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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of yeast Elp456 subcomplex | |||||||||
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![]() | wobble uridine modification / TRANSLATION | |||||||||
機能・相同性 | ![]() elongator holoenzyme complex / protein urmylation / tRNA wobble uridine modification / tRNA modification / transcription elongation factor complex / regulation of translation / tRNA binding / regulation of transcription by RNA polymerase II / nucleoplasm / identical protein binding ...elongator holoenzyme complex / protein urmylation / tRNA wobble uridine modification / tRNA modification / transcription elongation factor complex / regulation of translation / tRNA binding / regulation of transcription by RNA polymerase II / nucleoplasm / identical protein binding / nucleus / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.7 Å | |||||||||
![]() | Jaciuk M / Scherf D / Kaszuba K / Gaik M / Koscielniak A / Krutyholowa R / Rawski M / Indyka P / Biela A / Dobosz D ...Jaciuk M / Scherf D / Kaszuba K / Gaik M / Koscielniak A / Krutyholowa R / Rawski M / Indyka P / Biela A / Dobosz D / Lin T-Y / Abbassi N / Hammermeister A / Chramiec-Glabik A / Kosinski J / Schaffrath R / Glatt S | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structure of the fully assembled Elongator complex. 著者: Marcin Jaciuk / David Scherf / Karol Kaszuba / Monika Gaik / Alexander Rau / Anna Kościelniak / Rościsław Krutyhołowa / Michał Rawski / Paulina Indyka / Andrea Graziadei / Andrzej ...著者: Marcin Jaciuk / David Scherf / Karol Kaszuba / Monika Gaik / Alexander Rau / Anna Kościelniak / Rościsław Krutyhołowa / Michał Rawski / Paulina Indyka / Andrea Graziadei / Andrzej Chramiec-Głąbik / Anna Biela / Dominika Dobosz / Ting-Yu Lin / Nour-El-Hana Abbassi / Alexander Hammermeister / Juri Rappsilber / Jan Kosinski / Raffael Schaffrath / Sebastian Glatt / ![]() ![]() ![]() 要旨: Transfer RNA (tRNA) molecules are essential to decode messenger RNA codons during protein synthesis. All known tRNAs are heavily modified at multiple positions through post-transcriptional addition ...Transfer RNA (tRNA) molecules are essential to decode messenger RNA codons during protein synthesis. All known tRNAs are heavily modified at multiple positions through post-transcriptional addition of chemical groups. Modifications in the tRNA anticodons are directly influencing ribosome decoding and dynamics during translation elongation and are crucial for maintaining proteome integrity. In eukaryotes, wobble uridines are modified by Elongator, a large and highly conserved macromolecular complex. Elongator consists of two subcomplexes, namely Elp123 containing the enzymatically active Elp3 subunit and the associated Elp456 hetero-hexamer. The structure of the fully assembled complex and the function of the Elp456 subcomplex have remained elusive. Here, we show the cryo-electron microscopy structure of yeast Elongator at an overall resolution of 4.3 Å. We validate the obtained structure by complementary mutational analyses in vitro and in vivo. In addition, we determined various structures of the murine Elongator complex, including the fully assembled mouse Elongator complex at 5.9 Å resolution. Our results confirm the structural conservation of Elongator and its intermediates among eukaryotes. Furthermore, we complement our analyses with the biochemical characterization of the assembled human Elongator. Our results provide the molecular basis for the assembly of Elongator and its tRNA modification activity in eukaryotes. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 7.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 23.7 KB 23.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 11.4 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 135.3 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 7.3 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 104.7 MB 104.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 630.8 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 630.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 18.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 24.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_15635_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_15635_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Yeast Elp456 subcomplex
全体 | 名称: Yeast Elp456 subcomplex |
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要素 |
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-超分子 #1: Yeast Elp456 subcomplex
超分子 | 名称: Yeast Elp456 subcomplex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 233.8 KDa |
-分子 #1: Elongator complex protein 4
分子 | 名称: Elongator complex protein 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 51.232469 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MSFRKRGEIL NDRGSGLRGP LLRGPPRTSS TPLRTGNRRA PGNVPLSDTT ARLKKLNIAD ESKTKMGLDS SHVGVRPSPA TSQPTTSTG SADLDSILGH MGLPLGNSVL VEEQSTTEFH SILGKLFAAQ GIVHNRISDS SADKTRNGDT HVIVLSLNQM F AKELPGIY ...文字列: MSFRKRGEIL NDRGSGLRGP LLRGPPRTSS TPLRTGNRRA PGNVPLSDTT ARLKKLNIAD ESKTKMGLDS SHVGVRPSPA TSQPTTSTG SADLDSILGH MGLPLGNSVL VEEQSTTEFH SILGKLFAAQ GIVHNRISDS SADKTRNGDT HVIVLSLNQM F AKELPGIY KGSRKQMKKN LISEEESKVT VQNLNETQRS TPSRYKDLKI AWKYKLADEK RLGSPDRDDI QQNSEYKDYN HQ FDITTRL MPAPIASELT FIAPTQPVST ILSQIEQTIK RNDKKLIRIV IPSLLHPAMY PPKMFESSEI IGLMHGVRSL VKK YYERVV LFASISIDII TPPLLVLLRN MFDSVINLEP FNQEMTEFLE RVYKSQPGKI QHGLVHILKL PVFTDRGEMR VLKS EWAFK NGRKKFEIEQ WGIPVDDAEG SAASEQSHSH SHSDEISHNI PAKKTKISLD Y UniProtKB: Elongator complex protein 4 |
-分子 #2: Elongator complex protein 5
分子 | 名称: Elongator complex protein 5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 35.252496 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MASSSHNPVI LLKRILSLTE SSPFILCLDS IAQTSYKLIQ EFVHQSKSKG NEYPIVYISF ETVNKPSYCT QFIDATQMDF VHLVKQIIS YLPAATATQA KKHMVIIDSL NYISTEYITR FLSEIASPHC TMVATYHKDI KDENRTVIPD WNNNYPDKLT L LQFMATTI ...文字列: MASSSHNPVI LLKRILSLTE SSPFILCLDS IAQTSYKLIQ EFVHQSKSKG NEYPIVYISF ETVNKPSYCT QFIDATQMDF VHLVKQIIS YLPAATATQA KKHMVIIDSL NYISTEYITR FLSEIASPHC TMVATYHKDI KDENRTVIPD WNNNYPDKLT L LQFMATTI VDIDVVLTGT LDTEEVSELL NEFRIPRGLN NDIFQLRLVN KRKSGRSLEY DFIVNSNTHE YELLSTTKQE EE SSSNGLE TPEMLQGLTT FNLGTSNKQK LAKDQVALPF LEAQSFGQGG AIVYEYEKDD DYDEEDPYED PF UniProtKB: Elongator complex protein 5 |
-分子 #3: Elongator complex protein 6
分子 | 名称: Elongator complex protein 6 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 30.602611 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MGSVQRQDLV LFSDQSVLPA HFFQDSNSHN LFFITHQSCT QPLWMINALV ETHVLGSPSS LNESSSSMLP SSTRSHAVLA SFIHEQNYF TNSLNKLKIP SNNYNVLDFL SDFIVNNIHN KPRDKILSDV LAKFSAAIQN NPTDTIVIIE QPELLLSLVS G LTCSELNN ...文字列: MGSVQRQDLV LFSDQSVLPA HFFQDSNSHN LFFITHQSCT QPLWMINALV ETHVLGSPSS LNESSSSMLP SSTRSHAVLA SFIHEQNYF TNSLNKLKIP SNNYNVLDFL SDFIVNNIHN KPRDKILSDV LAKFSAAIQN NPTDTIVIIE QPELLLSLVS G LTCSELNN KFITPLLRQC KVLIIVSNSD IFNIDEYDAS VHSSNLQNFY KSSFIKSMIN LNLNPLKTGF AKDVTGSLHV CR GGAPIAT SNTSLHVVEN EYLYLNEKES TKLFYR UniProtKB: Elongator complex protein 6 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.4 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 15 s wait time, blot force 5, 5 s blot time. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | TFS KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 実像数: 4716 / 平均露光時間: 1.82 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.9 µm / 倍率(公称値): 81000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |