR QLVGRRFIEL YGPLGRGMQS VFNDIFMESH EGGGEALAEA LAEALAEALA GGGAKMDFQ GSFDTEVESS RRVNYTIPML YKDFVLYWRD LEQSKALDIP IDFSVAANAA RDVAFLEDQM IFHGSKEFDI P GLMNVKGR ...文字列: MNKSQLYPDS PLTDQDFNQL DQTVIEAARR QLVGRRFIEL YGPLGRGMQS VFNDIFMESH EGGGEALAEA LAEALAEALA GGGAKMDFQ GSFDTEVESS RRVNYTIPML YKDFVLYWRD LEQSKALDIP IDFSVAANAA RDVAFLEDQM IFHGSKEFDI P GLMNVKGR LTHLIGNWYE SGNAFQDIVE ARNKLLEMNH NGPYALVLSP ELYSLLHRVH KDTNVLEIEH VRELITAGVF QS PVLKGKS GVIVNTGRNN LDLAISEDFE TAYLGEEGMN HPFRVYETVV LRIKRPAAIC TLIDPEEGGG GGGHHHHHH UniProtKB: Type 1 encapsulin shell protein |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.76 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 詳細: 60 seconds, 5 mA | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 詳細: Blot force: 20 Blot time: 4 seconds Wait time: 0 seconds. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS GLACIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1259 / 平均露光時間: 8.0 sec. / 平均電子線量: 62.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): -1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): -1.3 µm / 倍率(公称値): 45000 |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
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画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: PDB ENTRY PDBモデル - PDB ID: |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: I (正20面体型対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.57 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.15.00) / ソフトウェア - 詳細: Homogenous Refinement / 使用した粒子像数: 6707 |
初期 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.15.00) |
最終 角度割当 | タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.15.00) |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model |
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詳細 | Model was initially docked in Chimera using Fit to Map command. Chains were manually refined in Coot with rigid body refinement, chain refinement, and iterative real space refinements. ASU was then refined using phenix.real_space_refine with default parameters. NCS operators were applied and refined again with NCS contstraints, global minimization, and ADP refinement. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 81.22 / 当てはまり具合の基準: Correlation Coefficient |
得られたモデル | ![]() PDB-7mh2: |