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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-18191 | ||||||||||||||||||
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タイトル | X. laevis CMG dimer bound to dimeric DONSON - without ATPase | ||||||||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | DNA replication initiation / Xenopus egg extract / primordial dwarfism / replicative helicase / genome stability / REPLICATION | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 GINS complex / premeiotic DNA replication / CMG complex / MCM complex / mitotic DNA replication checkpoint signaling / replisome / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / single-stranded DNA helicase activity / regulation of DNA-templated DNA replication initiation ...GINS complex / premeiotic DNA replication / CMG complex / MCM complex / mitotic DNA replication checkpoint signaling / replisome / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / single-stranded DNA helicase activity / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / DNA strand elongation involved in DNA replication / DNA unwinding involved in DNA replication / replication fork processing / mitotic G2 DNA damage checkpoint signaling / DNA replication origin binding / DNA replication initiation / DNA helicase activity / DNA damage checkpoint signaling / regulation of DNA-templated transcription elongation / replication fork / helicase activity / DNA-templated DNA replication / single-stranded DNA binding / DNA helicase / DNA replication / cell division / chromatin binding / chromatin / ATP hydrolysis activity / DNA binding / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Xenopus laevis (アフリカツメガエル) | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.14 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Cvetkovic MA / Costa A | ||||||||||||||||||
資金援助 | 英国, European Union, 5件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2023 タイトル: The structural mechanism of dimeric DONSON in replicative helicase activation. 著者: Milos A Cvetkovic / Paolo Passaretti / Agata Butryn / Alicja Reynolds-Winczura / Georgia Kingsley / Aggeliki Skagia / Cyntia Fernandez-Cuesta / Divyasree Poovathumkadavil / Roger George / ...著者: Milos A Cvetkovic / Paolo Passaretti / Agata Butryn / Alicja Reynolds-Winczura / Georgia Kingsley / Aggeliki Skagia / Cyntia Fernandez-Cuesta / Divyasree Poovathumkadavil / Roger George / Anoop S Chauhan / Satpal S Jhujh / Grant S Stewart / Agnieszka Gambus / Alessandro Costa / 要旨: The MCM motor of the replicative helicase is loaded onto origin DNA as an inactive double hexamer before replication initiation. Recruitment of activators GINS and Cdc45 upon S-phase transition ...The MCM motor of the replicative helicase is loaded onto origin DNA as an inactive double hexamer before replication initiation. Recruitment of activators GINS and Cdc45 upon S-phase transition promotes the assembly of two active CMG helicases. Although work with yeast established the mechanism for origin activation, how CMG is formed in higher eukaryotes is poorly understood. Metazoan Downstream neighbor of Son (DONSON) has recently been shown to deliver GINS to MCM during CMG assembly. What impact this has on the MCM double hexamer is unknown. Here, we used cryoelectron microscopy (cryo-EM) on proteins isolated from replicating Xenopus egg extracts to identify a double CMG complex bridged by a DONSON dimer. We find that tethering elements mediating complex formation are essential for replication. DONSON reconfigures the MCM motors in the double CMG, and primordial dwarfism patients' mutations disrupting DONSON dimerization affect GINS and MCM engagement in human cells and DNA synthesis in Xenopus egg extracts. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_18191.map.gz | 567.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-18191-v30.xml emd-18191.xml | 31 KB 31 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_18191_fsc.xml | 17.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_18191.png | 93.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-18191.cif.gz | 10.1 KB | ||
その他 | emd_18191_half_map_1.map.gz emd_18191_half_map_2.map.gz | 557.3 MB 557.3 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18191 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18191 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_18191_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_18191_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_18191_validation.xml.gz | 27.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_18191_validation.cif.gz | 35.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18191 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18191 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_18191.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 600.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.95 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_18191_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_18191_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : X. laevis CMG dimer bound to dimeric DONSON
+超分子 #1: X. laevis CMG dimer bound to dimeric DONSON
+分子 #1: DNA replication licensing factor mcm2
+分子 #2: Maternal DNA replication licensing factor mcm3
+分子 #3: DNA replication licensing factor mcm4-B
+分子 #4: DNA replication licensing factor mcm5-A
+分子 #5: Maternal DNA replication licensing factor mcm6
+分子 #6: DNA replication licensing factor mcm7-B
+分子 #7: DNA replication complex GINS protein PSF1
+分子 #8: DNA replication complex GINS protein PSF2
+分子 #9: DNA replication complex GINS protein PSF3
+分子 #10: Cell division control protein 45 homolog
+分子 #11: DNA replication complex GINS protein SLD5
+分子 #12: Protein downstream neighbor of son homolog
+分子 #13: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 33.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.3 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |