+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7bfp | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structure of the Integrator cleavage module with INTS4/9/11 | ||||||
要素 |
| ||||||
キーワード | NUCLEAR PROTEIN / Nuclease / Integrator / 3'-end processing | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 snRNA 3'-end processing / snRNA processing / integrator complex / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 3'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA endonuclease activity / negative regulation of transforming growth factor beta receptor signaling pathway / blood microparticle / nucleolus ...snRNA 3'-end processing / snRNA processing / integrator complex / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 3'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA endonuclease activity / negative regulation of transforming growth factor beta receptor signaling pathway / blood microparticle / nucleolus / nucleoplasm / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.56 Å | ||||||
データ登録者 | Pfleiderer, M.M. / Galej, W.P. | ||||||
引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2021 タイトル: Structure of the catalytic core of the Integrator complex. 著者: Moritz M Pfleiderer / Wojciech P Galej / 要旨: The Integrator is a specialized 3' end-processing complex involved in cleavage and transcription termination of a subset of nascent RNA polymerase II transcripts, including small nuclear RNAs (snRNAs) ...The Integrator is a specialized 3' end-processing complex involved in cleavage and transcription termination of a subset of nascent RNA polymerase II transcripts, including small nuclear RNAs (snRNAs). We provide evidence of the modular nature of the Integrator complex by biochemically characterizing its two subcomplexes, INTS5/8 and INTS10/13/14. Using cryoelectron microscopy (cryo-EM), we determined a 3.5-Å-resolution structure of the INTS4/9/11 ternary complex, which constitutes Integrator's catalytic core. Our structure reveals the spatial organization of the catalytic nuclease INTS11, bound to its catalytically impaired homolog INTS9 via several interdependent interfaces. INTS4, a helical repeat protein, plays a key role in stabilizing nuclease domains and other components. In this assembly, all three proteins form a composite electropositive groove, suggesting a putative RNA binding path within the complex. Comparison with other 3' end-processing machineries points to distinct features and a unique architecture of the Integrator's catalytic module. | ||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7bfp.cif.gz | 291.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb7bfp.ent.gz | 215.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7bfp.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7bfp_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 7bfp_full_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7bfp_validation.xml.gz | 54 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7bfp_validation.cif.gz | 80.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bf/7bfp ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bf/7bfp | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 73891.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: INTS9, RC74 / 細胞株 (発現宿主): Hi5 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9NV88 |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 110164.773 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: INTS4, MSTP093 / 細胞株 (発現宿主): Hi5 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q96HW7 |
#3: タンパク質 | 分子量: 72690.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: INTS11, CPSF3L, RC68 / 細胞株 (発現宿主): Hi5 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) 参照: UniProt: Q5TA45, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 3'-リン酸モノエステル産生エンドリボヌクレアーゼ |
#4: タンパク質・ペプチド | 分子量: 3081.790 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Heterotrimeric cleavage module of the Integrator complex タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
---|---|
分子量 | 値: 257 kDa/nm / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
由来(組換発現) | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 株: Hi5 |
緩衝液 | pH: 7.8 / 詳細: 150 mM KCl, 20 mM HEPES-KOH pH 7.8 |
試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: UltrAuFoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 165000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 300 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 平均露光時間: 5 sec. / 電子線照射量: 44 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 19268 |
画像スキャン | 横: 3838 / 縦: 3710 / 動画フレーム数/画像: 40 |
-解析
ソフトウェア | 名称: REFMAC / バージョン: 5.8.0253 / 分類: 精密化 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
EMソフトウェア |
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 9124445 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.56 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 26358 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: RECIPROCAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 解像度: 3.56→3.56 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.762 / SU B: 62.878 / SU ML: 0.823 / ESU R: 1.094 立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
溶媒の処理 | 溶媒モデル: PARAMETERS FOR MASK CACLULATION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 148.632 Å2
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: 1 / 合計: 10068 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
|