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- EMDB-18040: In situ 70S ribosome of E. coli ED1a cells treated with tetracycline -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-18040
タイトルIn situ 70S ribosome of E. coli ED1a cells treated with tetracycline
マップデータ
試料
  • 複合体: Description: In situ structure of 70S ribosome of tetracycline-treated E. coli ED1a cells determined by subtomogram averaging
キーワードcryo-ET / subtomogram averaging / ribosome / 70S / E. coli / tetracycline
生物種Escherichia coli ED1a (大腸菌)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.0 Å
データ登録者Khusainov I / Romanov N / Goemans C / Turonova B / Zimmerli CE / Welsch S / Langer JD / Typas A / Beck M
資金援助 ドイツ, 1件
OrganizationGrant number国
Max Planck Society ドイツ
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: Bactericidal effect of tetracycline in E. coli strain ED1a may be associated with ribosome dysfunction.
著者: Iskander Khusainov / Natalie Romanov / Camille Goemans / Beata Turoňová / Christian E Zimmerli / Sonja Welsch / Julian D Langer / Athanasios Typas / Martin Beck /
要旨: Ribosomes translate the genetic code into proteins. Recent technical advances have facilitated in situ structural analyses of ribosome functional states inside eukaryotic cells and the minimal ...Ribosomes translate the genetic code into proteins. Recent technical advances have facilitated in situ structural analyses of ribosome functional states inside eukaryotic cells and the minimal bacterium Mycoplasma. However, such analyses of Gram-negative bacteria are lacking, despite their ribosomes being major antimicrobial drug targets. Here we compare two E. coli strains, a lab E. coli K-12 and human gut isolate E. coli ED1a, for which tetracycline exhibits bacteriostatic and bactericidal action, respectively. Using our approach for close-to-native E. coli sample preparation, we assess the two strains by cryo-ET and visualize their ribosomes at high resolution in situ. Upon tetracycline treatment, these exhibit virtually identical drug binding sites, yet the conformation distribution of ribosomal complexes differs. While K-12 retains ribosomes in a translation-competent state, tRNAs are lost in the vast majority of ED1a ribosomes. These structural findings together with the proteome-wide abundance and thermal stability assessments indicate that antibiotic responses are complex in cells and can differ between different strains of a single species, thus arguing that all relevant bacterial strains should be analyzed in situ when addressing antibiotic mode of action.
履歴
登録2023年7月27日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年6月19日-
マップ公開2024年6月19日-
更新2024年6月19日-
現状2024年6月19日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_18040.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_18040.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 33.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
3.39 Å/pix.
x 206 pix.
= 699.164 Å		3.39 Å/pix.
x 206 pix.
= 699.164 Å		3.39 Å/pix.
x 206 pix.
= 699.164 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 3.394 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.0085
最小 - 最大-0.010595983 - 0.033954818
平均 (標準偏差)0.00008518188 (±0.0017094221)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ206206206
Spacing206206206
セルA=B=C: 699.164 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_18040_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_18040_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Description: In situ structure of 70S ribosome of tetracycline-tr...

全体名称: Description: In situ structure of 70S ribosome of tetracycline-treated E. coli ED1a cells determined by subtomogram averaging
要素
  • 複合体: Description: In situ structure of 70S ribosome of tetracycline-treated E. coli ED1a cells determined by subtomogram averaging

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超分子 #1: Description: In situ structure of 70S ribosome of tetracycline-tr...

超分子名称: Description: In situ structure of 70S ribosome of tetracycline-treated E. coli ED1a cells determined by subtomogram averaging
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Escherichia coli ED1a (大腸菌)
分子量理論値: 2.5 MDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態cell

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試料調製

緩衝液pH: 6.5 / 詳細: LB medium supplemented with tetracycline, 8 ug/ml
グリッドモデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 90 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / 装置: LEICA EM GP

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 3.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 倍率（公称値）: 53000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Warp (ver. 1.0.9) / 使用したサブトモグラム数: 21818
抽出トモグラム数: 27 / 使用した粒子像数: 54000 / 参照モデル: 70S average derived from manual picking / 手法: template matching / ソフトウェア - 名称: Warp (ver. 1.0.9)
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1.3)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1.3)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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