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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7kzr | ||||||
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タイトル | Structure of the human Fanconi Anaemia Core-UBE2T-ID complex | ||||||
要素 |
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キーワード | LIGASE / Complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of germ cell proliferation / regulation of CD40 signaling pathway / Fanconi anaemia nuclear complex / protein K27-linked ubiquitination / regulation of regulatory T cell differentiation / protein K29-linked ubiquitination / homologous chromosome pairing at meiosis / male meiotic nuclear division / double-strand break repair involved in meiotic recombination / gamete generation ...regulation of germ cell proliferation / regulation of CD40 signaling pathway / Fanconi anaemia nuclear complex / protein K27-linked ubiquitination / regulation of regulatory T cell differentiation / protein K29-linked ubiquitination / homologous chromosome pairing at meiosis / male meiotic nuclear division / double-strand break repair involved in meiotic recombination / gamete generation / neuronal stem cell population maintenance / replication-born double-strand break repair via sister chromatid exchange / protein K6-linked ubiquitination / brain morphogenesis / protein K11-linked ubiquitination / myeloid cell homeostasis / DNA repair complex / mitotic intra-S DNA damage checkpoint signaling / E2 ubiquitin-conjugating enzyme / female gonad development / protein monoubiquitination / germ cell development / ubiquitin conjugating enzyme activity / protein K63-linked ubiquitination / spermatid development / negative regulation of double-strand break repair via homologous recombination / positive regulation of double-strand break repair via homologous recombination / protein autoubiquitination / protein K48-linked ubiquitination / interstrand cross-link repair / DNA polymerase binding / condensed chromosome / ovarian follicle development / removal of superoxide radicals / Synthesis of active ubiquitin: roles of E1 and E2 enzymes / response to gamma radiation / mitochondrion organization / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / nucleotide-excision repair / Fanconi Anemia Pathway / RING-type E3 ubiquitin transferase / response to radiation / PKR-mediated signaling / protein polyubiquitination / ubiquitin-protein transferase activity / male gonad development / ubiquitin protein ligase activity / nuclear envelope / chromosome / regulation of cell population proliferation / cellular response to oxidative stress / regulation of inflammatory response / protein-containing complex assembly / damaged DNA binding / nuclear body / intracellular membrane-bounded organelle / DNA repair / centrosome / DNA damage response / chromatin binding / ubiquitin protein ligase binding / chromatin / nucleolus / mitochondrion / DNA binding / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.4 Å | ||||||
データ登録者 | Wang, S.L. / Pavletich, N.P. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2021 タイトル: Structure of the FA core ubiquitin ligase closing the ID clamp on DNA. 著者: Shengliu Wang / Renjing Wang / Christopher Peralta / Ayat Yaseen / Nikola P Pavletich / 要旨: The Fanconi anemia (FA) pathway is essential for the repair of DNA interstrand crosslinks. Central to the pathway is the FA core complex, a ubiquitin ligase of nine subunits that monoubiquitinates ...The Fanconi anemia (FA) pathway is essential for the repair of DNA interstrand crosslinks. Central to the pathway is the FA core complex, a ubiquitin ligase of nine subunits that monoubiquitinates the FANCI-FANCD2 (ID) DNA clamp. The 3.1 Å structure of the 1.1-MDa human FA core complex, described here, reveals an asymmetric assembly with two copies of all but the FANCC, FANCE and FANCF subunits. The asymmetry is crucial, as it prevents the binding of a second FANCC-FANCE-FANCF subcomplex that inhibits the recruitment of the UBE2T ubiquitin conjugating enzyme, and instead creates an ID binding site. A single active site then ubiquitinates FANCD2 and FANCI sequentially. We also present the 4.2-Å structures of the human core-UBE2T-ID-DNA complex in three conformations captured during monoubiquitination. They reveal the core-UBE2T complex remodeling the ID-DNA complex, closing the clamp on the DNA before ubiquitination. Monoubiquitination then prevents clamp opening after release from the core. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7kzr.cif.gz | 8.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7kzr.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7kzr.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7kzr_validation.pdf.gz | 936.8 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7kzr_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7kzr_validation.xml.gz | 258.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7kzr_validation.cif.gz | 410.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/kz/7kzr ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/kz/7kzr | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-Fanconi anemia group ... , 7種, 10分子 ASBOCEFGHV
#1: タンパク質 | 分子量: 165513.016 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCA, FAA, FACA, FANCH / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O15360 #2: タンパク質 | 分子量: 100640.172 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCB / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8NB91 #3: タンパク質 | | 分子量: 66290.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCC, FAC, FACC / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q00597 #4: タンパク質 | | 分子量: 61026.086 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCE, FACE / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9HB96 #5: タンパク質 | | 分子量: 45108.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCF / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NPI8 #6: タンパク質 | 分子量: 70873.727 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCG, XRCC9 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O15287 #11: タンパク質 | | 分子量: 164325.516 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCD2, FACD 発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: Q9BXW9 |
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-タンパク質 , 3種, 4分子 LMUX
#7: タンパク質 | 分子量: 45203.953 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCL, PHF9 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NW38, RING-type E3 ubiquitin transferase #10: タンパク質 | | 分子量: 149512.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FANCI 発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) 参照: UniProt: B7ZMF2 #12: タンパク質 | | 分子量: 22553.873 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: UBE2T, HSPC150, PIG50 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9NPD8, E2 ubiquitin-conjugating enzyme |
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-Fanconi anemia core complex-associated protein ... , 2種, 3分子 PQW
#8: タンパク質 | 分子量: 96513.898 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: FAAP100, C17orf70 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q0VG06 #9: タンパク質・ペプチド | | 分子量: 4041.667 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
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-非ポリマー , 1種, 5分子
#13: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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配列の詳細 | The complete sequence of FAAP20 is MEAARRPRLGLSRRRPPPAGGPSGGRPWFLLGGDERERLWAELLRTVSPELILDHEVPSL ...The complete sequence of FAAP20 is MEAARRPRLG |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Human Fanconi Anaemia Core-UBE2T-ID complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#12 / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||||||||||
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分子量 | 値: 1.4 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: REFMAC / バージョン: 5.8.0267 / 分類: 精密化 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 114249 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 解像度: 4.4→4.4 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.967 / SU B: 114.471 / SU ML: 0.615 / ESU R: 0.735 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES 詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
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溶媒の処理 | イオンプローブ半径: 0.9 Å / 減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.1 Å / 溶媒モデル: MASK | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 79.835 Å2
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精密化ステップ | サイクル: 1 / 合計: 86745 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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