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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7khw | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of enteropathogenic Escherichia coli type III secretion system EspA filament | ||||||
要素 | Translocon EspA | ||||||
キーワード | PROTEIN FIBRIL / type III secretion system (T3SS) / EspA filament / Helical reconstruction | ||||||
機能・相同性 | EspA-like secreted protein / EspA-like secreted protein / EspA/CesA-like / Translocon EspA 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Escherichia coli O127:H6 (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||
データ登録者 | Zheng, W. / Ilangovan, A. / Costa, T.R.D. / Egelman, E.H. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2021 タイトル: Cryoelectron-microscopy structure of the enteropathogenic type III secretion system EspA filament. 著者: Weili Zheng / Alejandro Peña / Aravindan Ilangovan / Yasaman Naemi Baghshomali / Gad Frankel / Edward H Egelman / Tiago R D Costa / 要旨: Enteropathogenic (EPEC) and enterohemorrhagic (EHEC) utilize a macromolecular type III secretion system (T3SS) to inject effector proteins into eukaryotic cells. This apparatus spans the inner and ...Enteropathogenic (EPEC) and enterohemorrhagic (EHEC) utilize a macromolecular type III secretion system (T3SS) to inject effector proteins into eukaryotic cells. This apparatus spans the inner and outer bacterial membranes and includes a helical needle protruding into the extracellular space. Thus far observed only in EPEC and EHEC and not found in other pathogenic Gram-negative bacteria that have a T3SS is an additional helical filament made by the EspA protein that forms a long extension to the needle, mediating both attachment to eukaryotic cells and transport of effector proteins through the intestinal mucus layer. Here, we present the structure of the EspA filament from EPEC at 3.4 Å resolution. The structure reveals that the EspA filament is a right-handed 1-start helical assembly with a conserved lumen architecture with respect to the needle to ensure the seamless transport of unfolded cargos en route to the target cell. This functional conservation is despite the fact that there is little apparent overall conservation at the level of sequence or structure with the needle. We also unveil the molecular details of the immunodominant EspA epitope that can now be exploited for the rational design of epitope display systems. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7khw.cif.gz | 1.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7khw.ent.gz | 1.1 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7khw.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7khw_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7khw_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7khw_validation.xml.gz | 183.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7khw_validation.cif.gz | 250.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/kh/7khw ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/kh/7khw | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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対称性 | らせん対称: (回転対称性: 1 / Dyad axis: no / N subunits divisor: 1 / Num. of operations: 50 / Rise per n subunits: 4.4 Å / Rotation per n subunits: 64.3 °) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 20482.811 Da / 分子数: 50 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Escherichia coli O127:H6 (strain E2348/69 / EPEC) (大腸菌) 株: E2348/69 / EPEC / 参照: UniProt: B7UM94 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: FILAMENT / 3次元再構成法: らせん対称体再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: EspA filament / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli O127:H6 (strain E2348/69 / EPEC) (大腸菌) 株: E2348/69 / EPEC |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: unspecified |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN |
撮影 | 電子線照射量: 55 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||
らせん対称 | 回転角度/サブユニット: 64.3 ° / 軸方向距離/サブユニット: 4.4 Å / らせん対称軸の対称性: C1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 159460 / 対称性のタイプ: HELICAL |