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万見
- EMDB-19836: Human pseudouridine synthase 3 (wild type) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-19836
タイトルHuman pseudouridine synthase 3 (wild type)
マップデータ
試料
  • 複合体: Homodimer of human PUS3 (Wild type)
    • タンパク質・ペプチド: Pseudouridine synthase 3 homodimer
キーワードRNA modification / pseudouridylation / tRNA / homodimer / RNA BINDING PROTEIN
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.02 Å
データ登録者Lin T-Y / Glatt S
資金援助 ポーランド, European Union, スイス, 3件
OrganizationGrant number国
Polish National Science Centre2019/35/D/NZ1/02397 ポーランド
European Research Council (ERC)101001394European Union
Swiss National Science Foundation310030_184947 スイス
引用ジャーナル: Mol Cell / 年: 2024
タイトル: The molecular basis of tRNA selectivity by human pseudouridine synthase 3.
著者: Ting-Yu Lin / Leon Kleemann / Jakub Jeżowski / Dominika Dobosz / Michał Rawski / Paulina Indyka / Grzegorz Ważny / Rahul Mehta / Andrzej Chramiec-Głąbik / Łukasz Koziej / Tristan Ranff ...著者: Ting-Yu Lin / Leon Kleemann / Jakub Jeżowski / Dominika Dobosz / Michał Rawski / Paulina Indyka / Grzegorz Ważny / Rahul Mehta / Andrzej Chramiec-Głąbik / Łukasz Koziej / Tristan Ranff / Christian Fufezan / Mateusz Wawro / Jakub Kochan / Joanna Bereta / Sebastian A Leidel / Sebastian Glatt /
要旨: Pseudouridine (Ψ), the isomer of uridine, is ubiquitously found in RNA, including tRNA, rRNA, and mRNA. Human pseudouridine synthase 3 (PUS3) catalyzes pseudouridylation of position 38/39 in tRNAs. ...Pseudouridine (Ψ), the isomer of uridine, is ubiquitously found in RNA, including tRNA, rRNA, and mRNA. Human pseudouridine synthase 3 (PUS3) catalyzes pseudouridylation of position 38/39 in tRNAs. However, the molecular mechanisms by which it recognizes its RNA targets and achieves site specificity remain elusive. Here, we determine single-particle cryo-EM structures of PUS3 in its apo form and bound to three tRNAs, showing how the symmetric PUS3 homodimer recognizes tRNAs and positions the target uridine next to its active site. Structure-guided and patient-derived mutations validate our structural findings in complementary biochemical assays. Furthermore, we deleted PUS1 and PUS3 in HEK293 cells and mapped transcriptome-wide Ψ sites by Pseudo-seq. Although PUS1-dependent sites were detectable in tRNA and mRNA, we found no evidence that human PUS3 modifies mRNAs. Our work provides the molecular basis for PUS3-mediated tRNA modification in humans and explains how its tRNA modification activity is linked to intellectual disabilities.
履歴
登録2024年3月12日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年7月10日-
マップ公開2024年7月10日-
更新2024年7月24日-
現状2024年7月24日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_19836.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_19836.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.86 Å/pix.
x 320 pix.
= 275.2 Å		0.86 Å/pix.
x 320 pix.
= 275.2 Å		0.86 Å/pix.
x 320 pix.
= 275.2 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.86 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.1
最小 - 最大-0.11345189 - 0.32433438
平均 (標準偏差)0.00029942783 (±0.0075142207)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 275.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_19836_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_19836_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Homodimer of human PUS3 (Wild type)

全体名称: Homodimer of human PUS3 (Wild type)
要素
  • 複合体: Homodimer of human PUS3 (Wild type)
    • タンパク質・ペプチド: Pseudouridine synthase 3 homodimer

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超分子 #1: Homodimer of human PUS3 (Wild type)

超分子名称: Homodimer of human PUS3 (Wild type) / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 110 KDa

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分子 #1: Pseudouridine synthase 3 homodimer

分子名称: Pseudouridine synthase 3 homodimer / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 詳細: wild type / 光学異性体: LEVO / EC番号: tRNA pseudouridine38/39 synthase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
配列文字列: MAYNDTDRNQ TEKLLKRVRE LEQEVQRLKK EQAKNKEDSN IRENSAGAGK TKRAFDFSAH GRRHVALRIA YMGWGYQGFA SQENTNNTI EEKLFEALTK TRLVESRQTS NYHRCGRTDK GVSAFGQVIS LDLRSQFPRG RDSEDFNVKE EANAAAEEIR Y THILNRVL ...文字列:
MAYNDTDRNQ TEKLLKRVRE LEQEVQRLKK EQAKNKEDSN IRENSAGAGK TKRAFDFSAH GRRHVALRIA YMGWGYQGFA SQENTNNTI EEKLFEALTK TRLVESRQTS NYHRCGRTDK GVSAFGQVIS LDLRSQFPRG RDSEDFNVKE EANAAAEEIR Y THILNRVL PPDIRILAWA PVEPSFSARF SCLERTYRYF FPRADLDIVT MDYAAQKYVG THDFRNLCKM DVANGVINFQ RT ILSAQVQ LVGQSPGEGR WQEPFQLCQF EVTGQAFLYH QVRCMMAILF LIGQGMEKPE IIDELLNIEK NPQKPQYSMA VEF PLVLYD CKFENVKWIY DQEAQEFNIT HLQQLWANHA VKTHMLYSML QGLDTVPVPC GIGPKMDGMT EWGNVKPSVI KQTS AFVEG VKMRTYKPLM DRPKCQGLES RIQHFVRRGR IEHPHLFHEE ETKAKRDCND TLEEENTNLE TPTKRVCVDT EIKSI I

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.3 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
グリッドモデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 11944 / 平均電子線量: 40.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.9 µm / 倍率（公称値）: 105000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 4675232
初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C2 (2回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.02 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.1) / 使用した粒子像数: 85422
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.1)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.1)
最終 3次元分類クラス数: 3 / 平均メンバー数/クラス: 61296 / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 4.1)
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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