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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7etw | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of Scap/Insig complex in the present of digitonin. | |||||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / sterol sensing / SREBP / Scap / Insig / cholestrol / digitonin | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 SREBP-SCAP complex retention in endoplasmic reticulum / SREBP-SCAP-Insig complex / cranial suture morphogenesis / SREBP-SCAP complex / negative regulation of steroid biosynthetic process / regulation of cholesterol biosynthetic process / cellular lipid metabolic process / response to vitamin B3 / sterol binding / SREBP signaling pathway ...SREBP-SCAP complex retention in endoplasmic reticulum / SREBP-SCAP-Insig complex / cranial suture morphogenesis / SREBP-SCAP complex / negative regulation of steroid biosynthetic process / regulation of cholesterol biosynthetic process / cellular lipid metabolic process / response to vitamin B3 / sterol binding / SREBP signaling pathway / COPII-coated vesicle cargo loading / negative regulation of cholesterol biosynthetic process / regulation of fatty acid biosynthetic process / negative regulation of fatty acid biosynthetic process / positive regulation of cholesterol biosynthetic process / Regulation of cholesterol biosynthesis by SREBP (SREBF) / oxysterol binding / middle ear morphogenesis / inner ear morphogenesis / triglyceride metabolic process / roof of mouth development / cholesterol biosynthetic process / protein sequestering activity / cholesterol metabolic process / response to insulin / ER to Golgi transport vesicle membrane / cellular response to insulin stimulus / unfolded protein binding / response to hypoxia / immune response / Golgi membrane / endoplasmic reticulum membrane / protein-containing complex binding / Golgi apparatus / endoplasmic reticulum / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Yan, R. / Cao, P. / Song, W. / Li, Y. / Wang, T. / Qian, H. / Yan, C. / Yan, N. | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Cell Rep / 年: 2021 タイトル: Structural basis for sterol sensing by Scap and Insig. 著者: Renhong Yan / Pingping Cao / Wenqi Song / Yaning Li / Tongtong Wang / Hongwu Qian / Chuangye Yan / Nieng Yan / 要旨: The sterol regulatory element-binding protein (SREBP) pathway monitors the cellular cholesterol level through sterol-regulated association between the SREBP cleavage-activating protein (Scap) and the ...The sterol regulatory element-binding protein (SREBP) pathway monitors the cellular cholesterol level through sterol-regulated association between the SREBP cleavage-activating protein (Scap) and the insulin-induced gene (Insig). Despite structural determination of the Scap and Insig-2 complex bound to 25-hydroxycholesterol, the luminal domains of Scap remain unresolved. In this study, combining cryogenic electron microscopy (cryo-EM) analysis and artificial intelligence-facilitated structural prediction, we report the structure of the human Scap/Insig-2 complex purified in digitonin. The luminal domain loop 1 and a co-folded segment in loop 7 of Scap resemble those of the luminal/extracellular domain in NPC1 and related proteins, providing clues to the cholesterol-regulated interaction of loop 1 and loop 7. An additional luminal interface is observed between Scap and Insig. We also show that Scap(D428A), which inhibits SREBP activation even under sterol depletion, exhibits an identical conformation with the wild-type protein when complexed with Insig-2, and its constitutive suppression of the SREBP pathway may also involve a later step in protein trafficking. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7etw.cif.gz | 130.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7etw.ent.gz | 100.5 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7etw.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7etw_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7etw_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7etw_validation.xml.gz | 27.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7etw_validation.cif.gz | 39.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/et/7etw ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/et/7etw | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 24749.660 Da / 分子数: 1 / 変異: C14S, C90S, C215S / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: INSIG2 / 細胞株 (発現宿主): HEK293F / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y5U4 | ||
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#2: タンパク質 | 分子量: 81863.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SCAP, KIAA0199, PSEC0227 / 細胞株 (発現宿主): HEK293F / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q12770 | ||
#3: 多糖 | 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose-(1-4)-2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose | ||
#4: 化合物 | ChemComp-AJP / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Scap and Insig complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 細胞: HEK293S |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 10 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 252929 / 対称性のタイプ: POINT |