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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 6ted | |||||||||||||||
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| タイトル | Structure of complete, activated transcription complex Pol II-DSIF-PAF-SPT6 uncovers allosteric elongation activation by RTF1 | |||||||||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / Polymerase / elongation complex / RNA / DNA | |||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase I Transcription Termination / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / blastocyst growth / Ski complex / RNA polymerase II C-terminal domain phosphoserine binding ...B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase I Transcription Termination / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / blastocyst growth / Ski complex / RNA polymerase II C-terminal domain phosphoserine binding / mRNA decay by 3' to 5' exoribonuclease / inner cell mass cell differentiation / positive regulation of mRNA 3'-end processing / regulation of isotype switching / Cdc73/Paf1 complex / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, 3'-5' exonucleolytic nonsense-mediated decay / negative regulation of DNA-templated transcription, elongation / : / endodermal cell fate commitment / regulation of muscle cell differentiation / negative regulation of myeloid cell differentiation / positive regulation of cell cycle G1/S phase transition / trophectodermal cell differentiation / DSIF complex / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / blastocyst hatching / nucleosome organization / Formation of RNA Pol II elongation complex / Formation of the Early Elongation Complex / Transcriptional regulation by small RNAs / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / FGFR2 alternative splicing / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / mRNA Capping / mRNA Splicing - Minor Pathway / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Estrogen-dependent gene expression / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA Splicing - Major Pathway / blastocyst formation / transcription elongation-coupled chromatin remodeling / mRNA 3'-end processing / positive regulation of DNA-templated transcription, elongation / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / interleukin-6-mediated signaling pathway / stem cell population maintenance / negative regulation of G1/S transition of mitotic cell cycle / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / mRNA Capping / organelle membrane / negative regulation of gene expression, epigenetic / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / RNA polymerase II complex binding / negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / positive regulation of macroautophagy / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / positive regulation of translational initiation / mRNA transport / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / protein localization to nucleus / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / cell surface receptor signaling pathway via JAK-STAT / positive regulation of Wnt signaling pathway / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / nucleosome binding / negative regulation of fibroblast proliferation / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / RNA Polymerase II Transcription Elongation / transcription elongation by RNA polymerase I / Formation of RNA Pol II elongation complex / RNA polymerase II, core complex / tRNA transcription by RNA polymerase III / transcription by RNA polymerase I / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / transcription-coupled nucleotide-excision repair / translation initiation factor binding / SH2 domain binding / rescue of stalled cytosolic ribosome / RNA splicing / transcription elongation factor complex / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase II 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト)![]() synthetic construct (人工物) | |||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Vos, S.M. / Farnung, L. / Cramer, P. | |||||||||||||||
| 資金援助 | ドイツ, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2020タイトル: Structure of complete Pol II-DSIF-PAF-SPT6 transcription complex reveals RTF1 allosteric activation. 著者: Seychelle M Vos / Lucas Farnung / Andreas Linden / Henning Urlaub / Patrick Cramer / ![]() 要旨: Transcription by RNA polymerase II (Pol II) is carried out by an elongation complex. We previously reported an activated porcine Pol II elongation complex, EC*, encompassing the human elongation ...Transcription by RNA polymerase II (Pol II) is carried out by an elongation complex. We previously reported an activated porcine Pol II elongation complex, EC*, encompassing the human elongation factors DSIF, PAF1 complex (PAF) and SPT6. Here we report the cryo-EM structure of the complete EC* that contains RTF1, a dissociable PAF subunit critical for chromatin transcription. The RTF1 Plus3 domain associates with Pol II subunit RPB12 and the phosphorylated C-terminal region of DSIF subunit SPT5. RTF1 also forms four α-helices that extend from the Plus3 domain along the Pol II protrusion and RPB10 to the polymerase funnel. The C-terminal 'fastener' helix retains PAF and is followed by a 'latch' that reaches the end of the bridge helix, a flexible element of the Pol II active site. RTF1 strongly stimulates Pol II elongation, and this requires the latch, possibly suggesting that RTF1 activates transcription allosterically by influencing Pol II translocation. | |||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
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| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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| PDBx/mmCIF形式 | 6ted.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb6ted.ent.gz | 1 MB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 6ted.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/te/6ted ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/te/6ted | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
-DNA-directed RNA polymerase ... , 3種, 3分子 ABI
| #1: タンパク質 | 分子量: 219049.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #2: タンパク質 | 分子量: 142426.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #9: タンパク質 | 分子量: 14541.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-RNA polymerase II subunit ... , 5種, 5分子 CDEFG
| #3: タンパク質 | 分子量: 31439.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #4: タンパク質 | 分子量: 16331.255 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #5: タンパク質 | 分子量: 24644.318 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #6: タンパク質 | 分子量: 14477.001 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #7: タンパク質 | 分子量: 19314.283 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-タンパク質 , 4種, 4分子 HVWX
| #8: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #20: タンパク質 | 分子量: 60052.672 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: PAF1, PD2 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q8N7H5 |
| #21: タンパク質 | 分子量: 33617.465 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: WDR61 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q9GZS3 |
| #22: タンパク質 | 分子量: 60673.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CDC73, C1orf28, HRPT2 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q6P1J9 |
-Uncharacterized ... , 3種, 3分子 JKL
| #10: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #11: タンパク質 | 分子量: 13310.284 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #12: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Transcription elongation factor ... , 3種, 3分子 MYZ
| #13: タンパク質 | 分子量: 199602.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SUPT6H, KIAA0162, SPT6H / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q7KZ85 |
|---|---|
| #23: タンパク質 | 分子量: 13508.496 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SUPT4H1, SPT4H, SUPT4H / 発現宿主: ![]() |
| #24: タンパク質 | 分子量: 121225.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SUPT5H, SPT5, SPT5H / 発現宿主: ![]() |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
| #14: DNA鎖 | 分子量: 14932.533 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
|---|---|
| #18: DNA鎖 | 分子量: 14672.335 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
| #15: RNA鎖 | 分子量: 14843.892 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
|---|
-RNA polymerase-associated protein ... , 3種, 3分子 QRU
| #16: タンパク質 | 分子量: 134510.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CTR9, KIAA0155, SH2BP1 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q6PD62 |
|---|---|
| #17: タンパク質 | 分子量: 80733.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: RTF1, KIAA0252 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q92541 |
| #19: タンパク質 | 分子量: 75514.172 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: LEO1, RDL / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q8WVC0 |
-非ポリマー , 2種, 10分子 


| #25: 化合物 | ChemComp-ZN / #26: 化合物 | ChemComp-MG / | |
|---|
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
|---|---|
| Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 |
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 分子量 | 値: 1.34 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 由来(天然) |
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| 由来(組換発現) |
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| 緩衝液 | pH: 7.4 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのタイプ: UltrAuFoil | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K 詳細: 2 microliters applied to both sides of grid. Sample incubated on grid for 10s prior to blotting. Blotting for 8.5s. |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 130000 X / アライメント法: COMA FREE |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 平均露光時間: 10 sec. / 電子線照射量: 40 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 3 / 実像数: 13679 |
| 電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
| 画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 |
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解析
| ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.16_3549: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 611983 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 446195 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | B value: 115 / プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 |
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| 拘束条件 |
|
ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)

ドイツ, 4件
引用
UCSF Chimera

















PDBj







































































Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)




