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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7o4l | ||||||||||||||||||
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タイトル | Yeast TFIIH in the expanded state within the pre-initiation complex | ||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / Pre-initiation complex | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of mitotic recombination / RNA polymerase II promoter clearance / phosphatidylinositol-5-phosphate binding / positive regulation of mitotic recombination / nucleotide-excision repair factor 3 complex / transcription factor TFIIE complex / DNA translocase activity / nucleotide-excision repair, preincision complex assembly / transcription factor TFIIK complex / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter ...regulation of mitotic recombination / RNA polymerase II promoter clearance / phosphatidylinositol-5-phosphate binding / positive regulation of mitotic recombination / nucleotide-excision repair factor 3 complex / transcription factor TFIIE complex / DNA translocase activity / nucleotide-excision repair, preincision complex assembly / transcription factor TFIIK complex / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / RPB4-RPB7 complex / DNA 5'-3' helicase / phosphatidylinositol-3-phosphate binding / transcription factor TFIIH holo complex / transcription factor TFIIH core complex / cyclin-dependent protein serine/threonine kinase activator activity / DNA 3'-5' helicase / transcription preinitiation complex / poly(A)+ mRNA export from nucleus / RNA Polymerase I Transcription Initiation / DNA duplex unwinding / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, deadenylation-dependent decay / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / 3'-5' DNA helicase activity / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA-templated transcription / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / termination of RNA polymerase III transcription / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / transcription initiation at RNA polymerase III promoter / termination of RNA polymerase I transcription / RNA Polymerase I Promoter Escape / nucleolar large rRNA transcription by RNA polymerase I / RNA polymerase II complex binding / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / transcription by RNA polymerase I / transcription initiation at RNA polymerase I promoter / Estrogen-dependent gene expression / nuclear-transcribed mRNA catabolic process / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / ATPase activator activity / transcription by RNA polymerase III / Dual incision in TC-NER / transcription elongation by RNA polymerase I / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / positive regulation of translational initiation / translesion synthesis / ATP-dependent activity, acting on DNA / RNA polymerase II, core complex / translation initiation factor binding / DNA helicase activity / isomerase activity / DNA-templated transcription initiation / nucleotide-excision repair / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / transcription elongation by RNA polymerase II / P-body / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / cytoplasmic stress granule / mRNA processing / ubiquitin protein ligase activity / ribosome biogenesis / single-stranded DNA binding / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / 5'-3' DNA helicase activity / double-stranded DNA binding / transcription by RNA polymerase II / damaged DNA binding / single-stranded RNA binding / DNA repair / mRNA binding / nucleotide binding / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / DNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) synthetic construct (人工物) | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Schilbach, S. / Aibara, S. / Dienemann, C. / Grabbe, F. / Cramer, P. | ||||||||||||||||||
資金援助 | ドイツ, 5件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2021 タイトル: Structure of RNA polymerase II pre-initiation complex at 2.9 Å defines initial DNA opening. 著者: Sandra Schilbach / Shintaro Aibara / Christian Dienemann / Frauke Grabbe / Patrick Cramer / 要旨: Transcription initiation requires assembly of the RNA polymerase II (Pol II) pre-initiation complex (PIC) and opening of promoter DNA. Here, we present the long-sought high-resolution structure of ...Transcription initiation requires assembly of the RNA polymerase II (Pol II) pre-initiation complex (PIC) and opening of promoter DNA. Here, we present the long-sought high-resolution structure of the yeast PIC and define the mechanism of initial DNA opening. We trap the PIC in an intermediate state that contains half a turn of open DNA located 30-35 base pairs downstream of the TATA box. The initially opened DNA region is flanked and stabilized by the polymerase "clamp head loop" and the TFIIF "charged region" that both contribute to promoter-initiated transcription. TFIIE facilitates initiation by buttressing the clamp head loop and by regulating the TFIIH translocase. The initial DNA bubble is then extended in the upstream direction, leading to the open promoter complex and enabling start-site scanning and RNA synthesis. This unique mechanism of DNA opening may permit more intricate regulation than in the Pol I and Pol III systems. | ||||||||||||||||||
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDBx/mmCIF形式 | 7o4l.cif.gz | 881.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7o4l.ent.gz | 657.2 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7o4l.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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文書・要旨 | 7o4l_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7o4l_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7o4l_validation.xml.gz | 118.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7o4l_validation.cif.gz | 180 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/o4/7o4l ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/o4/7o4l | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-General transcription and DNA repair factor IIH helicase subunit ... , 2種, 2分子 07
#1: タンパク質 | 分子量: 89899.047 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RAD3, REM1, YER171W / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P06839, DNA helicase |
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#8: タンパク質 | 分子量: 95461.664 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: SSL2, LOM3, RAD25, UVS112, YIL143C / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q00578, DNA helicase |
-General transcription and DNA repair factor IIH subunit ... , 5種, 5分子 12456
#2: タンパク質 | 分子量: 73194.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFB1, YDR311W, D9740.3 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P32776 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 58900.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFB2, YPL122C / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q02939 |
#5: タンパク質 | 分子量: 37778.676 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFB4, YPR056W / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q12004 |
#6: タンパク質 | 分子量: 8541.787 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFB5, YDR079C-A / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q3E7C1 |
#7: タンパク質 | 分子量: 52571.215 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: SSL1, YLR005W / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q04673 |
-タンパク質 , 2種, 2分子 3F
#4: タンパク質 | 分子量: 38480.746 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFB3, RIG2, YDR460W / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q03290 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 17931.834 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P20435 |
-DNA-directed RNA polymerase II subunit ... , 4種, 4分子 ABDG
#9: タンパク質 | 分子量: 191821.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P04050, DNA-directed RNA polymerase |
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#10: タンパク質 | 分子量: 138937.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 参照: UniProt: P08518, DNA-directed RNA polymerase |
#11: タンパク質 | 分子量: 25451.191 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPB4, YJL140W, J0654 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P20433 |
#13: タンパク質 | 分子量: 19909.934 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: RPB7, YDR404C, D9509.22 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P34087 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
#14: DNA鎖 | 分子量: 32716.977 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
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#15: DNA鎖 | 分子量: 32680.920 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-Transcription initiation factor IIE subunit ... , 2種, 2分子 WX
#16: タンパク質 | 分子量: 55951.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFA1, YKL028W / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P36100 |
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#17: タンパク質 | 分子量: 37050.434 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: TFA2, YKR062W / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P36145 |
-非ポリマー , 5種, 15分子
#18: 化合物 | ChemComp-SF4 / | ||||||
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#19: 化合物 | ChemComp-ZN / #20: 化合物 | ChemComp-BEF / | #21: 化合物 | ChemComp-MG / | #22: 化合物 | ChemComp-ADP / | |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Yeast TFIIH in the expanded state within the pre-initiation complex タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#17 / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 値: 1.37 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 7.6 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R3.5/1 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / アライメント法: ZEMLIN TABLEAU |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN |
撮影 | 平均露光時間: 9 sec. / 電子線照射量: 43.6 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 実像数: 29670 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 4300000 | |||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 34198 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 5OQJ Accession code: 5OQJ / Source name: PDB / タイプ: experimental model |