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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7b9v | |||||||||
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タイトル | Yeast C complex spliceosome at 2.8 Angstrom resolution with Prp18/Slu7 bound | |||||||||
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![]() | SPLICING / spliceosome / RNA / ribozyme | |||||||||
機能・相同性 | ![]() second spliceosomal transesterification activity / pre-mRNA 3'-splice site binding / post-mRNA release spliceosomal complex / splicing factor binding / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U4/U6 snRNP / Prp19 complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex / pre-mRNA binding ...second spliceosomal transesterification activity / pre-mRNA 3'-splice site binding / post-mRNA release spliceosomal complex / splicing factor binding / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / U4/U6 snRNP / Prp19 complex / 7-methylguanosine cap hypermethylation / pICln-Sm protein complex / pre-mRNA binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / poly(U) RNA binding / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / spliceosomal complex assembly / mRNA 5'-splice site recognition / regulation of RNA splicing / mRNA 3'-splice site recognition / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / U5 snRNA binding / U5 snRNP / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / pre-mRNA intronic binding / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / RNA splicing / helicase activity / spliceosomal complex / mRNA processing / mRNA splicing, via spliceosome / metallopeptidase activity / nucleic acid binding / RNA helicase activity / RNA helicase / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / ATP hydrolysis activity / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / identical protein binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.8 Å | |||||||||
![]() | Wilkinson, M.E. / Fica, S.M. / Galej, W.P. / Nagai, K. | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis for conformational equilibrium of the catalytic spliceosome. 著者: Max E Wilkinson / Sebastian M Fica / Wojciech P Galej / Kiyoshi Nagai / ![]() 要旨: The ATPase Prp16 governs equilibrium between the branching (B/C) and exon ligation (C/P) conformations of the spliceosome. Here, we present the electron cryomicroscopy reconstruction of the ...The ATPase Prp16 governs equilibrium between the branching (B/C) and exon ligation (C/P) conformations of the spliceosome. Here, we present the electron cryomicroscopy reconstruction of the Saccharomyces cerevisiae C-complex spliceosome at 2.8 Å resolution and identify a novel C-complex intermediate (C) that elucidates the molecular basis for this equilibrium. The exon-ligation factors Prp18 and Slu7 bind to C before ATP hydrolysis by Prp16 can destabilize the branching conformation. Biochemical assays suggest that these pre-bound factors prime the C complex for conversion to C by Prp16. A complete model of the Prp19 complex (NTC) reveals how the branching factors Yju2 and Isy1 are recruited by the NTC before branching. Prp16 remodels Yju2 binding after branching, allowing Yju2 to remain tethered to the NTC in the C complex to promote exon ligation. Our results explain how Prp16 action modulates the dynamic binding of step-specific factors to alternatively stabilize the C or C conformation and establish equilibrium of the catalytic spliceosome. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 280.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 470.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 12106MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | ![]() Data #1: Unaligned movies of C-complex spliceosome with 3' splice site AG to AC mutation (Dataset 1) [micrographs - multiframe] Data #2: Unaligned movies of C and C*-complex spliceosomes with 3' splice site AG to AdG mutation (Dataset 2) [micrographs - multiframe] Data #3: Unaligned movies of C and C*-complex spliceosomes with 3' splice site AG to AdG mutation (Dataset 3) [micrographs - multiframe] Data #4: Aligned movies of C-complex spliceosomes with cold-sensitive prp16-302 mutation, purified with Cwc25 (Dataset 4) [micrographs - multiframe] Data #5: Unaligned movies of C-complex spliceosomes with cold-sensitive prp16-302 mutation, purified with Cwc25 and incubated with ATP and Mg (Dataset 5) [micrographs - multiframe] Data #6: Unaligned movies of C, C*, and P-complex spliceosomes with dominant-negative Prp22 mutation K512A, purified with Slu7 (Dataset 6) [micrographs - multiframe] Data #7: Unaligned movies of P-complex spliceosomes with dominant-negative Prp22 mutation K512A, treated with anti-3'exon RNaseH oligo, purified in presence of Mg (Dataset 9) [micrographs - single frame] Data #8: Selected C-complex particles after polishing [picked particles - single frame - processed] Data #9: Selected P-complex particles after polishing [picked particles - single frame - processed] Data #10: Various signal subtractions for C- and P-complex spliceosomes [picked particles - single frame - processed]) |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 256EI
#1: RNA鎖 | 分子量: 376267.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 68643.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#3: RNA鎖 | 分子量: 35883.176 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#8: RNA鎖 | 分子量: 15041.942 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
#12: RNA鎖 | 分子量: 30200.730 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 12種, 12分子 ACFGMNPQRacy
#4: タンパク質 | 分子量: 279867.469 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#6: タンパク質 | 分子量: 114174.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#9: タンパク質 | 分子量: 20010.055 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#10: タンパク質 | 分子量: 27625.459 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#16: タンパク質 | 分子量: 38486.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#17: タンパク質 | 分子量: 40988.590 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#19: タンパク質 | 分子量: 19975.195 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#20: タンパク質 | 分子量: 121815.234 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#21: タンパク質 | 分子量: 15793.596 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#28: タンパク質 | 分子量: 28414.391 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#30: タンパク質 | 分子量: 44722.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#40: タンパク質 | 分子量: 24850.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 15種, 16分子 BDHJLOSTWXYZbkos
#5: タンパク質 | 分子量: 246470.266 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
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#7: タンパク質 | 分子量: 33360.461 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#11: タンパク質 | 分子量: 67386.062 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#13: タンパク質 | 分子量: 50771.289 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#15: タンパク質 | 分子量: 18484.502 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#18: タンパク質 | 分子量: 67085.984 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#22: タンパク質 | 分子量: 82555.859 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#23: タンパク質 | 分子量: 100344.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#24: タンパク質 | 分子量: 27232.252 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#25: タンパク質 | 分子量: 20443.113 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#26: タンパク質 | 分子量: 12850.944 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#27: タンパク質 | 分子量: 15992.927 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() | ||||
#29: タンパク質 | 分子量: 22426.990 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #37: タンパク質 | | 分子量: 52208.738 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #38: タンパク質 | | 分子量: 20741.455 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-Pre-mRNA-processing ... , 2種, 5分子 Ktuvw
#14: タンパク質 | 分子量: 42548.727 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#39: タンパク質 | 分子量: 56629.777 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() 参照: UniProt: A0A6A5PQI0, RING-type E3 ubiquitin transferase |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 dnepfqgrhljm
#31: タンパク質 | 分子量: 11240.139 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #32: タンパク質 | 分子量: 10385.098 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #33: タンパク質 | 分子量: 9669.945 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #34: タンパク質 | 分子量: 8490.809 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #35: タンパク質 | 分子量: 16296.798 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() #36: タンパク質 | 分子量: 12876.066 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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-非ポリマー , 5種, 17分子 ![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/K.gif)
![](data/chem/img/KGN.gif)
![](data/chem/img/GTP.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/K.gif)
![](data/chem/img/KGN.gif)
![](data/chem/img/GTP.gif)
![](data/chem/img/ZN.gif)
#41: 化合物 | ChemComp-MG / #42: 化合物 | ChemComp-K / | #43: 化合物 | ChemComp-KGN / | #44: 化合物 | ChemComp-GTP / | #45: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Yeast C complex spliceosome with Prp18/Slu7 bound / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#40 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 値: 2 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 9 / 実像数: 24115 |
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解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 403474 / 対称性のタイプ: POINT |