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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6lt4 | ||||||||||||
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タイトル | AAA+ ATPase, ClpL from Streptococcus pneumoniae: ATPrS-bound | ||||||||||||
要素 | ATP-dependent Clp protease, ATP-binding subunit | ||||||||||||
キーワード | CHAPERONE / AAA+ ATPase / ClpL / Streptococcus pneumoniae | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | ||||||||||||
生物種 | Streptococcus pneumoniae serotype 2 | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Kim, G. / Lee, S.G. / Han, S. / Jung, J. / Jeong, H.S. / Hyun, J.K. / Rhee, D.K. / Kim, H.M. / Lee, S. | ||||||||||||
資金援助 | 韓国, 3件
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引用 | ジャーナル: FASEB J / 年: 2020 タイトル: ClpL is a functionally active tetradecameric AAA+ chaperone, distinct from hexameric/dodecameric ones. 著者: Gyuhee Kim / Seong-Gyu Lee / Seungsu Han / Jaeeun Jung / Hyeong Seop Jeong / Jae-Kyung Hyun / Dong-Kwon Rhee / Ho Min Kim / Sangho Lee / 要旨: AAA+ (ATPases associated with diverse cellular activities) chaperones are involved in a plethora of cellular activities to ensure protein homeostasis. The function of AAA+ chaperones is mostly ...AAA+ (ATPases associated with diverse cellular activities) chaperones are involved in a plethora of cellular activities to ensure protein homeostasis. The function of AAA+ chaperones is mostly modulated by their hexameric/dodecameric quaternary structures. Here we report the structural and biochemical characterizations of a tetradecameric AAA+ chaperone, ClpL from Streptococcus pneumoniae. ClpL exists as a tetradecamer in solution in the presence of ATP. The cryo-EM structure of ClpL at 4.5 Å resolution reveals a striking tetradecameric arrangement. Solution structures of ClpL derived from small-angle X-ray scattering data suggest that the tetradecameric ClpL could assume a spiral conformation found in active hexameric/dodecameric AAA+ chaperone structures. Vertical positioning of the middle domain accounts for the head-to-head arrangement of two heptameric rings. Biochemical activity assays with site-directed mutagenesis confirmed the critical roles of residues both in the integrity of the tetradecameric arrangement and activities of ClpL. Non-conserved Q321 and R670 are crucial in the heptameric ring assembly of ClpL. These results establish that ClpL is a functionally active tetradecamer, clearly distinct from hexameric/dodecameric AAA+ chaperones. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6lt4.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6lt4.ent.gz | 1.2 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6lt4.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6lt4_validation.pdf.gz | 2.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6lt4_full_validation.pdf.gz | 2.9 MB | 表示 | |
XML形式データ | 6lt4_validation.xml.gz | 258.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6lt4_validation.cif.gz | 372.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/lt/6lt4 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/lt/6lt4 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 77599.094 Da / 分子数: 14 / 変異: E193A/E526A / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Streptococcus pneumoniae serotype 2 (strain D39 / NCTC 7466) (肺炎レンサ球菌) 遺伝子: clpL, SPD_0308 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0H2ZMB9 #2: 化合物 | ChemComp-MG / #3: 化合物 | ChemComp-AGS / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: AAA+ ATPase, chaperone / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 1.1 MDa / 実験値: YES |
由来(天然) | 生物種: Streptococcus pneumoniae (肺炎レンサ球菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: DARK FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 60 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: phenix.real_space_refine / バージョン: 1.18.2_3874 / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 49797 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 118.27 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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